Factor Xa

第一种专门针对 Xa 因子的新型抗凝剂是磺达肝素钠。磺达肝素的 IC50 值（抗 Xa IU/ml）对于活化单核细胞 (ac-M) 为 0.59±0.05，对于 MMP（单核细胞衍生微粒）为 0.17±0.03 [2]。

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磺达肝癸钠、低分子量肝素和普通肝素对活化单核细胞支持的凝血酶生成的影响[2]
基线时获得的滞后时间值为2.1±0.1 min，峰值值为181±6 nmol/l，ETP值为1624±84 nmol/l min，心率指数值为59±4 nmol/l/min。磺达肝癸钠、依诺肝素和普通肝素以浓度依赖的方式抑制ac-M支持的凝血酶生成（图1）。除滞后时间外，普通肝素的抑制作用优于依诺肝素，依诺肝素在0.3至1.0抗Xa IU/ml之间优于磺达肝素。然而，在最低抗Xa浓度（0.1 IU/ml）下，磺达肝素和依诺肝素对峰值和ETP的抑制作用相当，在0.1 IU/ml抗Xa剂量下，磺达肝素对速率指数的抑制作用比依诺肝素更明显。

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IC50的计算[2]
通过计算抑制浓度（IC）50来评估对凝血酶生成的抑制作用，IC 50定义为峰值、ETP和速率指数为产生50%减少的药物浓度，滞后时间为导致其加倍的药物浓度。 在两种模型中，UFH是唯一一种对所有凝血酶生成参数计算IC50的药物。相比之下，在两种模型中，依诺肝素IC50值是针对ETP、峰值和速率指数计算的，而不是针对滞后时间计算的。此外，在两种模型中，仅对速率指数达到磺达肝癸钠的IC50，在MMP模型中仅对峰值和ETP达到IC50。速率指数是三种药物在两种模型中均达到IC50的唯一参数；普通肝素最有效，其次是依诺肝素和磺达肝癸钠（表1）。

磺达肝素钠的药代动力学是线性且剂量依赖性的，从而产生非常可预测的反应。磺达肝素钠起效快，半衰期为 14 至 16 小时，抗血栓活性可持续 24 小时，生物利用度为 100%。该药物对血小板功能或聚集、凝血酶原时间或活化部分凝血活酶时间没有影响[1]。

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与急性缺血性综合征组织评估策略（OASIS）-5亚研究中报告的体外抗Xa水平相比，我们的结果表明，患者体内获得的抗Xa值与我们用于达到速率指数IC50的体外模型中所需的值相似，甚至更高磺达肝癸钠在OASIS-5研究中，0.52（±0.22）IU/ml的抗Xa水平足以抑制所测试的两种体外模型中的速率指数。对于依诺肝素，在OASIS-5亚组研究患者中测得的抗Xa水平为1.2（±0.45）IU/ml，明显优于此处测试的两种凝血酶生成模型中抑制速率指数所需的抗-Xa浓度（ac-M IC50:0.27±0.03 IU/ml，MMPs IC50:0.19±0.02 IU/ml）

OASIS-5亚研究报告称，与依诺肝素相比，磺达肝癸钠治疗的患者对ETP的抑制作用较小。考虑到OASIS-5亚研究ETP是在无细胞测定中进行的，我们的体外ETP结果与这些数据一致磺达肝癸钠在两种模型中产生的抑制作用均低于依诺肝素，抗Xa浓度范围为0.3至1.0 IU/ml。尽管抗Xa水平升高，但磺达肝藜芦醇的ETP IC50值并不总是达到（磺达肝苷在0.1至1.0抗Xa IU/ml的浓度范围内进行测试），其ETP IC50仅在MMPs模型中达到。相比之下，依诺肝素在这里测试的两种体外模型中达到了ETP IC50。至于速率指数，OASIS-5依诺肝素治疗患者的抗凝水平远优于我们细胞模型中抑制ETP所需的水平。

Oasis-5研究中，每天2.5mg的磺达肝癸钠（相当于0.52±0.22IU/ml的抗Xa）显示出对ACS患者的最佳疗效安全性。磺达肝癸钠的抗Xa水平与ac-M模型的速率指数IC50和MMP模型的ETP IC50值相对应。在这种抗Xa浓度下，MMP模型中的速率指数受到抑制，ac-M模型中未达到ETP IC50。对于依诺肝素，ac-M模型中的速率指数IC50与MMP模型中的ETP IC50相似，接近0.3IU/ml。在这种抗Xa水平下，MMP模型中速率指数受到很大抑制，ac-M中ETP IC50未达到。鉴于此，假设依诺肝素的抗Xa水平约为0.3IU/ml就足以在急性冠状动脉综合征中达到最佳疗效安全性。应该指出的是，在这里分析的三种药物中，磺达肝癸钠是唯一一种合理确定每日剂量的药物，根据之前的剂量发现研究，使用2.5mg剂量就是证明[2]。

单核细胞激活[2]
纯化的单核细胞在RPMI-1640培养基中洗涤，然后在含有5%（v/v）热灭活胎牛血清、2 mmol/l l-谷氨酰胺和100 ng/ml LPS（大肠杆菌血清型O55:B5，Sigma）的RPMI-1640中调节至1.5 106个细胞/ml。单核细胞在37°C、5%CO2加湿的环境中孵育5小时后，通过400g离心5分钟去除上清液。将含ac-M的颗粒重新悬浮在150μl磷酸盐缓冲盐水中。

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单核细胞衍生微粒的制备和定量[2]
如上所述，将单核细胞孵育18小时，并通过在2200g下离心5分钟收集上清液。在17000g下额外离心30分钟后回收MMPs，并通过流式细胞术定量[5]。根据制造商的建议，将MMPs（100μl）与1μl膜联蛋白V-FITC在黑暗中孵育15分钟，然后加入400μl膜连蛋白V-结合缓冲液和100μl流计数荧光球。使用System 2软件在Epics XL-MCL流式细胞仪上采集荧光60秒。使用流计数荧光球对MMPs进行定量，并表示为MMPs/μl。

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凝血酶生成的荧光测量[2]
凝血酶生成试验根据Hemker描述并经Poitevin修改的测定法进行；ac-Ms和MMPs被定义为细胞模型。用于所有实验条件的PPP系统地补充了终浓度为200激肽释放酶抑制单位（KUI）/ml的抑肽酶。PPP中添加了浓度越来越高的磺达肝癸钠、低分子量肝素或普通肝素；最终浓度为0.0、0.1、0.3、0.6和1.0抗-FXa IU/ml。我们之前优化了检测中包含的ac-Ms和MMPs的浓度。因此，将20μl ac-M（每孔0.2×106ac-M）或MMPs（每孔160000 MMPs）添加到80μl PPP中。结果以百分比表示，基线测量值为100%。

在添加荧光底物Z-Gly-Gly-Arg-AMC后，在Fluoroskan Ascent平板读数器上进行凝血酶生成的荧光测定；用于计算凝血酶生成的凝血酶镜软件。分析了凝血酶生成曲线的四个参数：滞后时间（min）、凝血酶峰值（峰值，nmol/l）、内源性凝血酶电位（ETP，nmol/l-min）、由公式定义的增殖期速率指数：峰值/（达到峰值的时间-滞后时间）（速率指数，nmol/l/min）。

血小板贫乏血浆制备[2]
从五名健康志愿者（平均年龄 25 ± 2 岁）采集静脉血样本。志愿者均为实验室工作人员，且在过去两周内未服用任何药物。所有志愿者均签署了知情同意书。采用肘前静脉穿刺法采集血液至 Monovette 采血管（含 0.106 mol/L 柠檬酸盐）。采用三步离心法，分别为 190g 离心 10 分钟、1750g 离心 10 分钟和 13000g 离心 30 分钟。将血小板贫乏血浆 (PPP) 上清液混合，储存于 -80°C，并在使用前立即解冻。

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单核细胞纯化[2]
从六名在罗伯特·德布雷大学医院 (CHU Robert Debré) 输血科接受血小板捐献的健康志愿者处采集单核细胞分离术材料。所有参与者均签署了知情同意书。单核细胞按照先前描述的方法，通过离心分离法从细胞分离残余物中纯化。单核细胞纯度通过对分离的细胞进行CD14染色来评估（CD14阳性细胞比例>95%）。细胞活力（>98%）通过台盼蓝排除法测定。纯化的单核细胞用于制备ac-Ms和MMPs。

本文描述了磺达肝癸钠的药理学和作用机制。磺达肝癸钠是首个选择性靶向Xa因子的新型抗凝血药物。它具有线性剂量依赖性药代动力学特征，因此疗效高度可预测。该药生物利用度为100%，起效迅速，半衰期为14至16小时，可在24小时内持续发挥抗血栓作用。该药不影响凝血酶原时间或活化部分凝血活酶时间，也不影响血小板功能或聚集。在确诊为肝素诱导的血小板减少症的患者中进行的研究表明，该药与体外肝素抗体无交叉反应。磺达肝癸钠似乎符合理想抗血栓药物的标准：疗效与现有药物相当或更优，出血风险低，无需实验室监测，且每日一次给药。[1]

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
磺达肝癸钠被认为在哺乳期使用是可接受的。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

[1]. Fondaparinux sodium: a selective inhibitor of factor Xa. Am J Health Syst Pharm. 2001 Nov 1;58 Suppl 2:S14-7.

[2]. Differential coagulation inhibitory effect of fondaparinux, enoxaparin and unfractionated heparin in cell models of thrombin generation. Blood Coagul Fibrinolysis. 2011 Jul;22(5):369-73.

磺达肝癸钠是磺达肝癸钠的钠盐形式，磺达肝癸钠是一种具有抗血栓活性的合成葡萄糖苷。磺达肝癸钠选择性地与抗凝血酶III结合，从而增强抗凝血酶对活化因子X（因子Xa）的固有中和作用。因子Xa的中和作用抑制其活性并中断血液凝固级联反应，从而阻止凝血酶的形成和血栓的形成。(NCI05)
一种合成五糖，介导肝素与抗凝血酶的相互作用并抑制因子Xa；用于预防术后静脉血栓栓塞。
另见：磺达肝癸钠（具有活性部分）。

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药物适应症
1. 5毫克/0.3毫升和2. 5毫克/0. 5毫升注射液。用于预防接受下肢重大骨科手术（如髋关节骨折、膝关节大手术或髋关节置换术）的成年患者发生静脉血栓栓塞事件（VTE）。用于预防接受腹部手术且被认为有高危血栓栓塞并发症风险的成年患者（如接受腹部肿瘤手术的患者）发生VTE。用于预防因急性疾病（如心力衰竭和/或急性呼吸系统疾病和/或急性感染或炎症性疾病）而卧床休息且被认为有高危VTE风险的成年内科患者发生VTE。用于治疗无伴随深静脉血栓形成的成年急性症状性自发性下肢浅静脉血栓形成。2.5毫克/0. 5毫升注射液，用于治疗不适宜紧急（<120分钟）介入治疗（PCI）的成人不稳定型心绞痛或非ST段抬高型心肌梗死（UA/NSTEMI）。也用于治疗接受溶栓治疗或最初不接受其他形式再灌注治疗的成人ST段抬高型心肌梗死（STEMI）。5毫克/0.4毫升、7.5毫克/0.6毫升和10毫克/0.8毫升注射液，用于治疗成人急性深静脉血栓形成（DVT）和急性肺栓塞（PE），但不包括血流动力学不稳定的患者或需要溶栓或肺动脉血栓切除术的患者。
1.5毫克/0.3毫升和2.5毫克/0. 5毫升注射液：用于预防接受下肢重大骨科手术（如髋部骨折、膝关节大手术或髋关节置换术）患者的静脉血栓栓塞事件（VTE）。用于预防接受腹部手术且被认为有较高血栓栓塞并发症风险的患者（如接受腹部肿瘤手术的患者，参见第5.1节）的静脉血栓栓塞事件（VTE）。用于预防因急性疾病（如心力衰竭和/或急性呼吸系统疾病和/或急性感染或炎症性疾病）而卧床的、被认为有较高VTE风险的内科患者的静脉血栓栓塞事件（VTE）。，，2.5毫克/0. 5毫升注射液：用于治疗不适宜紧急（<120分钟）介入治疗（PCI）的不稳定型心绞痛或非ST段抬高型心肌梗死（UA/NSTEMI）患者（参见4.4节和5.1节）。用于治疗接受溶栓治疗或最初不接受其他形式再灌注治疗的ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者。5毫克/0.4毫升、7.5毫克/0.6毫升和10毫克/0.8毫升注射液：用于治疗急性深静脉血栓形成（DVT）和急性肺栓塞（PE），但不包括血流动力学不稳定的患者或需要溶栓或肺动脉血栓切除术的患者。

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抗凝剂，包括普通肝素（UFH）、依诺肝素和磺达肝癸钠，是急性冠脉综合征（ACS）的获批药物。单核细胞和单核细胞衍生的微粒（MMPs）在ACS中发挥重要的促凝作用，它们表达高水平的组织因子（TF），进而触发凝血酶的生成。本研究旨在比较UFH、依诺肝素和磺达肝癸钠在单核细胞和MMP模型中的体外抑制作用。将人单核细胞经脂多糖激活5小时和18小时，分别获得活化单核细胞（ac-M）和MMPs。将ac-M或MMPs与含有不同浓度抗凝剂的贫血小板血浆混合，评估其对凝血酶生成的抑制作用。凝血酶生成抑制呈剂量依赖性，且不同药物的抑制效果存在差异：UFH 的抑制效果最强，磺达肝癸钠的抑制效果最弱。速率指数是最敏感的参数。磺达肝癸钠的 IC50 值（抗 Xa IU/ml）在 ac-M 中为 0.59±0.05，在 MMPs 中为 0.17±0.03。依诺肝素的速率指数 IC50 值在 ac-M 中为 0.27±0.03，在 MMPs 中为 0.19±0.02。我们的数据支持以下观点：细胞诱导凝血酶生成试验可能是确定患者抗凝水平的可靠替代方法，可替代抗 Xa 评估。[2]

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总之，我们的研究表明，三种获批用于 ACS 的抗凝剂具有不同的抑制作用，该评估采用细胞诱导凝血酶生成模型进行。我们的研究结果支持OASIS-5子研究得出的结论，即应考虑降低抗凝水平。我们的研究结果清楚地表明，使用抗Xa因子活性测定来评估抗凝分子的作用存在局限性。凝血酶生成试验是一种信息丰富且灵敏的检测方法，尽管标准化工作正在进行中，但目前仍难以实现标准化。凝血酶生成试验可用于评估新型抗凝药物的药效学作用。此外，凝血酶生成试验还可以作为评估I期和II期临床试验中所需达到的抗凝水平的有效工具。[2]

C31H43N3NA10O49S8

1728.0815

1726.77

C, 21.55; H, 2.51; N, 2.43; Na, 13.30; O, 45.37; S, 14.84

114870-03-0

104993-28-4;114870-03-0 (sodium);

636380

White to off-white solid powder

900.82

9

52

20

101

3330

25

CO[C@@H]1[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O1)COS(=O)(=O)[O-])O[C@H]2[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@@H](O2)C(=O)[O-])O[C@@H]3[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O3)COS(=O)(=O)[O-])O[C@H]4[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O4)C(=O)[O-])O[C@@H]5[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O5)COS(=O)(=O)[O-])O)O)NS(=O)(=O)[O-])O)O)OS(=O)(=O)[O-])NS(=O)(=O)[O-])O)OS(=O)(=O)[O-])O)NS(=O)(=O)[O-].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+]

XEKSTYNIJLDDAZ-JASSWCPGSA-D

InChI=1S/C31H53N3O49S8.10Na/c1-69-27-9(33-85(48,49)50)13(37)17(6(74-27)3-71-88(57,58)59)76-31-22(83-91(66,67)68)16(40)21(24(81-31)26(43)44)79-29-10(34-86(51,52)53)19(82-90(63,64)65)18(7(75-29)4-72-89(60,61)62)77-30-15(39)14(38)20(23(80-30)25(41)42)78-28-8(32-84(45,46)47)12(36)11(35)5(73-28)2-70-87(54,55)56;;;;;;;;;;/h5-24,27-40H,2-4H2,1H3,(H,41,42)(H,43,44)(H,45,46,47)(H,48,49,50)(H,51,52,53)(H,54,55,56)(H,57,58,59)(H,60,61,62)(H,63,64,65)(H,66,67,68);;;;;;;;;;/q;10*+1/p-10/t5-,6-,7-,8-,9-,10-,11-,12-,13-,14-,15-,16+,17-,18-,19-,20+,21+,22-,23+,24-,27+,28-,29-,30-,31-;;;;;;;;;;/m1........../s1

decasodium;(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5R,6R)-6-[(2R,3S,4S,5R,6R)-2-carboxylato-4-hydroxy-6-[(2R,3S,4R,5R,6S)-4-hydroxy-6-methoxy-5-(sulfonatoamino)-2-(sulfonatooxymethyl)oxan-3-yl]oxy-5-sulfonatooxyoxan-3-yl]oxy-5-(sulfonatoamino)-4-sulfonatooxy-2-(sulfonatooxymethyl)oxan-3-yl]oxy-3-[(2R,3R,4R,5S,6R)-4,5-dihydroxy-3-(sulfonatoamino)-6-(sulfonatooxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxane-2-carboxylate

Fondaparinux sodium; 114870-03-0; Arixtra; Quixidar; Fondaparin sodium; Xantidar; Fondaparinux sodium for assay; SR 90107A;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~125 mg/mL (~72.33 mM)

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (57.87 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。