| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 5g |
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| 靶点 |
Trigonelline targets multiple pathways. It inhibits nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2) activity, with maximal inhibition at 0.1-1 μM, reducing Nrf2 nuclear accumulation without affecting total Nrf2 protein expression [3]. It suppresses Nrf2-dependent proteasome activity and proteasomal gene expression (s5a/psmd4, s5/psma5) [3]. It also increases antioxidant enzyme activities (SOD, catalase) and reduces MDA levels in H9c2 cells [1]. In pancreatic cancer cells, trig reduces proteasome activity by 36-72% depending on cell line [3].
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| 体外研究 (In Vitro) |
心肌细胞保护（H9c2细胞）： 葫芦巴碱（25-100 μM，预处理48小时）显著拯救H9c2细胞形态免受H₂O₂（100 μM，4小时）诱导的氧化损伤，将细胞活力从约50%提高至约80-90%，减少坏死和凋亡（流式细胞术），降低caspase-3表达，增加Bcl-2和Bcl-XL表达。它还增加了SOD、过氧化氢酶和GSH水平，同时降低MDA含量。较高浓度（125-150 μM）诱导细胞死亡。槲皮素（100 μM）用作阳性对照[1]。
胰腺癌细胞中的Nrf2抑制： 葫芦巴碱（0.1-1 μM，1-16小时）剂量依赖性地抑制Panc1、Colo357、MiaPaca2和H6c7细胞中ARE驱动的荧光素酶表达，最大抑制在0.1-1 μM（较高浓度效果较差）。它降低核Nrf2蛋白水平而不影响总Nrf2表达，降低蛋白酶体活性（基础降低39-57%；tBHQ诱导降低36-72%），并降低蛋白酶体基因表达（s5a和α5）。葫芦巴碱（0.1 μM）降低Panc1和Colo357细胞中的GCLC表达[3]。 凋亡增敏作用： 在Panc1和Colo357细胞中，葫芦巴碱（0.1 μM，预处理16小时）增强TRAIL和依托泊苷诱导的caspase 3/7活性（TRAIL增加2.8-4.3倍；依托泊苷增加2.3-3.1倍）和PARP1裂解。在MiaPaca2和H6c7细胞中，葫芦巴碱（0.1 μM）阻断tBHQ诱导的凋亡保护，恢复对TRAIL和依托泊苷的敏感性[3]。 Nrf2和蛋白酶体依赖性： siRNA敲低Nrf2或蛋白酶体基因（s5a、α5）可消除葫芦巴碱的增敏效应，证实其依赖Nrf2的机制[3]。 研究发现葫芦巴碱显着改善了 H9c2 细胞的形态。葫芦巴碱治疗可减少 H2O2 诱导的细胞死亡并提高细胞的抗氧化活性。此外，研究表明，葫芦巴碱在 H2O2 诱导的氧化过程中控制 H9c2 细胞中抗氧化基因 Bcl-2 和 Bcl-XL 以及氧化基因 caspase-3 和 caspase-9 的表达。流式细胞术研究证明，葫芦巴碱氯化物似乎还能极大地减少 H2O2 诱导的 H9c2 细胞连接和阳极 [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
心脏保护活性（未在完整动物模型中描述）： 该研究未包含体内心脏保护实验；仅进行了体外H9c2细胞研究[1]。
糖尿病大鼠骨骼效应： 葫芦巴碱（50 mg/kg口服，每日一次，共4周）在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠中恶化骨矿化（降低骨矿物质质量/骨质量比，增加骨水质量/骨质量比）并倾向于恶化松质骨力学性能。在烟酰胺/链脲佐菌素处理（非高血糖）的大鼠中，葫芦巴碱显著增加骨密度（胫骨和椎骨）并倾向于改善松质骨强度。未观察到对体重、血糖或血清骨转换标志物（骨钙素、RatLaps）的影响[2]。 异种移植模型中的化疗增敏： 在携带Colo357或Panc1胰腺肿瘤异种移植物的SCID-beige小鼠中，葫芦巴碱（1 mg/kg体重，腹腔注射，每日一次，连续4天，间隔3天后重复）联合依托泊苷（10 mg/kg）治疗，与依托泊苷单用或溶剂对照相比，显著减小肿瘤体积和重量（Colo357：391±155 mm³ vs 661±461 mm³；Panc1：113±45 mm³ vs 216±126 mm³）。免疫组化显示联合治疗组肿瘤中核磷酸化Nrf2水平降低[3]。 在链脲佐菌素诱发的糖尿病中，氯化三甲酚会降低骨矿化，并倾向于恶化骨机械特性。在烟酰胺/链脲佐菌素处理的材料中，葫芦巴碱显着增加骨矿物质密度 (BMD)，并倾向于增加松质。葫芦巴碱对链脲佐菌素产生的诱导有不同的影响。对诱导精神非高血压（烟酰胺/链脲佐菌素治疗）具有积极作用，并加强链脲佐菌素治疗的骨质疏松改变[2]。 |
| 酶活实验 |
蛋白酶体活性测定（荧光法）： 裂解细胞，与蛋白酶体底物Suc-LLVY-AMC在存在或不存在蛋白酶体抑制剂MG132的情况下孵育。测量荧光以确定蛋白酶体活性。活性以蛋白含量标准化。葫芦巴碱（0.1 μM）将基础蛋白酶体活性降低39-57%，将tBHQ诱导活性降低36-72%（依细胞系而异）[3]。
Caspase-3/7活性测定： 使用商业化试剂盒按说明书测定caspase-3/7活性以评估凋亡。活性以蛋白含量标准化。葫芦巴碱增强Panc1和Colo357细胞中TRAIL和依托泊苷诱导的caspase活化[3]。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定（EZ-CYTOX/WST法）： H9c2细胞（1×10⁵细胞/孔于96孔板）用不同浓度葫芦巴碱（25-150 μM，24小时）或H₂O₂（25-125 μM，6小时）处理。保护性研究中，细胞用葫芦巴碱（25-100 μM，48小时）预处理，然后暴露于H₂O₂（100 μM，4小时）。加入WST试剂，孵育2-4小时，在450 nm处测定吸光度[1]。
流式细胞术（Annexin V-FITC/PI染色）： 收集细胞，重悬于结合缓冲液，用FITC-annexin V和碘化丙啶染色，通过流式细胞术分析以量化坏死、早期凋亡和晚期凋亡。葫芦巴碱（25-100 μM）与H₂O₂单独处理相比显著减少H₂O₂诱导的坏死和凋亡[1]。 Caspase-3定量（分光光度法）： 细胞裂解液与DEVD-pNA底物在37°C孵育2小时，在400 nm处测定吸光度。葫芦巴碱降低H₂O₂诱导的caspase-3表达[1]。 抗氧化和脂质过氧化物测定： 使用商业化试剂盒按制造商方案测定SOD活性、过氧化氢酶活性、还原型谷胱甘肽含量和MDA水平。葫芦巴碱（75-100 μM）显著增加H₂O₂处理细胞中的SOD、过氧化氢酶和GSH水平，降低MDA含量[1]。 RT-PCR和qPCR： 提取总RNA，逆转录，对caspase-3、caspase-9、Bcl-2和Bcl-XL进行PCR。以β-actin为对照。葫芦巴碱在H₂O₂诱导的氧化应激期间上调Bcl-2和Bcl-XL，下调caspase-3和caspase-9表达[1]。 ARE-荧光素酶报告基因实验： 细胞转染ARE驱动的萤火虫荧光素酶载体和海肾荧光素酶对照。葫芦巴碱处理（0.01-10 μM，16小时）后，加或不加tBHQ（50 μM，8小时），测量荧光素酶活性。葫芦巴碱在所有四种细胞系中抑制ARE驱动的荧光素酶表达，最大效果在0.1-1 μM[3]。 Western blotting（核和胞质提取物）： 制备核和胞质提取物或总细胞裂解液，SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗Nrf2、Keap1、lamin A/C、Hsp90、微管蛋白、PARP1、s5a和α5的抗体检测。葫芦巴碱降低核Nrf2蛋白水平而不影响总Nrf2表达[3]。 siRNA敲低： 使用脂质转染试剂将细胞转染对照、Nrf2、Nrf1、s5a或α5 siRNA。48小时后，用葫芦巴碱和/或tBHQ处理细胞，然后评估凋亡。Nrf2或蛋白酶体基因敲低可消除葫芦巴碱的增敏效应[3]。 |
| 动物实验 |
大鼠模型（链脲佐菌素诱导糖尿病）： 三月龄雌性Wistar大鼠接受链脲佐菌素（60 mg/kg，溶于柠檬酸盐缓冲液，腹腔注射）或烟酰胺（230 mg/kg腹腔注射）15分钟后给予链脲佐菌素。两周后，通过胃管给予葫芦巴碱（50 mg/kg口服，每日一次）或溶剂（自来水，2 mL/kg），持续4周。每周通过尾尖测量非空腹血糖。实验结束时收集血清，分离股骨、胫骨和L-4椎骨，进行骨力学测试（三点弯曲、压缩试验）、DXA（BMD、BMC）和骨成分分析（矿物质、水、有机质含量）。部分大鼠在实验期间死亡；最终每组n=7-10[2]。
SCID-beige小鼠异种移植模型： 雌性SCID-beige小鼠（8周龄，约20 g）皮下接种2×10⁶ Colo357或Panc1细胞（200 μL生理盐水）。当肿瘤达到5×5 mm²时，将小鼠随机分为3组（n=6）：I组（0.9% NaCl）、II组（依托泊苷10 mg/kg腹腔注射）、III组（葫芦巴碱0.02 mg/kg + 依托泊苷0.2 mg/kg溶于0.9% NaCl）。治疗每日腹腔注射，连续4天，间隔3天后重复。每周测量肿瘤大小。处死后（第21天），切取肿瘤，称重，液氮速冻。使用抗磷酸化-Nrf2抗体对冷冻切片进行免疫组化染色，检测活化的核Nrf2。表达评分计算为强度×分布[3]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
葫芦巴碱的药代动力学已有报道：在大鼠中，葫芦巴碱的半衰期（t₁/₂）为215.9分钟。口服后吸收良好。大鼠研究中使用的葫芦巴碱剂量（50 mg/kg/天口服）对应于人体约5 mg/kg（70 kg人约350 mg），使用转换因子10（因大鼠代谢更快）。中度至重度咖啡饮用者可能暴露于类似的葫芦巴碱剂量，因为烘焙咖啡中葫芦巴碱的含量与咖啡因相当[2]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
葫芦巴碱浓度高达100 μM时对H9c2细胞无毒性作用；较高浓度（125-150 μM）诱导细胞死亡和细胞毒性[1]。在大鼠研究中，葫芦巴碱（50 mg/kg口服，4周）未引起显著的体重变化或明显毒性。然而，在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠中，葫芦巴碱恶化了骨矿化（降低骨矿物质质量/骨质量比，增加骨水质量/骨质量比）并倾向于恶化松质骨力学性能，提示在严重高血糖条件下可能对骨骼产生不良影响[2]。相反，在非高血糖（烟酰胺/链脲佐菌素处理）大鼠中，葫芦巴碱改善了骨密度。这些研究中未报告LD50、肝毒性或肾毒性数据[1][2][3]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
葫芦巴碱是一种天然存在的生物碱（吡啶衍生物），存在于葫芦巴、咖啡、洋葱、豌豆、大豆、甜瓜和玉米中。作为咖啡冲泡液的主要成分，它在阿拉比卡咖啡样品中的含量为2.8-9.6 mg/g（强烈烘焙的浓缩咖啡型咖啡中约5.3 mg/g）。葫芦巴碱不耐热，在烘焙过程中降解。咖啡摄入后易被吸收，并以N-甲基吡啶鎓和葫芦巴碱代谢物的形式经尿液排出[2]。
该化合物对Nrf2抑制表现出双相剂量依赖性，在亚微摩尔剂量（0.1-1 μM）下效率最高，较高剂量下效率较低。目前它被用作Nrf2研究的工具化合物（Nrf2抑制剂），并已被证明在高度耐药肿瘤（如胰腺癌）的联合治疗中具有潜力[3]。迄今为止未报告这种天然咖啡成分的不良反应，其在糖尿病和代谢综合征患者中的人体适用性已得到证实[3]。葫芦巴碱通过减少Nrf2的核输入来抑制Nrf2，这一过程与核输出和核内降解无关，如使用leptomycin-B（核输出抑制剂）和MG132（蛋白酶体抑制剂）的实验所示[3]。
盐酸葫芦巴碱是柠檬酰基。 |
| 分子式 |
C7H8CLNO2
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|---|---|
| 分子量 |
173.5969
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| 精确质量 |
173.024
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| 元素分析 |
C, 48.43; H, 4.65; Cl, 20.42; N, 8.07; O, 18.43
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| CAS号 |
6138-41-6
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| 相关CAS号 |
Trigonelline;535-83-1;Trigonelline-d3 chloride; 60388-20-7; 6138-41-6 (HCl)
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| PubChem CID |
134606
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 熔点 |
~260 °C (dec.)
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| tPSA |
44.01
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
11
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| 分子复杂度/Complexity |
136
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C[N+]1=CC=CC(=C1)C(=O)O.[Cl-]
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| InChi Key |
TZSYLWAXZMNUJB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H7NO2.ClH/c1-8-4-2-3-6(5-8)7(9)10;/h2-5H,1H3;1H
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| 化学名 |
1-methylpyridin-1-ium-3-carboxylic acid;chloride
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| 别名 |
Trigonelline hydrochloride; trigonelline HCl; 6138-41-6; 3-Carboxy-1-methylpyridinium chloride; Trigonelline, chloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~720.05 mM)
H2O : ~100 mg/mL (~576.04 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (576.04 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7604 mL | 28.8018 mL | 57.6037 mL | |
| 5 mM | 1.1521 mL | 5.7604 mL | 11.5207 mL | |
| 10 mM | 0.5760 mL | 2.8802 mL | 5.7604 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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