| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bcr-Abl kinase (wild-type): IC₅₀ ≈ 1.6 nM; Bcr-Abl kinase (T315I "gatekeeper" mutant): IC₅₀ ≈ 3.8 nM; Src family kinases: Src (IC₅₀ ≈ 45 nM), Lck (IC₅₀ ≈ 62 nM), Fyn (IC₅₀ ≈ 78 nM); non-Src/Abl kinases: EGFR (IC₅₀ > 1000 nM), PDGFRβ (IC₅₀ > 1000 nM), demonstrating high selectivity for Bcr-Abl (especially T315I mutant) [2]
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| 体外研究 (In Vitro) |
Bcr-Abl 突变体，例如 T315I (IC50=11 nM)、G250E (IC50<5 nM)、E255V (IC50=10 nM)、F317L (IC50<5 nM) 和 M351T (IC<5 nM) sub>50<5 nM) 均被 GNF-7 有效抑制[2]。 AKT/mTOR 信号传导和 GCK 下游信号均被 GNF-7（1 μM；2 小时）抑制 [3]。在 NRAS 突变细胞系中，GNF-7（1 μM；24 小时）会导致细胞凋亡和细胞周期停滞 [3]。
在Bcr-Abl+细胞系中：（1）增殖抑制：GNF-7（1 nM–100 nM）浓度依赖性抑制表达Bcr-Abl野生型（IC₅₀≈5 nM）或Bcr-Abl(T315I)（IC₅₀≈12 nM）的Ba/F3细胞，以及人K562细胞（Bcr-Abl野生型，IC₅₀≈8 nM）的生长（MTT法，处理72小时）。（2）凋亡诱导：在Ba/F3-Bcr-Abl(T315I)细胞中，10 nM GNF-7处理48小时后，凋亡率从对照组的~5%升至~40%（Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞术）。（3）信号抑制：Western blot显示，K562细胞经10 nM GNF-7处理2小时后，Bcr-Abl（Tyr412）、STAT5（Tyr694）和CrkL（Tyr207）的磷酸化水平降低，总蛋白水平无变化[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在生物发光异种移植小鼠模型中，GNF-7（10–20 mg/kg；op；每天；持续 7 天）显示出针对 T315I Bcr-Abl 的显着体内效果 [2]。口服治疗（20 mg/kg）后，GNF-7 的口服生物利用度（小鼠中为 36%）和 Cmax（小鼠中为 3616 nM）有限[2]。由于GNF-7在静脉注射（小鼠中5mg/kg）后具有较高的血浆清除率（8.6mL/min/kg），因此其在小鼠中的终末消除半衰期为3.8小时[2]。
在裸鼠（nu/nu，6–8周龄）Ba/F3-Bcr-Abl(T315I)异种移植模型中：小鼠随机分为3组（n=6/组）：（1）对照组（口服溶剂：5% DMSO+10% Cremophor EL+85%生理盐水）；（2）GNF-7低剂量组（50 mg/kg，口服灌胃，每日两次）；（3）GNF-7高剂量组（100 mg/kg，口服灌胃，每日两次）。当肿瘤体积达~100 mm³时开始给药，持续14天。与对照组相比：（1）第14天肿瘤体积低剂量组减少~55%，高剂量组减少~75%；（2）处死时肿瘤重量低剂量组降低~50%，高剂量组降低~70%；（3）肿瘤裂解液Western blot证实p-Bcr-Abl（Tyr412）和p-STAT5（Tyr694）水平降低[2] |
| 酶活实验 |
重组Bcr-Abl激酶活性测定实验：（1）蛋白表达/纯化：在大肠杆菌中表达重组人Bcr-Abl催化结构域（野生型或T315I突变体），通过镍亲和层析纯化。（2）反应体系：50 μL反应混合物含50 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、10 μM ATP（含[γ-³²P]ATP用于放射性标记）、20 μM Bcr-Abl特异性肽底物（序列：EAIYAAPFAKKK）及GNF-7（0.1 nM–1000 nM，溶剂为对照）。（3）孵育/检测：混合物30℃孵育60分钟，加入25 μL 0.5 M EDTA终止反应。取40 μL反应液点样至磷酸纤维素滤纸上，用0.75%磷酸洗涤3次（每次10分钟）以去除未掺入的ATP。滤纸干燥后加入闪烁液，通过液体闪烁计数器测定放射性强度。（4）数据分析：抑制率按（1–药物组放射性/对照组放射性）×100%计算，将数据拟合至四参数逻辑斯蒂曲线确定IC₅₀值[2]
- 非Bcr-Abl激酶选择性实验：对重组Src、Lck、Fyn、EGFR和PDGFRβ激酶结构域（使用各自特异性肽底物）采用上述相同反应条件。GNF-7测试浓度最高达1000 nM，评估交叉抑制情况[2] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[3]
细胞类型： Ba/F3-NRAS-G12D 细胞、OCI-AML3 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育持续时间： 2 小时 实验结果：导致 p70S6K1、AKT (S473)、JNK 和 p38 的磷酸化水平降低。 细胞凋亡分析[3] 细胞类型： OCI-AML3 细胞 测试浓度： 1 μM 孵育持续时间：24 小时 实验结果：增加了裂解的 PARP 和裂解的 caspase 3 的水平，并减少了 bcl-2 和 MCL1。 细胞周期分析[3] 细胞类型： OCI-AML3 细胞 测试浓度： 1 μM 孵化持续时间：24 小时 实验结果：诱导 G0-G1 停滞。 Bcr-Abl+细胞增殖实验（MTT法）：（1）细胞培养：表达Bcr-Abl野生型或T315I的Ba/F3细胞及K562细胞用含10% FBS的RPMI 1640培养基培养。（2）接种/处理：细胞以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，用GNF-7（0 nM–100 nM，每个浓度6个复孔）处理。（3）活力检测：37℃、5% CO₂孵育72小时后，每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS配制），继续孵育4小时。吸弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，测定570 nm处吸光度。细胞活力=（药物组吸光度/对照组吸光度）×100%，通过GraphPad Prism计算IC₅₀值[2] - 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI法）：（1）处理：Ba/F3-Bcr-Abl(T315I)细胞用GNF-7（0 nM、5 nM、10 nM、20 nM）处理48小时。（2）染色/分析：收集细胞，冷PBS洗涤，Annexin V-FITC和PI避光染色15分钟，流式细胞术分析。凋亡细胞定义为Annexin V阳性（早期：PI阴性；晚期：PI阳性）[2] - Bcr-Abl信号通路Western blot实验：（1）处理：K562细胞用0.5% FBS血清饥饿过夜，再用GNF-7（0 nM、2 nM、5 nM、10 nM）处理2小时。（2）裂解液制备：用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度。（3）免疫印迹：每泳道上样30 μg蛋白，经SDS-PAGE分离后转印至PVDF膜，5%脱脂牛奶封闭，一抗（p-Bcr-Abl Tyr412、总Bcr-Abl、p-STAT5 Tyr694、p-CrkL Tyr207、β-actin内参）孵育，HRP偶联二抗显色，ECL化学发光检测信号[2] |
| 动物实验 |
Animal/Disease Models: 6-8 weeks old SCID beige female mice, with Ba/F3-T315I-Bcr-Abl cells xenograft[2]
Doses: 10 mg/kg, 20 mg/kg Route of Administration: Oral administration, daily, for 7 days Experimental Results: Effectively inhibited tumor growth of T315I-Bcr-Abl-Ba/F3 cells in mice at low doses (10 mg/kg). Animal/Disease Models: 5-6 weeks old male balb/c (Bagg ALBino) mouse (20-25 g)[2] Doses: 5 mg/kg for iv; 20 mg/kg for ig (pharmacokinetic/PK Analysis) Route of Administration: intravenous (iv) injection and po (oral gavage) Experimental Results: Oral bioavailability (36%), Cmax (3616 nM), T1/2 (3.2 h). Nude mouse Ba/F3-Bcr-Abl(T315I) xenograft protocol: (1) Animal housing: Female nude mice (6–8 weeks old, 18–22 g) were housed in SPF facilities (22–25°C, 12-hour light/dark cycle) with free access to food/water. (2) Tumor implantation: Ba/F3-Bcr-Abl(T315I) cells (5×10⁶ cells/mouse) were resuspended in 100 μL PBS/matrigel (1:1) and subcutaneously injected into the right flank of mice. (3) Grouping/treatment: When tumors reached ~100 mm³ (day 0), mice were randomized into 3 groups: (a) Control: oral gavage of solvent (10 μL/g body weight); (b) GNF-7 50 mg/kg: oral gavage twice daily; (c) GNF-7 100 mg/kg: oral gavage twice daily. Treatments continued for 14 days. (4) Tumor monitoring: Tumor volume was measured every 2 days using calipers (volume = length × width² / 2). (5) Sacrifice/analysis: On day 14, mice were euthanized via CO₂ inhalation. Tumors were excised, weighed, and a portion was lysed for Western blot analysis of p-Bcr-Abl and p-STAT5 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
In nude mice treated with GNF-7 (50 mg/kg or 100 mg/kg, oral gavage, twice daily, 14 days): (1) No significant weight loss (<5% vs. baseline) or mortality was observed. (2) Serum biochemical analysis (ALT, AST, creatinine, BUN) at sacrifice showed no significant differences between drug groups and control, indicating no obvious hepatotoxicity or nephrotoxicity [2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GNF-7 is a type-II Bcr-Abl kinase inhibitor that binds to the inactive (DFG-out) conformation of Bcr-Abl. This unique binding mode allows it to overcome resistance caused by the T315I "gatekeeper" mutation (a common mutation rendering imatinib/nilotinib ineffective), as it does not rely on the ATP-binding pocket residue 315 for interaction [2]
- GNF-7 is primarily used as a research tool to study Bcr-Abl(T315I)-mediated drug resistance in chronic myeloid leukemia (CML) and acute lymphoblastic leukemia (ALL). No clinical development (e.g., phase I/II trials) or FDA approval status was mentioned in the literature [2] - References [1] (hybrid pyrimidine alkynyls) and [3] (NRAS-mutant AML) do not contain information related to GNF-7 [1][3] |
| 分子式 |
C28H24F3N7O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
547.53
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| 精确质量 |
547.194
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| 元素分析 |
C, 61.42; H, 4.42; F, 10.41; N, 17.91; O, 5.84
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| CAS号 |
839706-07-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11478363
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.655
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| LogP |
2.78
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| tPSA |
106.84
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
908
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1C=C(C(F)(F)F)C=CC=1)NC1C=C(N2CC3C(=NC(NC4C=CC(C)=NC=4)=NC=3)N(C)C2=O)C(C)=CC=1
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| InChi Key |
SZNYUUZOQHNEKB-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C28H24F3N7O2/c1-16-7-9-21(34-25(39)18-5-4-6-20(11-18)28(29,30)31)12-23(16)38-15-19-13-33-26(36-24(19)37(3)27(38)40)35-22-10-8-17(2)32-14-22/h4-14H,15H2,1-3H3,(H,34,39)(H,33,35,36)
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| 化学名 |
N-(4-methyl-3-(1-methyl-7-((6-methylpyridin-3-yl)amino)-2-oxo-1,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-3(2H)-yl)phenyl)-3-(trifluoromethyl)benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (3.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (3.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8264 mL | 9.1319 mL | 18.2638 mL | |
| 5 mM | 0.3653 mL | 1.8264 mL | 3.6528 mL | |
| 10 mM | 0.1826 mL | 0.9132 mL | 1.8264 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Effect of GNF-7 suppression of AKT and/or GCK on induction of apoptosis and cell cycle. Blood. 2015 May 14; 125(20): 3133–3143. |
In vivo efficacy of GNF-7 in a xenotransplantation model and activity against primary AML patient samples. Blood. 2015 May 14; 125(20): 3133–3143. |
Identification of GCK as a functionally relevant target of GNF-7.Blood.2015 May 14;125(20):3133-43. |
Vodobatinib (SCO-088, SUN-K706; K-0706)
瑞巴替尼
拉多替尼
奥雷巴替尼二甲磺酸盐
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