AMPK; Autophagy; Mitophagy; Human Endogenous Metabolite

Acadesine (500 μM) 经过长达 30-40 分钟的处理后，可增加分离肝细胞提取物中的 ZMP 含量，然后保持相当恒定在约 4 nmol/g。 Acadesine (500 μM) 在 15 分钟内导致大鼠肝细胞中 AMPK 瞬时激活 12 倍，以及脂肪细胞中 AMPK 瞬时激活 2-3 倍，而不影响 ATP、ADP 或 AMP 水平。 Acadesine (500 μM) 会显着抑制大鼠肝细胞中脂肪酸和甾醇的合成。 Acadesine (500 μM) 还会导致 HMG-CoA 还原酶急剧失活。[1] cadesine 的 EC50 为 380 M，以剂量依赖性方式诱导 B-CLL 细胞凋亡。阿卡地辛 (0.5 mM) 将 20 名代表性患者的 B-CLL 细胞活力从 68% 降低至 26%。 Caspase 激活和线粒体细胞色素 c 释放由阿卡地辛 (acadesine) (0.5 mM) 引起。必须摄取 Acadesine (0.5 mM) 并磷酸化，才能引起 B-CLL 细胞凋亡并激活 AMPK。 Acadesine (0.5 mM) 显着降低 B 细胞的活力，但不降低 T 细胞的活力，对 B-CLL 患者的 T 细胞的活力影响极小。 [2] 在 K562、LAMA-84 和 JURL-MK1 细胞中，杜松碱会导致细胞代谢丧失。它还可以有效杀死具有 T315I-BCR-ABL 突变的伊马替尼耐药 K562 细胞和 Ba/F3 细胞。由于 GF109203X 和 Ro-32-0432（经典和新 PKC 的抑制剂）都会抵消 Accadesine 的作用，因此 Accadesine 会导致 K562 细胞中几种 PKC 同工型的运动和激活。第 10 天，阿卡地辛以剂量依赖性方式抑制 K562 集落形成。其生长抑制作用在浓度为 0.25 mM 时就已经很明显，并且在 2.5 mM 时达到最大。 [3] Accadesine 在体外以浓度依赖性方式降低 LPS 刺激的中性粒细胞上 CD18 的表达。 [4] 血液中的 cadesine (1 mM) 可显着抑制由 N-甲酰基-甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸引起的粒细胞 CD11b 上调（平均 61%）。 [5]

在 K562 细胞异种移植小鼠模型中，cadesine (50 mg/kg) 显着降低肿瘤的发展。 [3] 当施用卡地辛 (10 mg/kg) 时，猪的血流动力学稳定性需要更多的液体。猪死腔通气、恒定潮气量时的峰值吸气压以及 LPS 诱导的肺毛细血管蛋白通透性均受到 cadesine (10 mg/kg) 的抑制。 [4]

在半固体甲基纤维素培养基中，向 K562 细胞系或原代细胞（103 CD34+ 细胞/mL）给予阿卡地辛。细胞系和原代 CD34+ 细胞分别用 MethoCult H4100 或 H4236 培养。培养 10 天后，通过添加 1 mg/mL 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物 (MTT) 试剂发现菌落，并使用 Image J 对它们进行评分量化软件。

将 HepG2 细胞（5×105 个细胞）接种到 6 孔培养板中，然后在转染前在无血清培养基中培养 12 小时。 FuGENE6转染试剂用于转染一微克质粒。转染5小时后，除去培养基，然后将添加或不添加AICAR (0.1-1.0 mM)的培养基添加到每个孔中。每 24 小时更换一次刺激介质[1]。

Mice: Fourteen-week-old lean (Lepob/+ or Lepob/+) and ob/ob (Lepob/Lepob) male mice are uesd. After the 14-day experimental treatment (24 h after AICAR injection, including a 12-h fast), the plantar flexor complex muscle is cleanly (tendon-to-tendon) excised from an anesthetized mouse. The muscle is rapidly weighed, followed by histology processing or freezing in liquid nitrogen and storing at -80°C. Following a direct needle puncture into the heart to collect blood, the anesthetized mice are killed by transection of the diaphragm and removal of the entire heart. Subcutaneous injections of AICAR or saline (control) are made into the lateral distal region of the back. AICAR is given orally once daily for 14 days at a dose of 0.5 mg/g. Injections of saline (control) are performed in a manner and at volumes identical to those used for AICAR treatment. Prior to death, a person's weight is measured.
Rats: Male ZDF rats aged 5 weeks received a single subcutaneous injection of AICAR (0.5 mg/g body weight) or underwent a single bout of treadmill running (60 minutes, speed of 25 m/min at 5% incline). Controls (n=5 in each group) are untreated ZDF rats. Rats are killed by cervical dislocation one hour following subcutaneous AICAR injection or right away following treadmill use. Red and white gastrocnemius muscles are immediately removed to prevent the effects of muscle spasm and hypoxia, and they are then immediately freeze clamped to measure the AMPK activity later.

[1]. Eur J Biochem. 1995 Apr 15;229(2):558-65.

[2]. Blood. 2003 May 1;101(9):3674-80.

[3]. PLoS One. 2009 Nov 18;4(11):e7889.

C9H14N4O5

258.2313

258.09642

C, 41.86; H, 5.46; N, 21.70; O, 30.98

2627-69-2

AICAR phosphate;681006-28-0;AICAR-13C2,15N;1609374-70-0

Solid powder

C1=NC(=C(N1[C@H]2[C@@H]([C@@H]([C@H](O2)CO)O)O)N)C(=O)N

RTRQQBHATOEIAF-UUOKFMHZSA-N

InChI=1S/C9H14N4O5/c10-7-4(8(11)17)12-2-13(7)9-6(16)5(15)3(1-14)18-9/h2-3,5-6,9,14-16H,1,10H2,(H2,11,17)/t3-,5-,6-,9-/m1/s1

5-amino-1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]imidazole-4-carboxamide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~51 mg/mL (~197.5 mM)
Water: <1 mg/mL
Ethanol: <1 mg/mL

2% DMSO+40% PEG 300+2% Tween 80+ddH2O: 6mg/mL 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。