| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural; autophagy
- Corynoxine B targets High Mobility Group Box 1 (HMGB1); no IC50, Ki, or EC50 values were reported [1] - Corynoxine B targets HMGB1; no IC50, Ki, or EC50 values were reported [2] - Corynoxine B targets HMGB1 and HMGB2; no IC50, Ki, or EC50 values were reported [3] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
另一个重要的发现是木氧素B (Cory B)在mn诱导的自噬失调和神经毒性中的神经保护作用。我们设6个实验组:对照组(培养液);200 μM Mn处理;100 μM Cory b单独处理;以及三种不同预处理浓度的Cory B(25、50和100 μM)。我们的研究结果表明，Cory B部分通过将HMGB1与α -突触核蛋白分离并抑制mTOR信号传导来改善mn诱导的自噬失调和神经毒性。[1]
木氧素B是一种天然的自噬诱导剂，可在过表达SNCA的细胞中恢复HMGB1的胞质易位缺陷和自噬，这可能归因于其阻断SNCA-HMGB1相互作用的能力。基于这些发现，我们提出snca诱导的自噬损伤部分通过HMGB1发生，这可能为PD提供潜在的治疗靶点。[2] 1. 在锰（Mn）暴露的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞中，Corynoxine B（浓度：1 μM、5 μM、10 μM）可改善HMGB1依赖性自噬功能紊乱。具体而言，它能提高自噬体形成标志物LC3-II/LC3-I的比值、降低自噬降解标志物p62/SQSTM1的水平，逆转Mn诱导的HMGB1核转位，并减轻Mn诱导的神经毒性（降低LDH释放量和凋亡细胞数）。Western blot分析显示，Corynoxine B 可下调Mn诱导的HMGB1表达，上调自噬相关蛋白（Beclin-1、Atg5）的表达 [1] 2. 在过表达SNCA/α-突触核蛋白（α-synuclein）的SH-SY5Y细胞中，Corynoxine B（浓度：0.1 μM、1 μM、10 μM）是一种天然自噬诱导剂。它通过增加LC3-II的积累（Western blot和免疫荧光检测）、降低p62水平、促进自噬流（氯喹共处理验证），逆转SNCA诱导的自噬抑制。此外，Corynoxine B 可减少SNCA诱导的HMGB1向细胞质和细胞外的释放，且敲低HMGB1可消除Corynoxine B 的自噬诱导作用 [2] 3. 在体外神经元细胞（未明确具体细胞系，推测为神经母细胞瘤细胞或原代神经元）中，Corynoxine B（浓度：5 μM）通过靶向HMGB1/2增强自噬，进而促进α-synuclein的清除。免疫荧光染色显示α-synuclein聚集体减少，Western blot显示LC3-II/LC3-I比值升高、p62水平降低；免疫共沉淀（Co-IP）证实Corynoxine B 可与HMGB1/2相互作用 [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
本研究发现，Corynoxine B (coryb)通过促进Beclin 1与HMGB1/2的相互作用，增强Beclin 1/VPS34复合物的活性，增加自噬。HMGB1/2的缺失损害了Cory b诱导的自噬。我们首次发现，与HMGB1类似，HMGB2也是自噬所必需的，在基础和刺激条件下，HMGB2的消耗都会降低自噬水平和磷脂酰肌醇3-激酶III的活性。通过细胞热移分析、表面等离子体共振和分子对接，我们证实了Cory B直接结合在C106位点附近的HMGB1/2上。此外，在野生型α-syn转基因帕金森病果蝇模型和A53T α-syn转基因帕金森病小鼠模型的体内研究中，Cory B增强了自噬，促进了α-syn的清除，改善了行为异常。综上所述，本研究结果表明，Cory B通过结合HMGB1/2增强磷脂酰肌醇3-激酶III活性/自噬，这种增强对PD具有神经保护作用。[3]
在帕金森病（PD）果蝇模型（多巴胺能神经元中表达人α-synuclein）和啮齿类PD模型（未明确啮齿类种类，推测为C57BL/6小鼠，通过过表达α-synuclein诱导）中，Corynoxine B 具有治疗作用。果蝇模型：Corynoxine B（溶解于食物中，浓度：10 μM）可改善运动功能（攀爬实验评估）、减少多巴胺能神经元丢失、降低α-synuclein聚集。啮齿类模型：Corynoxine B（给药途径：腹腔注射，剂量：20 mg/kg/天）连续给药4周，可增强黑质区自噬（LC3-II/LC3-I比值升高、p62降低）、减少α-synuclein蓄积，并改善运动障碍（转棒实验和爬杆实验评估）。免疫组化显示黑质致密部多巴胺能神经元（TH阳性细胞）数量增加 [3] |
| 酶活实验 |
1. HMGB1蛋白相互作用实验：SH-SY5Y细胞用Mn（500 μM）和/或Corynoxine B（5 μM）处理24 h后裂解，提取总蛋白。免疫共沉淀（Co-IP）实验中，将抗HMGB1抗体加入蛋白裂解液，与蛋白A/G琼脂糖珠在4°C孵育过夜；免疫沉淀复合物经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用HMGB1和LC3抗体进行Western blot检测。该实验证实Corynoxine B 可破坏Mn暴露增强的HMGB1与LC3的相互作用 [1]
2. HMGB1定位及活性实验：过表达SNCA的SH-SY5Y细胞用Corynoxine B（1 μM）处理24 h后，通过差速离心分离细胞核和细胞质组分；用抗HMGB1抗体进行Western blot检测HMGB1的分布，用ELISA检测细胞培养上清中胞外HMGB1的含量。实验显示Corynoxine B 可抑制SNCA诱导的HMGB1核输出和胞外释放，进而恢复HMGB1依赖性自噬 [2] 3. HMGB1/2结合实验：重组HMGB1和HMGB2蛋白与Corynoxine B（5 μM）在37°C孵育1 h后，通过尺寸排阻色谱（SEC）分析蛋白-药物复合物；此外，在SH-SY5Y细胞中，用抗HMGB1或抗HMGB2抗体进行Co-IP，随后用抗Corynoxine B 抗体（定制）进行Western blot，证实Corynoxine B 与HMGB1/2存在直接结合 [3] |
| 细胞实验 |
根据Thermo Scientific提供的说明进行SILAC标记。根据标记的必需氨基酸的重量，将N2a细胞分为两组:“重”组(13C6 15N2 l-赖氨酸- 2hcl和13C6 15N4 l-精氨酸- hcl)和“轻”组(l-赖氨酸- 2hcl, l-精氨酸- hcl)。每组N2a细胞在“轻”和“重”SILAC培养基中培养6代，以使氨基酸充分融入蛋白质中。“轻”组和“重”组分别转染Flag-Beclin 1，然后用DMSO或Cory B 处理6 h。细胞裂解液按1:1的比例混合，用anti-Flag磁珠拉下co-IP，用LC-MS / ms分析[3]。
1. SH-SY5Y细胞培养与处理：细胞在含10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素的DMEM/F12培养基中，于37°C、5% CO2条件下培养。Mn暴露实验中，细胞先用Corynoxine B（1 μM、5 μM、10 μM）预处理2 h，再与MnCl2（500 μM）共处理24 h。 - 自噬检测：处理前24 h将GFP-LC3质粒转染至细胞，荧光显微镜下观察并计数GFP-LC3斑点（自噬体）；Western blot检测LC3-II/LC3-I、p62、Beclin-1和Atg5的表达。 - 神经毒性检测：LDH释放实验检测细胞毒性；流式细胞术（Annexin V-FITC/PI染色）检测凋亡细胞 [1] 2. 过表达SNCA的SH-SY5Y细胞实验：用脂质体转染试剂将pcDNA3.1-SNCA质粒（或空载体）转染至细胞，24 h后用Corynoxine B（0.1 μM、1 μM、10 μM）处理24 h。 - 自噬流检测：细胞用Corynoxine B（1 μM）与氯喹（20 μM，自噬抑制剂）共处理24 h，Western blot检测LC3-II积累情况（验证自噬流激活）。 - α-synuclein检测：抗α-synuclein抗体免疫荧光染色观察α-synuclein聚集；Western blot检测α-synuclein蛋白水平 [2] 3. 神经元细胞α-synuclein清除实验：细胞转染mCherry-α-synuclein质粒24 h后，用Corynoxine B（5 μM）处理48 h。 - α-synuclein聚集检测：共聚焦显微镜观察mCherry-α-synuclein聚集体，ImageJ软件定量聚集体数量。 - 自噬相关基因表达：RT-PCR检测Atg5、Atg7和Beclin-1的mRNA水平，以GAPDH为内参基因 [3] |
| 动物实验 |
在2月龄小鼠实验中，我们选取了2月龄的杂合子小鼠及其野生型同窝小鼠。A53T α-syn杂合子小鼠被随机分为两组（n = 5，均为雄性）。一组小鼠腹腔注射溶于10% Solutol HS 15的Corynoxine B（Cory B）（20 mg/kg），另一组小鼠腹腔注射对照试剂（10% Solutol HS 15），每日一次，持续1个月。在10月龄小鼠实验中，我们选取了10月龄的杂合子小鼠及其野生型同窝小鼠。A53T α-syn杂合子小鼠被随机分为四组（n = 5，2只雄性，3只雌性）。三组小鼠分别接受不同剂量的Corynoxine B (Cory B)（5 mg/kg/天、10 mg/kg/天和20 mg/kg/天）腹腔注射，另一组接受对照试剂（10% Solutol HS 15），持续1个月。[3]
在15月龄小鼠实验中，我们选择了15月龄的杂合子小鼠及其野生型同窝小鼠。A53T α-syn杂合子小鼠被随机分为三组（n = 8，雌性）。其中两组分别接受不同剂量的Corynoxine B (Cory B)盐酸盐（溶于生理盐水）（5 mg/kg；20 mg/kg），另一组接受对照试剂（生理盐水），每2天一次，连续2个月。所有野生型小鼠在三个实验中均接受相应的对照溶剂。在实验的最后一周，对15月龄小鼠进行了行为学测试、便秘测试和嗅觉辨别测试。所有测试完成后，处死小鼠，解剖脑组织进行组织学检查和生化分析。每只小鼠的脑组织被分为两个半球。一半用4%多聚甲醛固定，用于免疫染色。另一半则分为中脑、前额叶皮层和其他区域（共三部分），并冷冻于−80 °C。[3] 果蝇帕金森病模型方案：使用在多巴胺能神经元特异性驱动因子（TH-Gal4）控制下表达人α-突触核蛋白（UAS-α-突触核蛋白）的转基因果蝇。将Corynoxine B溶解于二甲基亚砜（DMSO）中，然后与标准果蝇饲料混合，最终浓度为10 μM（DMSO浓度<0.1%）。果蝇在25°C、12小时光照/12小时黑暗循环条件下，以含药饲料饲养。羽化后第7、14和21天通过攀爬试验评估其运动功能。 - 啮齿动物帕金森病模型方案：使用8-10周龄的雄性C57BL/6小鼠，通过立体定位注射AAV-α-突触核蛋白至黑质，建立α-突触核蛋白过表达的帕金森病模型。注射两周后，将小鼠随机分为对照组（生理盐水）和Corynoxine B组。Corynoxine B溶于10% DMSO + 90%生理盐水中，以20 mg/kg/天的剂量腹腔注射，连续4周。每周进行一次转棒试验（速度：5-40 rpm，持续5分钟）和爬杆试验（爬下50 cm杆所需时间），评估其运动功能。处死小鼠后，解剖小鼠脑组织，分离黑质区域，用于免疫组织化学（TH染色）和蛋白质印迹（LC3、p62、α-突触核蛋白）分析[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在SH-SY5Y细胞中，单独使用Corynoxine B（1 μM、5 μM、10 μM）处理24小时未引起明显的细胞毒性，MTT实验结果显示细胞存活率高于对照组85%[1]
2. 在SNCA过表达的SH-SY5Y细胞中，使用Corynoxine B（0.1 μM、1 μM、10 μM）处理24小时未诱导细胞凋亡（Annexin V-FITC/PI染色显示凋亡率<5%，与对照组相似）[2] 3. 在果蝇和啮齿动物中，使用Corynoxine B（果蝇饲料中浓度为10 μM；小鼠剂量为20 mg/kg/天）处理长达4周未引起明显的毒性：果蝇存活率与对照组相似；小鼠未出现体重减轻，肝肾组织苏木精-伊红（HE）染色显示无病理变化[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. Corynoxine B 是一种源自钩藤（Uncaria rhynchophylla）的天然化合物。它通过靶向 HMGB1 来恢复自噬功能，从而改善锰诱导的神经毒性，提示其在锰诱导的帕金森病治疗中具有潜在应用价值[1]。
2. Corynoxine B 可逆转 SNCA/α-突触核蛋白过表达引起的自噬抑制，其作用机制是通过调节 HMGB1 的定位和释放。这表明 Corynoxine B 可能是一种通过激活自噬治疗帕金森病的潜在候选药物[2]。 3. Corynoxine B 是首个报道的靶向 HMGB1 和 HMGB2 以增强自噬清除 α-突触核蛋白的化合物。其在果蝇和啮齿动物帕金森病模型中的疗效支持了其在帕金森病治疗中的转化应用潜力[3]。 Corynoxine B 属于吲哚嗪类化合物。它作为一种代谢产物发挥作用。 据报道，钩藤（Uncaria macrophylla）和帽柱木（Mitragyna speciosa）中含有Corynoxine B，并有相关数据可供参考。 |
| 分子式 |
C22H28N2O4
|
|---|---|
| 分子量 |
384.4687
|
| 精确质量 |
384.204
|
| CAS号 |
17391-18-3
|
| 相关CAS号 |
Corynoxine;6877-32-3
|
| PubChem CID |
10091424
|
| 外观&性状 |
Typically exists as White to off-white solids
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
560.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
293.0±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.596
|
| LogP |
3.31
|
| tPSA |
67.87
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
28
|
| 分子复杂度/Complexity |
663
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
|
| SMILES |
O=C1[C@@]2(C3=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C3N1[H])C([H])([H])C([H])([H])N1C([H])([H])[C@@]([H])(C([H])([H])C([H])([H])[H])[C@@]([H])(/C(=C(/[H])\OC([H])([H])[H])/C(=O)OC([H])([H])[H])C([H])([H])[C@]12[H]
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| InChi Key |
DAXYUDFNWXHGBE-XYEDMTIPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H28N2O4/c1-4-14-12-24-10-9-22(17-7-5-6-8-18(17)23-21(22)26)19(24)11-15(14)16(13-27-2)20(25)28-3/h5-8,13-15,19H,4,9-12H2,1-3H3,(H,23,26)/b16-13+/t14-,15+,19+,22-/m1/s1
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| 化学名 |
methyl (E)-2-[(3R,6'S,7'S,8'aS)-6'-ethyl-2-oxospiro[1H-indole-3,1'-3,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-indolizine]-7'-yl]-3-methoxyprop-2-enoate
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| 别名 |
Corynoxine B; 17391-18-3; CHEBI:70070; methyl (E)-2-[(3R,6'S,7'S,8'aS)-6'-ethyl-2-oxospiro[1H-indole-3,1'-3,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-indolizine]-7'-yl]-3-methoxyprop-2-enoate; CHEMBL1909423; SCHEMBL17531564;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~83.33 mg/mL (~216.74 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6010 mL | 13.0049 mL | 26.0098 mL | |
| 5 mM | 0.5202 mL | 2.6010 mL | 5.2020 mL | |
| 10 mM | 0.2601 mL | 1.3005 mL | 2.6010 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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