| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Natural product; Akt/mTOR
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| 体外研究 (In Vitro) |
Corynoxine(10, 20, 40 μM)处理稳定表达 A53T α-突触核蛋白的 PC12 细胞 24 小时后,通过蛋白质印迹分析检测发现,能以剂量依赖的方式显著降低 A53T α-突触核蛋白的水平。 [1]
Corynoxine(20 μM)处理表达 A53T α-突触核蛋白的 PC12 细胞 24 小时后,增加了自噬标志物 LC3-II 的蛋白水平,并降低了自噬底物 p62 的水平,表明诱导了自噬。 [1] 通过在用 GFP-LC3 质粒转染的 HeLa 细胞中进行观察,用 20 μM Corynoxine 处理 24 小时后,GFP-LC3 斑点(自噬体)的数量增加,这证实了 Corynoxine 的自噬增强作用。 [1] 在 N2a 和 SH-SY5Y 细胞中,Corynoxine(6.25-25 μM;6-12 小时)剂量依赖性地增强自噬特异性标记物 LC3-II 的表达[1]。通过自噬诱导,corynoxine(25 μM;48 小时)可刺激诱导型 PC12 细胞中野生型 (WT) 和突变型 (A53T) α-syn 的降解[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
给予 Corynoxine(100-100 mg/kg,通过口服灌胃)的小鼠显示出延长的硫喷妥钠诱导的催眠状态[2]。在果蝇中,Corynoxine (10–100 μM) 可在 12 小时内促进自噬[1]。
Cory(corynoxine)诱导果蝇自噬: 为了证实Cory在体内的自噬诱导作用,我们首先在25°C下将Cg-GAL4飞行系与UAS-GFP-Atg8a飞行系杂交,得到了Cg-GAL4-的2龄幼虫 > UAS-GFP-Atg8a。我们在25°C下用含有不同浓度Cory(10-100μM)的食物喂养这些幼虫12小时。在我们之前的研究中,Cory B被证实可以诱导果蝇的自噬;因此我们选择它作为阳性对照,并使用0.4%DMSO作为阴性对照。我们收集了经过处理的幼虫,并准备了脂肪体,通过共聚焦显微镜进行拍摄。Atg8(自噬相关蛋白)是LC3的同源物,是形成自噬体膜所需的泛素样蛋白。与对照组相比,Cory(10-100μM)和Cory B(100μM)都诱导了Atg8的斑点形成(图3),表明Cory还可以诱导果蝇幼虫脂肪体中的自噬[1]。 |
| 细胞实验 |
细胞培养与处理: 使用稳定表达人 A53T 突变型 α-突触核蛋白的 PC12 细胞。细胞在生长培养基中培养。处理时,将 Corynoxine 溶解于 DMSO 中,然后在细胞培养液中稀释至最终浓度(10, 20, 40 μM)。使用等体积的 DMSO 作为载体对照。细胞处理时间为 24 小时。 [1]
蛋白质印迹分析 (Western blot): 处理结束后,收集细胞并进行裂解。测定裂解液的蛋白质浓度。取等量的蛋白质通过 SDS-PAGE 进行分离,然后转移至膜上。将膜进行封闭,然后与针对 α-突触核蛋白、LC3、p62、磷酸化 Akt (Ser473)、Akt、磷酸化 mTOR (Ser2448)、mTOR 以及 β-肌动蛋白(作为上样对照)的一抗在 4°C 下孵育过夜。洗涤后,与二抗孵育。使用增强化学发光检测系统对蛋白条带进行显影。 [1] GFP-LC3 斑点形成实验: 用 GFP-LC3 质粒转染 HeLa 细胞。24 小时后,用 20 μM Corynoxine 或载体对照继续处理 24 小时。随后固定细胞。使用荧光显微镜观察并拍摄 GFP-LC3 斑点(自噬体)的形成。含有超过 10 个 GFP-LC3 斑点的细胞被认为发生了自噬。 [1] 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型: N2a 和 SH-SY5Y 细胞 测试浓度: 6.25、12.5、25 μM 孵育时间:6、12 小时 实验结果:在神经元细胞系中诱导自噬。 |
| 动物实验 |
催眠试验:将钩藤(Uncaria macrophylla)生物碱组分(含钩藤碱、钩藤碱B、钩藤碱和异钩藤碱)腹腔注射(ip)给小鼠。30分钟后,腹腔注射硫喷妥钠(40 mg/kg)进行试验。以翻正反射消失作为催眠的标准。记录催眠持续时间(睡眠时间)。生物碱组分溶解于含一滴吐温80的生理盐水中。[2]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
所提供的文献中未报道纯化的Corynoxine的具体毒性数据(例如,LD50、器官毒性)。[2] 仅指出,从钩藤(Uncaria macrophylla)中提取的生物碱组分(包含Corynoxine)在测试剂量(5、10、20 mg/kg,腹腔注射)下未引起小鼠出现任何可观察到的毒性症状或死亡。[2]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
科里诺辛(Corynoxine)是一种从钩藤(Uncaria macrophylla)的钩状茎中分离得到的天然吲哚生物碱。[1] 研究表明,科里诺辛通过增强自噬作用促进α-突触核蛋白(一种与帕金森病相关的蛋白质)的清除。[1] 其作用机制涉及抑制Akt/mTOR通路。Western blot结果显示,在表达A53T α-突触核蛋白的PC12细胞中,20 μM科里诺辛处理降低了Akt(Ser473位点)和mTOR(Ser2448位点)的磷酸化水平,而Akt和mTOR的总蛋白水平未受影响。 [1]
文献[2]中报道的催眠作用是四种生物碱(柯诺辛、柯诺辛B、钩藤碱、异钩藤碱)的混合物所致,而非单独的柯诺辛。该混合物(20 mg/kg,腹腔注射)显著延长了硫喷妥钠诱导的小鼠睡眠时间。该混合物的作用强于等剂量下任何单一生物碱的作用。[2] |
| 分子式 |
C22H29CLN2O4
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|---|---|
| 分子量 |
420.93
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| 精确质量 |
420.181585
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| 相关CAS号 |
Corynoxine;6877-32-3
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| PubChem CID |
21148450
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
67.9 Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
663
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
CC[C@@H]1CN2CC[C@@]3([C@@H]2C[C@@H]1/C(=C\OC)/C(=O)OC)C4=CC=CC=C4NC3=O.Cl
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| InChi Key |
YZEHFWIJWUTTOF-UXWWZSLJSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H28N2O4.ClH/c1-4-14-12-24-10-9-22(17-7-5-6-8-18(17)23-21(22)26)19(24)11-15(14)16(13-27-2)20(25)28-3;/h5-8,13-15,19H,4,9-12H2,1-3H3,(H,23,26);1H/b16-13+;/t14-,15+,19+,22+;/m1./s1
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| 化学名 |
methyl (E)-2-[(3S,6'S,7'S,8'aS)-6'-ethyl-2-oxospiro[1H-indole-3,1'-3,5,6,7,8,8a-hexahydro-2H-indolizine]-7'-yl]-3-methoxyprop-2-enoate;hydrochloride
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| 别名 |
Corynoxine (hydrochloride); orb1689909;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3757 mL | 11.8785 mL | 23.7569 mL | |
| 5 mM | 0.4751 mL | 2.3757 mL | 4.7514 mL | |
| 10 mM | 0.2376 mL | 1.1878 mL | 2.3757 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。