| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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Trigonelline targets multiple pathways. It inhibits nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2) activity, with maximal inhibition at 0.1-1 μM, reducing Nrf2 nuclear accumulation without affecting total Nrf2 protein expression [3]. It suppresses Nrf2-dependent proteasome activity and proteasomal gene expression (s5a/psmd4, s5/psma5) [3]. It also increases antioxidant enzyme activities (SOD, catalase) and reduces MDA levels in H9c2 cells [1]. In pancreatic cancer cells, trig reduces proteasome activity by 36-72% depending on cell line [3].
Trigonelline hydrochloride targets Nrf2 (nuclear factor E2-related factor 2) as a potent inhibitor. It also targets PPARgamma by inhibiting its expression. The compound acts as a ligand for toll-like receptors, triggering immune responses. It inhibits glucose-6-phosphatase production by adipocytes. Its diverse activities are mediated through multiple targets. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
心肌细胞保护（H9c2细胞）：葫芦巴碱（25-100 μM，预处理48小时）显著挽救了H₂O₂（100 μM，4小时）诱导的H9c2细胞氧化损伤，提高了细胞活力（从约50%提高到约80-90%），减少了坏死和凋亡（流式细胞术检测），降低了caspase-3的表达，并提高了Bcl-2和Bcl-XL的表达。此外，它还提高了SOD、过氧化氢酶和GSH的水平，同时降低了MDA的含量。更高浓度（125-150 μM）则诱导了细胞死亡。槲皮素 (100 μM) 用作阳性对照 [1]。
胰腺癌细胞中 Nrf2 的抑制：葫芦巴碱 (0.1-1 μM, 1-16 h) 呈剂量依赖性地抑制 Panc1、Colo357、MiaPaca2 和 H6c7 细胞中 ARE 驱动的荧光素酶表达，在 0.1-1 μM 时抑制效果最佳（更高剂量效果更差）。它降低了核内 Nrf2 蛋白水平，但不影响总 Nrf2 表达，降低了蛋白酶体活性（基础水平降低 39-57%；tBHQ 诱导水平降低 36-72%），并降低了蛋白酶体基因（s5a 和 α5）的表达。 Trig 处理 (0.1 μM) 降低了 Panc1 和 Colo357 细胞中 GCLC 的表达 [3]。 细胞凋亡增敏：在 Panc1 和 Colo357 细胞中，葫芦巴碱 (0.1 μM，预处理 16 小时) 增强了 TRAIL 和依托泊苷诱导的 caspase 3/7 活性（TRAIL 为 2.8-4.3 倍；依托泊苷为 2.3-3.1 倍）和 PARP1 裂解。在 MiaPaca2 和 H6c7 细胞中，trig（0.1 μM）阻断了 tBHQ 诱导的细胞凋亡保护作用，恢复了细胞对 TRAIL 和依托泊苷的敏感性 [3]。 Nrf2 和蛋白酶体依赖性：siRNA 敲低 Nrf2 或蛋白酶体基因（s5a、α5）可消除 trig 的增敏作用，证实了其 Nrf2 依赖性机制 [3]。 研究发现，葫芦巴碱显著改善了 H9c2 细胞的形态。葫芦巴碱处理可降低 H2O2 诱导的细胞死亡，并提高细胞的抗氧化活性。此外，研究表明，在 H2O2 诱导的氧化过程中，葫芦巴碱可调控 H9c2 细胞中抗氧化基因 Bcl-2 和 Bcl-XL 以及氧化基因 caspase-3 和 caspase-9 的表达。流式细胞术研究[1]表明，氯化葫芦巴碱似乎也能显著减少H2O2诱导的H9c2细胞连接和阳极形成。 体外实验表明，盐酸葫芦巴碱是一种强效的Nrf2抑制剂，它能阻断Nrf2依赖性蛋白酶体活性，在0.1-1 μM浓度下抑制效果最佳。它还能抑制PPARγ的表达。该化合物具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和神经保护活性，并能抑制血小板聚集。其对Nrf2和PPARγ的影响已在多种基于细胞的实验中得到证实。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
心脏保护活性（未在完整的动物模型中描述）：本研究未包含体内心脏保护实验；仅进行了体外H9c2细胞研究[1]。
糖尿病大鼠的骨骼效应：在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠中，葫芦巴碱（50 mg/kg，每日口服，持续4周）会加剧骨矿化（骨矿物质质量/骨质量比值降低，骨水质量/骨质量比值升高），并有恶化松质骨力学性能的趋势。在烟酰胺/链脲佐菌素治疗的（非高血糖）大鼠中，葫芦巴碱显著增加了骨矿物质密度（胫骨和椎骨），并有改善松质骨强度的趋势。未观察到对体重、血糖或血清骨转换标志物（骨钙素、RatLaps）的影响[2]。 异种移植模型中的化疗增敏：在携带Colo357或Panc1胰腺肿瘤异种移植瘤的SCID-beige小鼠中，与单独使用依托泊苷或载体对照组相比，葫芦巴碱（1 mg/kg体重，腹腔注射，每日一次，连续4天，间隔3天）联合依托泊苷（10 mg/kg）治疗显著降低了肿瘤的大小和重量（Colo357：391±155 mm³ vs 661±461 mm³；Panc1：113±45 mm³ vs 216±126 mm³）。免疫组织化学显示，联合治疗组肿瘤中核磷酸化Nrf2水平降低[3]。 在链脲佐菌素诱导的糖尿病模型中，氯化三甲硫啉会降低骨矿化，并倾向于恶化骨骼的力学特性。葫芦巴碱显著提高了骨密度（BMD），并倾向于增加烟酰胺/链脲佐菌素处理组的松质骨。葫芦巴碱对链脲佐菌素诱导的疾病具有不同的影响。它对精神性非高血压（烟酰胺/链脲佐菌素治疗）的诱导有积极作用，并能增强链脲佐菌素治疗引起的骨质疏松改变[2]。 体内研究表明，盐酸葫芦巴碱具有降血糖和降血脂作用。它能降低糖尿病大鼠模型的血糖水平。该化合物能改善糖尿病听神经病变，并具有神经保护作用。研究表明，它能抑制大鼠模型中的PPARγ表达。此外，还有报道称其具有抗肿瘤和抗偏头痛的活性。 |
| 酶活实验 |
蛋白酶体活性测定（荧光法）：裂解细胞后，在有或无蛋白酶体抑制剂MG132的情况下，与蛋白酶体底物Suc-LLVY-AMC（N-琥珀酰-L-亮氨酰-L-亮氨酰-L-缬氨酰-L-酪氨酰-7-氨基-4-甲基香豆素）孵育。通过测量荧光强度来确定蛋白酶体活性。活性值以蛋白质含量进行标准化。葫芦巴碱（0.1 μM）可使基础蛋白酶体活性降低39-57%，使tBHQ诱导的活性降低36-72%（跨细胞系）[3]。
Caspase-3/7活性测定：使用商业试剂盒，按照制造商说明测量caspase-3/7活性，以确定细胞凋亡。活性值以蛋白质含量进行标准化。 Trig增强了Panc1和Colo357细胞中TRAIL和依托泊苷诱导的caspase活化[3]。 盐酸葫芦巴碱的体外酶活性测定包括测量Nrf2抑制作用。Nrf2活性通过测量Nrf2依赖性基因表达或蛋白酶体活性来评估。PPARγ表达通过Western blot或qPCR进行测定。葡萄糖-6-磷酸酶活性通过测量葡萄糖生成量来评估。抗菌和抗病毒研究则进行MIC和抗病毒活性测定。 |
| 细胞实验 |
细胞活力（EZ-CYTOX/WST 检测）：将 H9c2 细胞（96 孔板，每孔 1×10⁵ 个细胞）用不同浓度的葫芦巴碱（25-150 μM，24 小时）或 H₂O₂（25-125 μM，6 小时）处理。在保护性研究中，细胞先用葫芦巴碱（25-100 μM，48 小时）预处理，然后用 H₂O₂（100 μM，4 小时）处理。加入 WST 试剂，孵育 2-4 小时，并在 450 nm 处测量吸光度 [1]。
流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 染色）：收集细胞，重悬于结合缓冲液中，用 FITC-Annexin V 和碘化丙啶染色，并通过流式细胞术分析，以定量坏死、早期凋亡和晚期凋亡。与单独使用H₂O₂相比，Trig（25-100 μM）显著降低了H₂O₂诱导的坏死和凋亡[1]。 Caspase-3定量（分光光度法）：将细胞裂解液与DEVD-pNA底物在37°C下孵育2小时，并在400 nm处测量吸光度。Trig降低了H₂O₂诱导的caspase-3表达[1]。 抗氧化剂和脂质过氧化物测定：使用商业试剂盒，按照制造商的说明，测定SOD活性、过氧化氢酶活性、还原型谷胱甘肽含量和MDA水平。 Trig（75-100 μM）显著提高了H₂O₂处理细胞中SOD、过氧化氢酶和GSH的水平，并降低了MDA的含量[1]。 RT-PCR和qPCR：提取总RNA，进行逆转录，并进行PCR检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2和Bcl-XL的表达。β-肌动蛋白用作内参。在H₂O₂诱导的氧化应激过程中，Trig上调Bcl-2和Bcl-XL的表达，并下调caspase-3和caspase-9的表达[1]。 ARE-荧光素酶报告基因检测：将细胞转染ARE驱动的萤火虫荧光素酶载体和海肾荧光素酶对照。在有或无tBHQ（50 μM，8 h）的情况下，用Trig（0.01-10 μM，16 h）处理细胞后，检测荧光素酶活性。 Trig抑制了所有四种细胞系中ARE驱动的荧光素酶表达，在0.1-1 μM浓度下抑制效果最佳[3]。 蛋白质印迹（核提取物和胞质提取物）：制备核提取物、胞质提取物或总细胞裂解液，经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，并用针对Nrf2、Keap1、lamin A/C、Hsp90、微管蛋白、PARP1、s5a和α5的抗体进行检测。Trig降低了核内Nrf2蛋白水平，但不影响总Nrf2表达[3]。 siRNA敲低：使用脂质体转染试剂将对照siRNA、Nrf2 siRNA、Nrf1 siRNA、s5a siRNA或α5 siRNA转染至细胞中。48小时后，用Trig和/或tBHQ处理细胞，然后评估细胞凋亡情况。 Nrf2 或蛋白酶体基因敲低消除了葫芦巴碱的增敏作用[3]。 在胰腺癌细胞和其他细胞系中进行了基于细胞的体外试验，以评估葫芦巴碱盐酸盐的作用。将细胞在含有 5% CO2 的 37°C 培养箱中于适宜培养基中培养，并用不同浓度的化合物处理。通过检测 Nrf2 靶基因的表达来评估 Nrf2 抑制情况。通过 Annexin V/PI 染色评估细胞凋亡。通过标准方法评估细胞活力。所有实验均重复三次，并设置适当的阳性和阴性对照。 |
| 动物实验 |
大鼠模型（链脲佐菌素诱导糖尿病）：3月龄雌性Wistar大鼠分别接受链脲佐菌素（60 mg/kg，腹腔注射，溶于柠檬酸缓冲液）或烟酰胺（230 mg/kg，腹腔注射），烟酰胺在链脲佐菌素注射前15分钟给药。两周后，通过胃管灌注葫芦巴碱（50 mg/kg，每日一次）或溶剂（自来水，2 mL/kg），持续4周。每周通过尾尖法测量非空腹血糖。实验结束时，收集血清，并分离股骨、胫骨和L4椎骨，用于骨骼力学测试（三点弯曲试验、压缩试验）、双能X线吸收法（DXA，测定骨密度、骨矿物质含量）和骨骼成分分析（矿物质、水分、有机物含量）。部分大鼠在实验过程中死亡；最终每组 n=7-10 [2].
SCID-beige 小鼠异种移植模型：将 2×10⁶ 个 Colo357 或 Panc1 细胞悬浮于 200 μL 生理盐水中，皮下接种于 8 周龄雌性 SCID-beige 小鼠（约 20 g）。当肿瘤大小达到 5×5 mm² 时，将小鼠随机分为 3 组（n=6）：I 组（0.9% NaCl 溶液），II 组（腹腔注射依托泊苷 10 mg/kg），III 组（0.9% NaCl 溶液中同时注射葫芦巴碱 0.02 mg/kg 和依托泊苷 0.2 mg/kg）。每日腹腔注射给药，连续 4 天，停药 3 天后重复给药。每周测量肿瘤大小。第 21 天（划痕处死后），切除肿瘤，称重，并速冻保存。采用抗磷酸化Nrf2（Ser40）抗体对冰冻切片进行免疫组织化学染色，以检测活化的核Nrf2。表达评分计算为强度×分布[3]。 盐酸葫芦巴碱的体内研究在糖尿病、癌症和神经系统疾病的动物模型中进行。动物通过口服或注射给药。测量血糖和血脂水平。神经保护研究采用神经病变动物模型。抗肿瘤研究采用荷瘤小鼠。监测动物的临床症状。采集组织和血液样本进行组织病理学和生物标志物分析。所有研究均按照机构动物护理指南进行。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
先前已有关于葫芦巴碱药代动力学的报道：在大鼠体内，葫芦巴碱的半衰期 (t₁/₂) 为 215.9 分钟。口服后吸收良好。由于大鼠代谢速度较快，大鼠研究中使用的葫芦巴碱剂量（每日口服 50 mg/kg）相当于人类的约 5 mg/kg（350 mg/70 kg）。由于烘焙咖啡中葫芦巴碱的含量与咖啡因相当 [2]，中度至重度咖啡饮用者可能接触到类似的葫芦巴碱剂量。
盐酸葫芦巴碱（分子量 173.60 g/mol，C7H7NO2·HCl）是一种具有多种药理活性的生物碱。它可溶于水和其他合适的溶剂。在推荐的储存条件下，它稳定。盐酸葫芦巴碱是一种强效的 Nrf2 抑制剂和 PPARγ 调节剂。半衰期、生物利用度、组织分布等药代动力学参数将在物种特异性研究中确定。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
浓度高达 100 μM 的葫芦巴碱对 H9c2 细胞无毒性作用；较高浓度（125-150 μM）则可诱导细胞死亡和细胞毒性 [1]。在大鼠研究中，口服葫芦巴碱（50 mg/kg，持续 4 周）未引起体重或总体毒性的显著变化。然而，在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠中，葫芦巴碱会加剧骨矿化（骨矿物质含量/骨量比值降低，骨水含量/骨量比值升高），并有恶化松质骨力学性能的趋势，表明在严重高血糖状态下可能对骨骼产生不良影响 [2]。相反，在非高血糖（烟酰胺/链脲佐菌素治疗）大鼠中，葫芦巴碱可提高骨矿物质密度。这些研究[1][2][3]中未报告LD50、肝毒性或肾毒性数据。
盐酸葫芦巴碱在临床前研究中通常耐受性良好。该化合物是一种具有多种药理活性的生物碱。现有文献中未报告在研究用浓度下有显著不良反应。该化合物仅供研究使用。操作时应遵循标准安全预防措施。治疗开发需要进行全面的毒理学评估。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
葫芦巴碱是一种天然存在的生物碱（吡啶衍生物），存在于胡芦巴、咖啡、洋葱、豌豆、大豆、哈密瓜和玉米中。作为咖啡的主要成分，它在烘焙咖啡中的含量在阿拉比卡咖啡豆中为2.8-9.6 mg/g（在深度烘焙的意式浓缩咖啡中约为5.3 mg/g）。葫芦巴碱不耐热，在烘焙过程中会降解。它易于在饮用咖啡后被吸收，并以N-甲基吡啶和葫芦巴碱代谢物的形式从尿液中排出[2]。
该化合物对Nrf2的抑制作用表现出双相剂量依赖性，在亚微摩尔剂量（0.1-1 μM）下抑制效果最佳，在高剂量下抑制效果较差。目前，它被用作Nrf2研究的工具化合物，作为一种Nrf2抑制剂，并已被证明在治疗高度耐药性肿瘤（例如胰腺癌）的联合疗法中具有潜力[3]。迄今为止，尚未报道这种天然咖啡成分的任何不良反应，并且已证实其适用于糖尿病和代谢综合征患者[3]。葫芦巴碱通过减少Nrf2的核输入发挥Nrf2抑制剂的作用，其作用独立于核输出（crm1途径）和核内降解（蛋白酶体途径），这已通过与leptomycin-B（核输出抑制剂）和MG132（蛋白酶体抑制剂）的实验得到证实[3]。 盐酸葫芦巴碱是柠檬酸盐类化合物。 盐酸葫芦巴碱是一种生物碱，具有降血糖、降血脂、神经保护、抗偏头痛、镇静、改善记忆、抗菌、抗病毒和抗肿瘤活性。它是一种强效的Nrf2抑制剂，可阻断Nrf2依赖的蛋白酶体活性。该化合物抑制PPARγ表达和葡萄糖-6-磷酸酶的产生。其分子式为C7H7NO2·HCl，分子量为173.60 g/mol。所有应用仅限于非人体研究用途。 |
| 分子式 |
C7H8CLNO2
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|---|---|
| 分子量 |
173.5969
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| 精确质量 |
173.024
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| 元素分析 |
C, 48.43; H, 4.65; Cl, 20.42; N, 8.07; O, 18.43
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| CAS号 |
6138-41-6
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| 相关CAS号 |
Trigonelline;535-83-1;Trigonelline-d3 chloride; 60388-20-7; 6138-41-6 (HCl)
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| PubChem CID |
134606
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 熔点 |
~260 °C (dec.)
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| tPSA |
44.01
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
11
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| 分子复杂度/Complexity |
136
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C[N+]1=CC=CC(=C1)C(=O)O.[Cl-]
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| InChi Key |
TZSYLWAXZMNUJB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H7NO2.ClH/c1-8-4-2-3-6(5-8)7(9)10;/h2-5H,1H3;1H
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| 化学名 |
1-methylpyridin-1-ium-3-carboxylic acid;chloride
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| 别名 |
Trigonelline hydrochloride; trigonelline HCl; 6138-41-6; 3-Carboxy-1-methylpyridinium chloride; Trigonelline, chloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~720.05 mM)
H2O : ~100 mg/mL (~576.04 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (11.98 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (576.04 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.7604 mL | 28.8018 mL | 57.6037 mL | |
| 5 mM | 1.1521 mL | 5.7604 mL | 11.5207 mL | |
| 10 mM | 0.5760 mL | 2.8802 mL | 5.7604 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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