EGFR 10.8 nM (IC50) ErbB2 9.2 nM (IC50)

在 BT474 和 HN5 细胞中，拉帕替尼（GW2016；0.03-10 µM；6 小时）疗法以剂量依赖性方式抑制 EGFR 和 ErbB-2 受体自身磷酸化。 GW2016 以剂量依赖性方式抑制 AKT 的丝氨酸 473 磷酸化 [1]。给予拉帕替尼（GW2016；72小时；HN5、A-43、BT474、N87和CaLu-3细胞）选择性抑制人类肿瘤细胞系的生长[1]。 G1 期停滞由拉帕替尼（GW2016；1-10 µM；72 小时；HN5 细胞）治疗诱导[1]。

拉帕替尼治疗（GW2016；30-100 mg/kg；口服；每天两次；持续21天；CD-1雌性裸鼠）在30和100 mg/kg剂量下显着减少HN5肿瘤异种移植物的生长，完全抑制较高剂量下肿瘤生长[1]。 每日两次口服拉帕替尼（~100 mg/kg）可显着抑制 BT474 和 HN5 异种移植物的生长，且呈剂量依赖性。

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拉帕替尼联合放射治疗可抑制小鼠MBT-2异种移植瘤的生长[2]
在移植肿瘤的小鼠中，连续7天每日剂量的拉帕替尼（200 mg/kg/天）与第4天的放疗联合抑制肿瘤生长的程度比单独放疗更大。 在该动物模型中，拉帕替尼治疗异种移植物肿瘤的结果显示，与单独照射相比，拉帕替尼每日剂量（口服，200 mg/kg/天）连续7天，第4天联合放疗可显著抑制异种移植物肿瘤的生长（图6A）。然而，单独口服拉帕替尼治疗效果极小。结果表明，口服拉帕替尼可使放射介导的对异种移植肿瘤的抑制增加约60%。7天治疗方案结束后，免疫组化检测小鼠肿瘤中HER-2和EGFR的表达结果显示，放疗参与了EGFR和HER-2水平的提高（图6B）。然而，拉帕替尼联合放射治疗抑制了外种移植物肿瘤中放射介导的EGFR和HER-2的激活。该体内实验结果表明，拉帕替尼除了促进DNA损伤外，还通过抑制辐射介导的EGFR和HER-2的表达来诱导放射致敏。［2］

测量肽底物磷酸化抑制的过程产生酶活性抑制的 IC50 值。使用杆状病毒表达系统分离 EGFR 和 ErbB2 胞内激酶结构域。在圆底聚苯乙烯 96 孔板中，以 45 μL 的终体积进行 EGFR 和 ErbB2 反应。反应混合物由以下成分组成：50 μM 肽 A [生物素-（氨基己酸）-EEEEYFELVAKKK-CONH2]、1 mM 二硫苏糖醇、2 mM MnCl2、10 μM ATP、1 μCi [γ33P] ATP/反应，以及 1 μL DMSO，其中含有从 10 μM 开始的拉帕替尼系列稀释液。添加指定的纯化 1 型受体胞内结构域以开始反应。每个反应使用 1 pmol 添加的酶 (20 nM)。 23°C 10 分钟后，加入 45 μL 0.5% 磷酸水溶液以终止反应。将 75 μL 成品反应混合物置于磷酸纤维素滤板上。将板进行三轮过滤并用 200 μL 0.5% 磷酸洗涤。每个孔接收 50 μL 闪烁混合物，并使用 Packard Topcount 进行测定。 10 点剂量反应曲线用于计算 IC50 值。

蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： BT474 和 HN5 细胞
测试浓度： 0.03 µM、0.1 µM、0.3 µM、1 µM、3 µM ，或 10 µM
孵育时间：6 小时
实验结果：以剂量响应方式抑制 EGFR 和 ErbB-2 的受体自身磷酸化。 AKT 丝氨酸 473 的磷酸化也以剂量依赖性方式受到抑制。细胞增殖测定[1]
细胞类型： HN5、A-43、BT474、N87 和 CaLu-3 细胞
测试浓度：
孵育时间：72小时
实验结果：抑制过度表达EGFR或ErbB-2的肿瘤细胞的生长。

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细胞周期分析[1]
细胞类型： HN5 细胞
测试浓度： 1 µM 或 10 µM
孵育持续时间：72 小时
实验结果：导致 G1 停滞的诱导。

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将细胞暴露于不同浓度的lapatinib /拉帕替尼 72 小时。亚甲基蓝染色用于估计细胞的相对数量。使用 Spectra 酶标仪测量 620 nm 处的吸光度。碘化丙啶染色、掺入的 BrdUrd 的抗体检测和碘化丙啶染色用于分析细胞死亡和细胞周期。

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克隆生成试验（菌落形成试验）[2]
为了测试lapatinib /拉帕替尼和辐照对集落形成的影响，细胞接种于六孔板，细胞密度为1×105 cells/well。细胞暴露于不同剂量的辐射下，但用拉帕替尼（200-1,000 nM）预处理30 min，对照细胞用二甲基亚砜（DMSO）处理。经拉帕替尼预处理和辐照后，细胞再培养一周。使用光学显微镜（×100放大）进行细胞菌落计数，菌落定义为50个或更多细胞的一组。

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细胞周期分析[2]
流式细胞术分析细胞周期分布。分析细胞DNA的碘化丙啶（PI）染色。在该方案中，106个细胞/ml暴露于拉帕替尼和如上所述的辐照下，离心后收集。用PI （15 μg/ml）、5 μg/ml无dna核糖核酸酶（DNase-free RNase）和Tween-20（0.5%）在PBS中染色。使用tune™NxT声学聚焦细胞仪对样品进行分析。

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免疫荧光显微镜研究[2]
将MBT-2细胞转移到预先涂有聚赖氨酸的盖子上12小时，使细胞附着在表面。细胞单独暴露于2.5 Gy的辐射剂量，或与100 nM的lapatinib 联合暴露。细胞孵育45分钟，用冷冻PBS洗涤3次，然后用4%的甲醛PBS溶液固定30分钟，然后用0.5% Triton X-100/PBS孵育60分钟，5%牛血清白蛋白（BSA）孵育60分钟，最后用异硫氰酸荧光素（FITC）偶联抗磷酸化组蛋白γ-H2AX抗体（1:15 00）孵育2小时。用PBS洗涤细胞，并在含有二氨基-2-苯基吲哚的Vectashield上载。采用蔡司LSM - 8型高倍显微镜对γ-H2AX核进行观察，平均至少有120个核被计数。γ-H2AX焦点/核的平均值表示DNA双链断裂的数量。

动物/疾病模型： CD-1裸鼠（雌性，4-6周龄），接种HN5细胞[1]
剂量： 30 mg/kg，100 mg/kg
给药途径： 口服；每日两次；持续21天
实验结果： 以剂量依赖的方式抑制HN5细胞异种移植瘤的生长。

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将MBT-2细胞悬液（100 μl）（1×10⁷个细胞/100 μl）皮下注射到C3H/HEN小鼠右侧腹部，注射时间为第1天。一周后，使用游标卡尺测量肿瘤大小并计算体积。平均体积达到162 mm³被视为肿瘤建立的标准。肿瘤成功建立后，将小鼠分为四组：第1组为对照组（用0.5%甲基纤维素和0.1%吐温-80处理的载体）；第2组为拉帕替尼治疗组（200 mg/kg/天）；第3组为载体组，并在第4天进行15 Gy的照射；第4组为拉帕替尼治疗组（200 mg/kg/天），并在第4天进行15 Gy的照射。每周记录所有小鼠的体重。通过尾静脉注射14 MBq（378 Ci）的氟代脱氧葡萄糖（FDG）生理盐水，进行正电子发射断层扫描（PET）和计算机断层扫描（CT）（PET/CT）。[2]

吸收、分布和排泄
口服拉帕替尼后的吸收不完全且个体差异较大。
拉帕替尼主要通过CYP3A4和CYP3A5代谢，CYP2C19和CYP2C8也少量参与代谢，生成多种氧化代谢物，但这些代谢物在粪便中的含量均不超过药物剂量的14%，在血浆中拉帕替尼浓度的10%。
小鼠、大鼠和犬单次口服(14)C-拉帕替尼后，药物相关物质的主要排泄途径是粪便，尿液排泄量极少。大部分剂量在给药后 48 小时内被清除。
拉帕替尼主要通过 CYP3A4/5 代谢清除，肾脏排泄量可忽略不计（<2%）。口服剂量后，粪便中回收的原药拉帕替尼中位数为 27%（范围 3% 至 67%）。
与食物同服会增加拉帕替尼的全身暴露量。与低脂餐（5% 脂肪，500 卡路里）同服时，拉帕替尼的 AUC 值分别升高约 3 倍和 4 倍（Cmax 分别升高约 2.5 倍和 3 倍）；与高脂餐（50% 脂肪，1000 卡路里）同服时，拉帕替尼的 AUC 值升高约 2.5 倍和 3 倍。
拉帕替尼与白蛋白和 α1-酸性糖蛋白的结合率很高（>99%）。体外研究表明，拉帕替尼是乳腺癌耐药蛋白（BCRP，ABCG2）和 P-糖蛋白（P-gp，ABCB1）转运体的底物。体外研究表明，拉帕替尼在临床相关浓度下可抑制 P-gp、BCRP 和肝脏摄取转运蛋白 OATP 1B1。
有关拉帕替尼（共 7 项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物
拉帕替尼主要通过 CYP3A4 和 CYP3A5 代谢，CYP2C19 和 CYP2C8 也少量参与代谢，生成多种氧化代谢物，其中任何一种代谢物在粪便中的回收剂量均不超过 14%，在血浆中的浓度均不超过 10%。
拉帕替尼是一种口服乳腺癌药物，最近有报道称其是一种基于机制的细胞色素 P450 (P450) 3A4 失活剂，并且是一种特异性抑制剂。肝毒性。有研究表明，活性醌亚胺代谢物的形成与基于机制的失活（MBI）和/或肝毒性有关。我们研究了拉帕替尼对P450 3A4的MBI机制。液相色谱-质谱分析显示，拉帕替尼孵育后的P450 3A4未出现任何对应于不可逆修饰的峰。加入铁氰化钾后，拉帕替尼失活的酶活性完全恢复。这些结果表明，拉帕替尼的MBI机制是准不可逆的，并通过代谢中间体复合物（MI复合物）的形成介导。这一发现通过约455 nm处特征性Soret吸收的增加得到证实。对拉帕替尼经P450 3A4代谢产生的两种胺氧化产物进行了表征：N-羟基拉帕替尼（M3）和N-去烷基化拉帕替尼的肟形式（M2），提示由M3生成的亚硝基或其他相关中间体参与了MI复合物的形成。相比之下，P450 3A5对拉帕替尼通过MI复合物形成途径的MBI敏感性远低于P450 3A4。此外，P450 3A5生成M3的能力也显著低于3A4，这与N-羟基化是MI复合物形成途径的初始步骤相一致。总之，我们的研究结果表明，拉帕替尼对P450 3A4的MBI作用的主要机制并非醌亚胺代谢物的不可逆修饰，而是通过拉帕替尼仲胺基团的氧化介导的准不可逆MI复合物形成。
拉帕替尼在人体内广泛代谢，生成多种氧化产物以及N-和O-去烷基化产物。体外人肝细胞和微粒体研究表明，拉帕替尼主要由CYP3A4和CYP3A5代谢，CYP2C8的贡献较小。其他研究表明，CYP1A2、2D6、2C9和2C19也可能参与代谢，但程度较轻。最主要的代谢产物是羧酸GW42393和O-去烷基化苯酚GW690006。仲脂肪胺的N-氧化产生了一系列约8种次要代谢物。与母体药物相比，GW690006在体外对ErbB1依赖性肿瘤细胞生长的抑制作用大致相当，但在ErbB2依赖性肿瘤细胞中的抑制作用则降低了约100倍。GW342393在ErbB1和ErbB2依赖性肿瘤细胞中的抑制作用均比母体药物降低了约40倍。它们不太可能对拉帕替尼的生物活性产生贡献。拉帕替尼是一种用于治疗乳腺癌的口服酪氨酸激酶抑制剂，据报道可引起特异性肝毒性。最近发现，拉帕替尼通过形成烷基亚硝基中间体与CYP3A4形成代谢物-抑制剂复合物（MIC）。由于 CYP3A5 与 CYP3A4 相比具有高度多态性，且能氧化拉帕替尼，我们研究了拉帕替尼与 CYP3A5 的相互作用。以睾酮为探针底物，拉帕替尼以时间、浓度和 NADPH 依赖的方式灭活 CYP3A5，其 K_I 和 k_inact 值分别为 0.0376 mM 和 0.0226 min^-1。然而，当使用咪达唑仑作为探针底物时，并未获得类似的结果，表明拉帕替尼对 CYP3A5 的灭活具有位点特异性。透析后 CYP3A5 活性恢复不良以及未出现 Soret 峰，证实拉帕替尼不与 CYP3A5 形成最小抑菌浓度 (MIC)。降低的CO差示光谱进一步表明，拉帕替尼的大部分活性代谢物与CYP3A5的载脂蛋白共价结合。利用GSH捕获CYP3A5生成的拉帕替尼活性代谢物，证实了源自拉帕替尼O-去烷基化代谢物的醌亚胺-GSH加合物的形成。计算机模拟对接研究支持CYP3A5优先生成拉帕替尼的O-去烷基化代谢物，而非主要由CYP3A4催化的N-羟基化反应。总之，拉帕替尼似乎是一种通过与醌亚胺代谢物加合而抑制CYP3A5的机制性抑制剂。
在单次口服(14)C-拉帕替尼后，对大鼠（10 mg/kg）、犬（10 mg/kg）、小鼠（30 mg/kg）和人（250 mg）的血浆和排泄物中的拉帕替尼代谢情况进行了定量和定性评估。总体而言，(14)C-拉帕替尼主要经代谢，分泌到胆汁中，并最终通过粪便排出。在非临床和临床代谢研究中，由于经尿液排泄的剂量比例较低，因此未分析尿液样本。在血浆中，(14)C-拉帕替尼是所有物种中含量最高的单一成分。雄性大鼠的拉帕替尼代谢程度高于雌性大鼠，但代谢谱相似。在犬和人体内，14C-拉帕替尼是唯一可定量检测到的峰。在人体内，拉帕替尼仅占血浆放射性的约一半。剩余的放射性归因于至少8种经液相色谱-质谱联用（LC-MS）检测到的代谢物，但这些代谢物的含量低于放射化学定量限（约占混合血浆总放射性的5%）。这些代谢物归因于N-氧化级联反应，该反应在体外以及大鼠和小鼠体内均有观察到。在小鼠和大鼠体内，仅有少数几种代谢物可通过放射化学检测在血浆中定量，但所有代谢物均已通过质谱分析进行表征。因此，在人体内未观察到独特的循环代谢物。

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生物半衰期
单次给药末端半衰期：14.2 小时；有效多次给药半衰期：24 小时
在临床剂量下，单次给药后的末端半衰期为 14.2 小时；重复给药后的药物蓄积表明有效半衰期为 24 小时。
在一项质量平衡研究中，向 6 名健康志愿者单次给予 250 mg (14)C 标记的拉帕替尼，结果显示，代表母体药物及其代谢物的放射性标记物质的血清浓度在给药后 4 小时达到峰值，并以 6 小时的中位半衰期下降。拉帕替尼的血浆浓度以 14 小时的半衰期下降。

毒性概述
识别和用途：拉帕替尼是一种黄色固体，制成薄膜衣片剂。拉帕替尼是一种抗肿瘤药物，可抑制人表皮生长因子受体2型（HER2/ERBB2）和表皮生长因子受体（HER1/EGFR/ERBB1）酪氨酸激酶。它与卡培他滨联合用于治疗HER2过表达且既往接受过蒽环类药物、紫杉烷类药物和曲妥珠单抗等治疗的晚期或转移性乳腺癌患者。它还与来曲唑联合用于治疗激素受体阳性、HER2过表达且需要激素治疗的绝经后转移性乳腺癌女性患者。人体暴露和毒性：已有无症状和有症状的过量用药病例报告。每日剂量范围为 2,500 至 9,000 毫克，疗程为 1 至 17 天不等。观察到的症状包括拉帕替尼相关事件，部分病例还出现头皮疼痛、窦性心动过速（心电图正常）和/或黏膜炎症。在拉帕替尼的临床试验和上市后经验中，已观察到治疗剂量下出现肝毒性，表现为血清转氨酶和胆红素浓度升高。肝毒性可能很严重，并有死亡病例报告。死亡原因尚不明确。肝毒性可能在开始治疗后数天至数月内发生。孕妇应避免使用拉帕替尼。虽然目前尚无针对孕妇的充分且对照良好的研究，但拉帕替尼在动物实验中与不良生殖作用相关。如果在妊娠期间使用，应告知患者潜在的胎儿风险。动物研究：一项为期两年的小鼠研究未发现致癌性证据，但在剂量为150和300 mg/kg/天的雄性小鼠以及剂量为300 mg/kg/天的雌性小鼠中观察到与皮肤毒性相关的死亡率增加。一项为期两年的大鼠致癌性研究发现，剂量为500 mg/kg/天的雄性大鼠以及剂量为300 mg/kg/天的雌性大鼠的死亡率增加，且与皮肤毒性相关。剂量分别为60 mg/kg/天和180 mg/kg/天的雌性大鼠分别出现肾梗死和肾乳头坏死。剂量分别为120 mg/kg/天的雄性大鼠和180 mg/kg/天的雌性大鼠肠系膜淋巴结良性血管瘤的发生率增加，但仍在背景范围内。这些发现对人类的临床意义尚不明确。拉帕替尼在雌性大鼠剂量高达 120 mg/kg/天、雄性大鼠剂量高达 180 mg/kg/天时，均未影响雄性或雌性大鼠的性腺功能、交配或生育能力。对妊娠大鼠和兔的研究表明，拉帕替尼无致畸作用。然而，在大鼠中，当剂量达到母体毒性剂量 120 mg/kg/天时，出现了一些轻微的畸形（左侧脐动脉、颈肋和早熟骨化）。在兔中，拉帕替尼在 60 和 120 mg/kg/天的剂量下均与母体毒性相关，并在 120 mg/kg/天的剂量下导致流产。在母体毒性剂量下，观察到胎儿体重下降、活胎数量减少和轻微的骨骼畸形。拉帕替尼在一系列检测中均未显示出致染色体断裂或致突变性，这些检测包括中国仓鼠染色体畸变试验、Ames试验、人淋巴细胞染色体畸变试验和体内大鼠骨髓染色体畸变试验。

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肝毒性
拉帕替尼治疗期间，血清转氨酶水平升高较为常见，高达一半的患者会出现这种情况。2%至6%的患者会出现转氨酶值超过正常值上限（ULN）5倍的情况，但通常是短暂的且无症状。很少需要因肝功能异常而调整剂量或暂时停药。
自拉帕替尼投入临床应用以来，已有数例临床表现明显的急性肝损伤病例与拉帕替尼相关。肝损伤的临床特征尚未明确，但通常在开始服用拉帕替尼后1至3个月内出现，血清酶升高模式通常为肝细胞型或混合型（病例1）。美国食品药品监督管理局（FDA）已收到足够多的肝损伤报告，因此拉帕替尼被列为具有可能致命的肝毒性的药物。严重肝损伤的发生率估计为0.2%，但可能更高。免疫过敏和自身免疫特征并不常见，但基因研究表明拉帕替尼肝毒性与特定的HLA等位基因相关。大多数病例具有自限性，但已有数例使用酪氨酸激酶受体抑制剂（包括伊马替尼、舒尼替尼、拉帕替尼、吉非替尼和厄洛替尼）后发生急性肝衰竭的病例报告。再次接触该药物后，损伤复发较为常见，但换用其他激酶受体抑制剂后可能不会复发。
可能性评分：B（可能导致临床上明显的急性肝损伤）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无拉帕替尼在哺乳期临床应用的信息。由于拉帕替尼与血浆蛋白的结合率超过99%，因此其在乳汁中的含量可能很低。然而，其半衰期约为24小时，可能会在婴儿体内蓄积。此外，拉帕替尼还与卡培他滨联合使用，这可能会增加婴儿的风险。制造商建议在拉帕替尼治疗期间以及末次给药后1周内停止母乳喂养。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白结合
与白蛋白和α-1酸性糖蛋白高度结合（>99%）

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相互作用
应避免食用葡萄柚制品，因为可能导致血浆拉帕替尼浓度升高。
在同时接受拉帕替尼和紫杉醇（CYP2C8和P-gp底物）治疗的患者中，紫杉醇的全身暴露量（24小时AUC）增加了23%。然而，制造商指出，由于研究设计的局限性，这些数据可能低估了联合用药期间紫杉醇暴露量的潜在增加。
拉帕替尼与口服地高辛（一种P-gp底物）联合用药可使地高辛的全身暴露量（AUC）增加约2.8倍。对于正在服用地高辛的患者，应在开始拉帕替尼治疗前测量血清地高辛浓度，并在整个联合治疗期间进行监测。如果血清地高辛浓度超过1.2 ng/mL，则应将地高辛剂量减少50%。
由于拉帕替尼可能导致QT间期延长，因此对于正在接受其他已知可延长QT间期的药物（例如，抗心律失常药物）联合治疗的患者，应谨慎使用拉帕替尼。
有关拉帕替尼的更多药物相互作用（完整）数据（共10项），请访问HSDB记录页面。

[1]. The effects of the novel, reversible epidermal growth factor receptor/ErbB-2 tyrosine kinase inhibitor, GW2016, on the growth of human normal and tumor-derived cell lines in vitro and in vivo. Mol Cancer Ther. 2001 Dec;1(2):85-94.

[2]. Lapatinib, a Dual Inhibitor of Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) and HER-2, Enhances Radiosensitivity in Mouse Bladder Tumor Line-2 (MBT-2) Cells In Vitro and In Vivo. Med Sci Monit. 2018 Aug 20;24:5811–5819.

拉帕替尼二甲苯磺酸盐一水合物属于喹唑啉类化合物。
拉帕替尼二甲苯磺酸盐是拉帕替尼的二甲苯磺酸盐，拉帕替尼是一种合成的、口服有效的喹唑啉类化合物，具有潜在的抗肿瘤活性。拉帕替尼可逆性地阻断表皮生长因子受体 (EGFR)、ErbB2 以及 Erk-1 和 Erk-2 和 AKT 激酶的磷酸化；它还能抑制人肿瘤细胞系和异种移植瘤中细胞周期蛋白 D 的水平。EGFR 和 ErbB2 与多种肿瘤的生长有关。
一种喹唑啉衍生物，可抑制表皮生长因子受体和 HER2（受体，ERBB-2）酪氨酸激酶。它用于治疗HER2过度表达的晚期或转移性乳腺癌。

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药物适应症
Tyverb适用于治疗HER2（ErbB2）过度表达的乳腺癌患者：与卡培他滨联合用于既往接受过蒽环类药物、紫杉类药物以及转移性疾病患者曲妥珠单抗治疗后病情进展的晚期或转移性疾病患者；与曲妥珠单抗联合用于既往接受过曲妥珠单抗治疗或联合化疗后病情进展的激素受体阴性转移性疾病患者；与芳香化酶抑制剂联合用于目前不接受化疗的激素受体阳性转移性疾病绝经后女性患者。注册研究中的患者此前未接受过曲妥珠单抗或芳香化酶抑制剂治疗。目前尚无关于该联合疗法相对于曲妥珠单抗联合芳香化酶抑制剂在该患者群体中疗效的数据。

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治疗用途
抗肿瘤药；蛋白激酶抑制剂
Tykerb 与卡培他滨联合用于治疗 HER2 过表达且既往接受过蒽环类药物、紫杉烷类药物和曲妥珠单抗治疗的晚期或转移性乳腺癌患者。使用限制：患者在开始 Tykerb 联合卡培他滨治疗前，应在曲妥珠单抗治疗期间出现疾病进展。/美国产品标签包含/
Tykerb 与来曲唑联合用于治疗激素受体阳性且 HER2 过表达的绝经后转移性乳腺癌女性患者，这些患者需要接受激素治疗。 /包含于美国产品标签/
探索治疗：尽管目前已有有效的HER2靶向药物，但对于肿瘤产生耐药性的HER2过表达乳腺癌患者，仍需探索新的联合治疗策略。为了开发新的治疗策略，我们研究了口服异构体选择性组蛋白去乙酰化酶I型抑制剂恩替诺特（entinostat）与HER2/EGFR双重酪氨酸激酶抑制剂拉帕替尼（lapatinib）在HER2阳性乳腺癌细胞中的联合作用。我们采用CellTiter Blue检测、流式细胞术、非依赖性生长实验、定量实时PCR、小干扰RNA、蛋白质印迹法以及乳腺脂肪垫异种移植小鼠模型等方法，评估了联合治疗的协同效应及其机制。研究发现，与单独使用恩替诺特或拉帕替尼相比，两种药物联合使用可协同抑制细胞增殖（P < 0.001），减少体外克隆形成（P < 0.05），并在两种异种移植小鼠模型（BT474 和 SUM190）中显著缩小肿瘤体积或抑制肿瘤生长（P < 0.001）。恩替诺特/拉帕替尼联合用药的协同抗肿瘤活性归因于磷酸化 Akt 的下调，磷酸化 Akt 激活了 FOXO3 的转录活性，从而诱导 Bim1（一种含有 BH3 结构域的促凋亡蛋白）的表达。此外，恩替诺特可增强曲妥珠单抗/拉帕替尼耐药的 HER2 过表达细胞对曲妥珠单抗/拉帕替尼联合用药的敏感性，并增强其抗增殖作用，优于单药或双药联合治疗。本研究提供的证据表明，恩替诺特与HER2靶向药物拉帕替尼联合使用可增强抗肿瘤作用，并通过FOXO3介导的Bim1表达诱导细胞凋亡。……研究结果支持对HER2过表达且对曲妥珠单抗治疗耐药的乳腺癌患者开展恩替诺特、拉帕替尼和曲妥珠单抗联合治疗的临床试验。

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药物警告
/黑框警告/ 警告：肝毒性。临床试验和上市后经验中均观察到肝毒性。肝毒性可能很严重，并有死亡病例报告。死亡原因尚不明确。
临床试验（<1%的患者）和上市后经验中均观察到肝毒性（ALT或AST >正常值上限的3倍，总胆红素 >正常值上限的2倍）。肝毒性可能很严重，已有死亡病例报告。死亡原因尚不明确。肝毒性可能在开始治疗后数天至数月内出现。应在开始治疗前、治疗期间每 4 至 6 周以及根据临床需要监测肝功能（转氨酶、胆红素和碱性磷酸酶）。如果肝功能改变严重，应停止使用泰克布治疗，且不应再次使用泰克布。
拉帕替尼可能对胎儿造成伤害；动物实验已证实可导致胎儿畸形、流产以及幼崽出生后数日内死亡。治疗期间应避免怀孕。如果在妊娠期间使用拉帕替尼，或患者在用药期间怀孕，应告知患者该药物对胎儿的潜在危害。
FDA 妊娠风险等级：D / 有明确风险证据。人体研究、研究数据或上市后数据均显示存在胎儿风险。然而，使用该药物的潜在获益可能大于潜在风险。例如，在危及生命的情况下或患有严重疾病，而其他更安全的药物无法使用或无效时，该药物可能是可接受的。/
有关拉帕替尼（共14条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药效学
拉帕替尼是一种小分子，属于4-苯胺基喹唑啉类激酶抑制剂。拉帕替尼是一种抗癌药物，由葛兰素史克（GSK）开发，用于治疗乳腺癌和肺癌等实体瘤。 2007年3月13日，美国食品药品监督管理局（FDA）批准GW2016与化疗药物卡培他滨联合用于治疗晚期转移性乳腺癌患者。表皮生长因子受体（EGFR）和ErbB-2跨膜酪氨酸激酶是目前癌症治疗中多种机制的靶点。GW2016是ErbB-2和EGFR酪氨酸激酶结构域的强效抑制剂，对纯化的EGFR和ErbB-2的IC50值分别为10.2 nM和9.8 nM。本报告描述了GW2016在过表达EGFR或ErbB-2的人类肿瘤细胞系（包括HN5（头颈癌）、A-431（外阴癌）、BT474（乳腺癌）、CaLu-3（肺癌）和N87（胃癌））的细胞生长试验中的疗效。正常人包皮成纤维细胞、非肿瘤性上皮细胞（HB4a）和非过表达肿瘤细胞（MCF-7 和 T47D）作为阴性对照。化合物暴露 3 天后，EGFR 和 ErbB-2 过表达肿瘤细胞系的平均生长抑制 IC50 值 < 0.16 μM。该化合物对肿瘤细胞相对于人包皮成纤维细胞系的平均选择性为 100 倍。通过 Western blot 分析，在 BT474 和 HN5 细胞系中验证了 EGFR 和 ErbB-2 受体自身磷酸化以及下游调节因子 AKT 磷酸化的抑制。为了评估细胞毒性与生长抑制，在短暂暴露于 GW2016 后，对 HN5 和 BT474 细胞进行了生长实验。将细胞置于五种不同浓度的 GW2016 中处理 3 天，并在去除化合物后继续监测细胞生长 12 天。在每种肿瘤细胞系中，均达到了 GW2016 抑制细胞过度生长的浓度。此外，平行实验中观察到了生长停滞和细胞死亡，并通过溴脱氧尿苷掺入和碘化丙啶染色进行检测。GW2016 以剂量依赖的方式抑制 HN5 和 BT474 细胞的肿瘤异种移植瘤生长，口服剂量为 30 和 100 mg/kg，每日两次，其中 100 mg/kg 剂量可完全抑制肿瘤生长。综上所述，这些结果表明 GW2016 对肿瘤细胞具有极佳的抑制活性，且对肿瘤细胞具有选择性，提示 GW2016 可能对 EGFR 或 ErbB-2 过表达的肿瘤患者具有治疗价值。 [1]

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背景：本研究旨在评估拉帕替尼（一种表皮生长因子受体 (EGFR) 和 HER-2 双重抑制剂）对小鼠膀胱肿瘤细胞系 2 (MBT-2) 放射敏感性的影响（体外和体内）。材料/方法：将 MBT-2 细胞用 200–1000 nM 的拉帕替尼预处理 30 分钟，然后用 2.5–10 Gy 的剂量进行放射治疗 30 分钟。采用克隆形成实验（集落形成实验）评估细胞存活率。Western blot 检测磷酸化表皮生长因子受体 (p-EGFR)、磷酸化 AKT (p-AKT)、磷酸化 HER-2 (p-HER2) 以及凋亡标志物 PARP 的表达。将 MBT-2 细胞皮下注射到 C3H/HeN 小鼠肿瘤异种移植模型中；小鼠被分为四组，分别接受拉帕替尼（200 mg/kg）、放射（15 Gy）、二者联合治疗以及载体（对照组）治疗。结果显示，拉帕替尼预处理联合放射治疗可降低MBT-2细胞的存活率，并抑制放射激活的p-EGFR和p-HER-2水平。接受10 Gy放射剂量和1000 nM拉帕替尼治疗的MBT-2细胞的联合指数（CI）值<1，表明存在协同作用。γ-H2AX表达增加，提示细胞凋亡增强。在肿瘤异种移植小鼠模型中，连续七天每日给予拉帕替尼（200 mg/kg/天），并在第四天联合放疗，其抑制肿瘤生长的效果优于单独放疗。结论：拉帕替尼治疗通过降低辐射介导的 EGFR 和 HER-2 激活，以及造成 DNA 损伤导致细胞凋亡，增强了体外和体内小鼠膀胱癌模型的放射敏感性。

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20 世纪 80 年代中期，人们认识到表皮生长因子受体 (EGFR) 和人表皮生长因子受体 2 (HER2) 的过度表达会对某些癌症患者的预后产生不利影响。由于 EGFR 和 HER2 是细胞生长、分化和存活的关键调节因子，人们认为抑制这些受体可以阻断下游信号传导，从而起到抗增殖作用。事实上，到 20 世纪 80 年代末，研究人员已经研制出一些最早的酪氨酸激酶活性靶向抑制剂。正是在这种背景下，我们开始致力于开发潜在的疾病疗法，采用小分子策略选择性地靶向EGFR和HER2。
开发小分子EGFR/HER2抑制剂的挑战在于确定其对激酶结构域的效力和选择性。我们研究的几个关键组成部分推动了药物发现工作。首先，新型化学方法制备了大量化合物用于测试。其次，广泛的激酶生化筛选平台使我们能够检测化合物对多个激酶靶点的作用。第三，我们构建了一个基于细胞的筛选平台，其中包括依赖于EGFR或HER2信号通路的细胞系以及合适的对照细胞系。该细胞筛选平台不仅能够自动评估分子在细胞复杂环境中的效力和选择性，而且还使我们能够研究EGFR和HER2下游的调控因子，从而将EGFR和HER2抑制与细胞周期阻滞和细胞凋亡联系起来。最后一个组成部分，即体内异种移植模型，使我们能够利用药代动力学和药效学标志物继续开展这项研究。我们与一支高度敬业且积极进取的科学家团队的合作，最终促成了GW2016（也称为GW572016）的创新性发现，该化合物后来发展成为癌症治疗药物拉帕替尼。
拉帕替尼对HER2和EGFR激酶结构域的选择性，以及其在HER2过表达细胞系（例如乳腺癌和胃癌）和EGFR过表达细胞系（例如头颈癌）中的活性，为在特定患者群体中测试拉帕替尼奠定了基础。2007年，美国食品药品监督管理局批准拉帕替尼联合卡培他滨用于治疗晚期或转移性HER2过表达乳腺癌，为曲妥珠单抗（一种靶向HER2胞外结构域的人源化单克隆抗体）治疗后病情进展的患者提供了新的治疗选择。正在进行的临床试验正在研究拉帕替尼在HER2过表达乳腺癌、HER2过表达胃癌和头颈癌中的活性。
展望未来，靶向HER2和EGFR的治疗策略将与大多数未来的癌症疗法类似（即与其他药物联合使用）。近期临床证据表明，在HER2阳性转移性乳腺癌患者中，拉帕替尼联合曲妥珠单抗的双重阻断具有协同作用。此外，HER2信号通路的双重阻断也在新辅助和辅助治疗中进行研究。其他临床研究正在评估HER2和EGFR靶向药物与其他信号通路药物和化疗药物联合使用的疗效。自10年前我们首次发表关于拉帕替尼的研究成果以来，我们对自身努力的成果感到振奋，并将继续致力于改善癌症患者的生活。 https://aacrjournals.org/mct/article/10/11/2019/90946/The-Discovery-of-Lapatinib-GW572016-Commentary-on

C43H44CLFN4O11S3

943.48

942.184

C, 55.81; H, 4.57; Cl, 3.83; F, 2.05; N, 6.05; O, 17.29; S, 10.39

388082-78-8

Lapatinib;231277-92-2;Lapatinib ditosylate;388082-77-7; Lapatinib ditosylate monohydrate;388082-78-8;Lapatinib-d4;1184263-99-7;Lapatinib tosylate;1187538-35-7;Lapatinib-d7 dihydrochloride;Lapatinib-d5;2748212-14-6;Lapatinib-d4-1;1184264-15-0

11557040

Light yellow to yellow solid powder

1.403 g/mL (20.84 °C)

750.7ºC at 760 mmHg

237 - 239 °C

68 °F

n20/D 1.5520(lit.)

12.264

249.46

5

16

13

63

1100

0

XNRVGTHNYCNCFF-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C29H26ClFN4O4S.2C7H8O3S.H2O/c1-40(36,37)12-11-32-16-23-7-10-27(39-23)20-5-8-26-24(14-20)29(34-18-33-26)35-22-6-9-28(25(30)15-22)38-17-19-3-2-4-21(31)13-19;2*1-6-2-4-7(5-3-6)11(8,9)10;/h2-10,13-15,18,32H,11-12,16-17H2,1H3,(H,33,34,35);2*2-5H,1H3,(H,8,9,10);1H2

N-[3-chloro-4-[(3-fluorophenyl)methoxy]phenyl]-6-[5-[(2-methylsulfonylethylamino)methyl]furan-2-yl]quinazolin-4-amine;4-methylbenzenesulfonic acid;hydrate

Lapatinib Ditosylate; 388082-77-7; Tykerb; Lapatinib (ditosylate); Lapatinib (GW-572016) Ditosylate; N-(3-CHLORO-4-((3-FLUOROBENZYL)OXY)PHENYL)-6-(5-(((2-(METHYLSULFONYL)ETHYL)AMINO)METHYL)FURAN-2-YL)QUINAZOLIN-4-AMINE BIS(4-METHYLBENZENESULFONATE); Lapatinib ditosylate anhydrous; 4WK72K94MC;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : 50 mg/mL (53.00 mM)

配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (2.65 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。