| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 500μg |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cucurbitacin E induces G2/M phase cell cycle arrest via the integration of GADD45γ with CDC2, involving the downregulation of CDC2 and cyclin B1. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在一项体外研究中，将葫芦素 E (CuE) 暴露于浓度不断增加的结直肠癌 (CRC) 细胞系（0、2.5、5 和 7.5 μM）持续 24 小时，以研究 CuE 对 CRC 细胞的抗癌作用。接下来，我们使用 MTT 方法测量经葫芦素 E 处理的癌细胞的增殖情况。对于原发性结肠癌细胞，姜黄素 E 促进形态学改变。在显微镜下观察，葫芦素 E (5 μM) 处理在 6 至 24 小时内导致原发性结肠癌细胞的形态发生显着变化。通过阻止原代 CRC 细胞中 GADD45γ 基因和细胞周期蛋白 B1/CDC2 复合物的产生，姜黄素 E 抑制细胞周期处于细胞周期的 G2/M 期，进而阻止其增殖 [1]。
葫芦素E（CuE）以剂量依赖方式抑制五种原代人结直肠癌（CRC）细胞系（CP1-CP5）的存活和增殖，在用0至7.5 μM浓度处理24小时后，通过MTT法测定。去除CuE后，抑制效应部分不可逆。 通过碘化丙啶染色和流式细胞术确定，CuE在这些CRC细胞系中以剂量依赖方式诱导G2/M期细胞周期阻滞。通过MPM-2抗体染色评估的有丝分裂指数显著增加，表明细胞阻滞在中期。 在浓度高达7.5 μM处理4-6小时的条件下，通过Annexin V/PI染色和流式细胞术显示，CuE处理在CRC细胞中未诱导显著的细胞凋亡、坏死或caspase-3激活。也未显著降低线粒体膜电位。 细胞内活性氧（ROS）水平未因CuE处理而显著增加。 蛋白质印迹和免疫共沉淀分析表明，CuE处理导致CDC2蛋白表达下调和细胞周期蛋白B1/CDC2复合物解离。 基因表达谱（微阵列）、RT-PCR和qRT-PCR分析证实，CuE下调了CRC细胞中细胞周期蛋白B1和CDC2的mRNA水平，并上调了生长停滞和DNA损伤诱导蛋白45（GADD45）家族基因（GADD45α, β, γ）的mRNA水平。 免疫共沉淀进一步证明，CuE处理增强了GADD45γ蛋白与CDC2的结合，从而导致细胞周期蛋白B1/CDC2复合物活性的抑制。 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
使用代谢综合征高脂饮食小鼠模型 (HFD-MetS) 评估了葫芦素 E (CuE) 对体重和脂肪组织生物学的影响。与仅用载体治疗的 HFD-MetS 小鼠相比，葫芦素 E (0.5 mg/kg) 治疗的小鼠体重显着减轻。在 HFD-MetS 小鼠中，葫芦素 E 治疗降低了所有脂肪垫重量。与 HFD-MetS 小鼠相比，用葫芦素 E 治疗后，小鼠的总脂肪减少了 55%。代谢综合征与腹部肥胖密切相关。经过葫芦素 E 治疗后，HFD MetS 小鼠的中央肥胖减少至 50%，证明了葫芦素 E 靶向 MetS 的功效 [2]。
在高脂饮食（HFD）诱导的代谢综合征（MetS）小鼠模型中，口服给予葫芦素E（0.5 mg/kg/天，持续10周）显著降低了体重增加，并减少了各脂肪垫（性腺周围、肾周围、肠系膜、皮下）的重量。总身体脂肪含量和内脏脂肪指数也降低了。 CuE处理减轻了内脏脂肪中的脂肪细胞肥大，并降低了内脏脂肪组织中脂肪生成基因（SREBP、FASN、ACACA）的mRNA表达。 在CuE处理的HFD-MetS小鼠中，血清脂联素水平升高，而血清瘦素和TNF-α水平降低。 CuE处理降低了内脏脂肪中巨噬细胞浸润标志物（CD11b、MCP-1、CCR2）的mRNA表达。 CuE改善了葡萄糖耐受不良（通过葡萄糖耐量试验GTT显示），并改善了胰岛素抵抗（通过降低的基础胰岛素水平和在葡萄糖刺激的胰岛素分泌试验GSIS期间维持较低的胰岛素分泌来证明）。 对CuE处理小鼠骨骼肌的蛋白质印迹分析显示，在胰岛素注射后，IRS-1丝氨酸磷酸化（Ser307）减少，而AKT（Ser473）和AMPK（Thr172）的磷酸化（激活）增强。 CuE处理显著降低了HFD-MetS小鼠血清中的游离脂肪酸（FFA）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和总胆固醇水平。 [2] |
| 细胞实验 |
对于细胞增殖实验（MTT法），将细胞接种于96孔板中，并用0、2.5、5或7.5 μM的葫芦素E处理1至3天。加入MTT染料，孵育至少4小时，用DMSO终止反应，在540 nm处测量吸光度。
对于细胞周期分析，用CuE（0, 2.5, 5, 7.5 μM）处理细胞24小时，收集细胞，冷乙醇固定，用碘化丙啶/RNaseA溶液染色，并通过流式细胞术分析。 对于细胞凋亡评估，用CuE（0, 2.5, 5, 7.5 μM）处理细胞6小时，使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测凋亡细胞，然后进行流式细胞术分析。 对于线粒体膜电位（ΔΨm）评估，用CuE处理6小时的细胞用JC-1染料染色，固定，并通过流式细胞术分析。 对于细胞内ROS测量，用CuE处理细胞，与DCFH-DA荧光染料孵育，并使用检测试剂盒通过流式细胞术评估ROS/超氧化物水平。 对于有丝分裂指数分析，用CuE处理24小时的细胞被固定，用MPM-2一抗和FITC偶联的二抗染色，用碘化丙啶复染，并通过流式细胞术分析。 对于蛋白质印迹分析，从CuE处理的细胞中提取蛋白质，通过SDS-PAGE分离，转移到PVDF膜上，封闭，与抗β-肌动蛋白和CDC2的一抗孵育，然后与荧光二抗孵育，并使用红外成像系统检测。 对于免疫共沉淀（Co-IP），将细胞蛋白质与抗细胞周期蛋白B1或GADD45γ的抗体一起孵育过夜。使用蛋白A/G琼脂糖珠沉淀蛋白质-抗体复合物。然后通过蛋白质印迹法分析沉淀物中的CDC2蛋白。 对于基因表达谱分析，从未处理或CuE处理（4小时）的细胞中分离总RNA，并使用全人类基因组微阵列进行分析。 对于RT-PCR，从总RNA合成cDNA。在定义的热循环条件下，使用针对细胞周期蛋白B1、CDC2和GADD45γ的基因特异性引物进行PCR。产物通过琼脂糖凝胶电泳分析。 对于定量实时PCR（qRT-PCR），使用SYBR Green PCR预混液和基因特异性引物。反应在标准循环条件下在实时PCR系统上运行，数据使用18S rRNA作为内参进行归一化。 [1] |
| 动物实验 |
C57BL/6雄性小鼠喂食高脂饮食（HFD；60%脂肪）8周以诱导代谢综合征（MetS）。选择具有明显肥胖且空腹血糖≥126 mg/dl的小鼠作为MetS小鼠。
随后，MetS小鼠每日灌胃给予溶于0.5%羧甲基纤维素（CMC）的葫芦素E，持续10周。设置两个剂量组：低剂量组（0.25 mg/kg/天）和高剂量组（0.5 mg/kg/天）。 阳性对照组灌胃给予奥利司他（50 mg/kg/天）。 对照组包括喂食标准饮食（SD）并灌胃给予0.5% CMC溶剂的小鼠。 每周监测小鼠体重。治疗结束后，小鼠禁食以进行特定检测（葡萄糖耐量试验[GTT]、葡萄糖刺激胰岛素分泌试验[GSIS]），并采集组织（脂肪、肌肉）和血液进行生化和分子分析。 [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
葫芦素E是一种葫芦素类化合物，其羊毛甾烷骨架被羟基、甲基和氧代基团多重取代，且在1、5和23位具有不饱和键。它既是一种葫芦素，也是一种叔α-羟基酮。
据报道，葫芦素E存在于秋海棠（Begonia nantoensis）、假马齿苋（Bacopa monnieri）以及其他有相关数据的生物体中。 葫芦素E是一种天然四环三萜化合物，也称为α-elaterin，来源于甜瓜（Cucumis melo L.）等植物。 它已被用于传统医学，并具有抗炎和抗癌特性。 在本研究中，在测试浓度下，葫芦素E通过诱导不可逆的G2/M期细胞周期阻滞而非细胞凋亡，对原代人结直肠癌细胞表现出强效的抗癌活性。该研究提出的机制涉及GADD45γ基因的上调，GADD45γ基因随后与CDC2激酶结合并抑制其活性，导致细胞周期蛋白B1/CDC2复合物解离，而该复合物对于G2/M期转换至关重要。 该研究表明，CuE可能是一种有前景的结直肠癌抗肿瘤药物。[1] |
| 分子式 |
C32H44O8
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|---|---|
| 分子量 |
556.6870
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| 精确质量 |
556.303
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| CAS号 |
18444-66-1
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| 相关CAS号 |
Cucurbitacin B;6199-67-3;Cucurbitacin I;2222-07-3
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| PubChem CID |
5281319
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
712.6±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
228-234ºC
|
| 闪点 |
224.4±26.4 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±5.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.579
|
| LogP |
3.15
|
| tPSA |
138.2
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
1270
|
| 定义原子立体中心数目 |
8
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| SMILES |
CC(=O)OC(C)(C)/C=C/C(=O)[C@@](C)([C@H]1[C@@H](C[C@@]2([C@@]1(CC(=O)[C@@]3([C@H]2CC=C4[C@H]3C=C(C(=O)C4(C)C)O)C)C)C)O)O
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| InChi Key |
NDYMQXYDSVBNLL-MUYMLXPFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C32H44O8/c1-17(33)40-27(2,3)13-12-23(36)32(9,39)25-21(35)15-29(6)22-11-10-18-19(14-20(34)26(38)28(18,4)5)31(22,8)24(37)16-30(25,29)7/h10,12-14,19,21-22,25,34-35,39H,11,15-16H2,1-9H3/b13-12+/t19-,21-,22+,25+,29+,30-,31+,32+/m1/s1
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| 化学名 |
[(E,6R)-6-[(8S,9R,10R,13R,14S,16R,17R)-2,16-dihydroxy-4,4,9,13,14-pentamethyl-3,11-dioxo-8,10,12,15,16,17-hexahydro-7H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-6-hydroxy-2-methyl-5-oxohept-3-en-2-yl] acetate
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| 别名 |
Cucurbitacin E; α-Elaterin; α-Elaterine
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~89.82 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (4.49 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7963 mL | 8.9817 mL | 17.9633 mL | |
| 5 mM | 0.3593 mL | 1.7963 mL | 3.5927 mL | |
| 10 mM | 0.1796 mL | 0.8982 mL | 1.7963 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Effect of cucurbitacins on adipogenesis.
CuE treatment improved insulin resistance in mice.PLoS One.2017 Jun 9;12(6):e0178910. |
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 Effect of cucurbitacin E on body fat content.
Determination of the effect of CuE on insulin signaling.PLoS One.2017 Jun 9;12(6):e0178910. |
 Effect of CuE on adipose tissue morphology and function.
Determination of the effect of CuE on JAK-STAT signaling.PLoS One.2017 Jun 9;12(6):e0178910. |
CMD178 TFA
JAK-IN-33
APTSTAT3-9R
JAK-IN-29
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COA
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