| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Bcr-Abl1 tyrosine kinase (IC50 = 7 nM)
Vodobatinib targets the Bcr-Abl1 fusion oncoprotein, a constitutively active tyrosine kinase that drives the proliferation of leukemic cells in CML. The compound is a third-generation TKI that binds to the ATP-binding site of Bcr-Abl1, inhibiting its kinase activity. Vodobatinib exhibits activity against most clinically important BCR-ABL1 point mutants, including those associated with resistance to first- and second-generation TKIs. However, the compound has no activity against the T315I mutation, which is a common resistance mutation in CML. Vodobatinib's selectivity for Bcr-Abl1 over other kinases contributes to its favorable safety profile. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在用沃多巴替尼（K0706；0-2000 nM）处理后，表达 BCR-ABL1、BCR-ABL1L248V、BCR-ABL1Y253H 或 BCR-ABL1E255V 的 Ba/F3 细胞中 BCR-ABL1 酪氨酸自磷酸化受到显著抑制[1]。体外实验表明，沃多巴替尼对野生型 BCR-ABL1 具有强效抑制作用，IC50 为 7 nM。该化合物对大多数具有临床意义的 BCR-ABL1 点突变体均有活性，包括 M244V（IC50 = 22 nM）、L248R（IC50 = 167 nM）、Y253H（IC50 = 154 nM）和 E255V（IC50 = 165 nM）。 Vodobatinib 对 BCR-ABL1 T315I 没有活性。该化合物对多种 BCR-ABL1 突变体均有活性，因此对于对第一代和第二代 TKI 耐药的 CML 患者来说，它是一种很有前景的治疗方法。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
截至 2020 年 7 月 15 日，31 例慢性期慢性粒细胞白血病 (CP-CML) 患者接受了沃多巴替尼治疗，剂量为 12 至 240 mg；其中 16 例患者（9 例男性）为既往接受过帕纳替尼治疗 (PT) 的患者 [7 例 (44%) 帕纳替尼是其近期接受的酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) ]，15 例患者（7 例男性）为未接受过帕纳替尼治疗 (PN) 的患者。基线人口统计学特征和疾病史见表 1。[2]
疗效：帕纳替尼治疗组和未接受过帕纳替尼治疗组的中位治疗持续时间分别为 17.3 (0.6-36) 个月和 14.8 (0.5-42) 个月；PT 组有 11 例患者达到深度分子学缓解 (DMR) [2 例达到主要分子学缓解 (MMR)，3 例达到主要细胞遗传学缓解 (MCyR)；5 例达到主要细胞遗传学缓解 (MCyR)（其中 2 例达到完全细胞遗传学缓解 (CCyR)，3 例达到部分细胞遗传学缓解 (PCyR)）； 16例PT组患者中有1例病情稳定]，PN组有10例患者（2例达到DMR，4例达到MMR，3例达到CCyR，1例病情稳定）仍在继续治疗。总体疗效结果见表2和表3。[2] 16例PT组患者中有2例（13%）出现疾病进展，这两例患者均携带双突变。15例PN组患者中有4例（26%）出现疾病进展（基线突变分别为：48 mg剂量组携带T315I突变，66 mg剂量组携带Y253H突变，174 mg剂量组携带F317L和E255V突变）。[2] 体内研究表明，沃多巴替尼在慢性粒细胞白血病（CML）的临床前模型中具有抗肿瘤活性。该化合物可口服，并在BCR-ABL1驱动的白血病动物模型中进行了评估。 Vodobatinib 能够抑制野生型和突变型 BCR-ABL1，这表明它可能对其他 TKI 治疗失败的 CML 患者有效。 |
| 酶活实验 |
BCR-ABL1激酶结构域的Sanger测序[1]
从表达BCR-ABL1的Ba/F3细胞裂解液中分离的DNA用作BCR-ABL1激酶结构域扩增的模板。扩增（使用Phusion高保真DNA聚合酶）采用两步PCR法，以排除内源性ABL1。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳验证扩增，纯化后进行Sanger测序。 使用生化激酶活性测定法评估Vodobatinib对BCR-ABL1的抑制作用。将重组BCR-ABL1（野生型或突变型）与测试化合物、ATP和肽底物孵育；使用HTRF或发光法检测底物的磷酸化。IC50值由剂量反应曲线计算得出。通过筛选一系列激酶来评估沃多巴替尼对 BCR-ABL1 相对于其他激酶的选择性。这些检测提供了关于沃多巴替尼效力和选择性的定量信息。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖IC50测定[1]
将IL-3依赖性小鼠Ba/F3细胞培养于添加了10%胎牛血清、1%青霉素/链霉素、1% L-谷氨酰胺和来自WEHI条件培养基的IL-3的RPMI-1640完全培养基中，并用表达p210 BCR-ABL1的逆转录病毒（MSCV-IRES-GFP）感染。通过去除IL-3筛选感染细胞。使用定点诱变（QuikChange II XL定点诱变试剂盒）引入临床相关的BCR-ABL1点突变。逆转录病毒的制备方法为：用磷酸钙转染293FT细胞并收集上清液。将Ba/F3 BCR-ABL1和BCR-ABL1突变体细胞接种于96孔板（2×10³个细胞/孔），并与指定的抑制剂孵育72小时。抑制剂浓度：K0706、尼洛替尼、达沙替尼、博舒替尼和帕纳替尼（0、4.9、9.8、19.5、39.1、78.1、156.3、315.5、625、1250、2500 和 5000 nmol/L）；对原始筛选中敏感细胞系（IC50 ≤ 3）进行复测，浓度为（0、0.2、0.4、0.8、1.6、3.1、6.3、12.5、25、50、10 和 200 nmol/L）。采用甲硫代磺酸酯 (MTS) 法测定细胞增殖（CellTiter 96 AQueous One Solution，Promega）。IC50 值取自三次独立实验（每次实验重复四次）的平均值。 BCR-ABL1 酪氨酸磷酸化免疫印迹分析 [1] 将表达天然型和突变型 BCR-ABL1 的 Ba/F3 细胞接种于 24 孔板（2×10⁶ 个细胞/孔），并在含有不同浓度 TKI（0、15.6、32.3、62.5、125、250、500、1000 和 2000 nmol/L）的 1 mL RPMI 完全培养基中培养 4 小时。用冰冷的 PBS 洗涤细胞，并在冰上用含有磷酸酶和蛋白酶抑制剂混合物的 M-PER（哺乳动物蛋白提取试剂）裂解 10 分钟。将样品用添加了 2-巯基乙醇的 SDS-PAGE 上样缓冲液（2× Laemmli 样品缓冲液）以 1:1 的比例稀释，并在 95°C 下煮沸 10 分钟进行变性。将裂解物在 4-20% Tris-甘氨酸（Mini-PROTEAN TGX）梯度凝胶上分离，转移并用抗 c-Abl（Ab-3）小鼠 mAb（24-21）、抗磷酸化 c-Abl（Tyr204）（C42B5）兔 mAb 和抗 β-肌动蛋白（D6A8）兔 mAb 进行免疫印迹。 基于细胞的耐药性检测[1] 将表达天然BCR-ABL1的Ba/F3细胞用N-乙基-N-亚硝基脲（ENU，50 μg/mL）处理过夜，离心沉淀后，重悬于新鲜的RPMI完全培养基中，并以1.25×10⁵个细胞/孔的密度接种于96孔板中，每孔加入不同浓度的K0706（400、800、1600和3200 nmol/L），每个浓度设置5个复孔。ENU用硫代硫酸钠（20% w/v）和氢氧化钠（100 mmol/L）处理过夜以使其失活，并按照实验方案安全处置。每两天用显微镜观察孔中细胞的生长情况，持续30天。从每个处理组中随机选取50个克隆，并在含有与原96孔板相同浓度K0706的24孔板中进行扩增。通过离心收集24孔板中的扩增细胞，并储存于-80°C。 在培养的CML细胞系（例如K562、KU812）和表达各种BCR-ABL1突变体的Ba/F3细胞中测试了沃多巴替尼的作用。用不同浓度的沃多巴替尼处理细胞；通过MTT或CellTiter-Glo法评估细胞增殖；使用磷酸化特异性抗体通过Western blot评估BCR-ABL1磷酸化；通过Annexin V染色评估细胞凋亡。这些基于细胞的实验证明了沃多巴替尼的作用机制和抗增殖活性。 |
| 动物实验 |
本研究采用3+3设计，评估了沃多巴替尼（每日一次）在28天周期内多次递增剂量的疗效。主要目标是确定最大耐受剂量（MTD）或II期推荐剂量（RP2D）及其安全性，次要目标是评估其抗白血病活性。剂量递增方案为剂量加倍，直至队列中2例患者出现2级毒性反应，或1例患者出现3级或4级毒性反应，之后剂量递增幅度减至40%。治疗持续至出现不可接受的毒性反应、疾病进展（PD）、患者撤回知情同意或死亡。[2]沃多巴替尼已在慢性粒细胞白血病（CML）动物模型中进行评估。在这些模型中，沃多巴替尼以不同剂量口服给药；通过测量肿瘤体积或白血病负荷来评估肿瘤生长抑制情况；并在肿瘤组织中评估BCR-ABL1磷酸化及其下游信号通路。这些体内研究为沃多巴替尼的疗效提供了证据。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
药代动力学研究表明，沃多巴替尼具有口服活性。该化合物具有良好的口服生物利用度和药代动力学特性，支持每日一次口服给药。沃多巴替尼的药代动力学特征已在临床前研究中得到表征。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在接受帕那替尼治疗的患者中，最常见的治疗干预相关不良事件（TEAE）（所有级别）包括恶心（4例，25%）和腹泻（3例，25%）。其他常见的TEAE包括血小板减少症（3例，19%）、皮疹（3例，19%）、非心脏性胸痛（3例，19%）、淀粉酶升高（3例，19%）和跌倒（3例，19%）。10例患者（63%）报告了≥3级的TEAE，包括贫血、淋巴细胞减少症、跌倒、颅骨骨折、脊柱骨折、脂肪酶升高、体液超负荷、晕厥、呼吸困难和高血压各1例。伏多巴替尼相关不良事件包括淀粉酶升高、脂肪酶升高、呼吸困难、体液超负荷、血小板减少症和中性粒细胞减少症。治疗期间报告的≥3级不良事件（发生率超过1例）包括中性粒细胞减少症（2例，13%）、淀粉酶升高（2例，13%）和血小板减少症（2例，13%）。[2] 在PN患者中，治疗期间最常报告的不良事件（所有级别）包括肌痛（5例，33%）和背痛（4例，27%）。其他常见不良事件包括血小板减少症（4例，27%）和鼻咽炎（3例，20%）。 7 例（47%）患者在治疗期间报告了 ≥3 级不良事件（TEAE）（1 例贫血、1 例肺炎、1 例中性粒细胞减少症、1 例痛风、1 例低钾血症、1 例血小板减少症、1 例肝酶和胰酶升高、1 例痴呆和 1 例遗忘症）。与沃多巴替尼相关的 AE 包括丙氨酸氨基转移酶升高、胆红素升高、遗忘症、中性粒细胞减少症和血小板减少症。没有 ≥3 级不良事件在超过 1 例患者中报告。[2] 总体而言，2 例患者报告了 3 例心血管 TEAE（PT 组 1 例，PN 组 1 例），所有这些事件均被认为与沃多巴替尼无关。研究期间有 3 例患者死亡：PT 组 1 例死于疾病进展；1 例死于肺炎（疑似 COVID-19）；其中一例患者死于……PN组发生了颅内出血。该颅内出血事件（5级不良事件）被认为可能与疾病进展至髓外急变有关，并受髓外病变进展的影响。在最高剂量240 mg下报告了两例剂量限制性毒性。下一个较低剂量水平204 mg被确定为最大耐受剂量（MTD），并且在既往接受过广泛治疗的慢性期慢性粒细胞白血病（CP-CML）患者中耐受性良好。[2]
沃多巴替尼的毒性特征与其他TKI一致。TKI的常见不良反应包括胃肠道紊乱、疲乏和血液学异常。沃多巴替尼的安全性正在临床试验中进行评估。 |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
沃多巴替尼是一种口服生物利用度高的Bcr-Abl酪氨酸激酶抑制剂（TKI），具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，沃多巴替尼选择性地靶向并结合Bcr-Abl融合癌蛋白，包括各种Bcr-Abl突变体，例如携带“守门员”耐药突变T315I的突变体。这抑制了表达Bcr-Abl的肿瘤细胞的增殖。Bcr-Abl融合蛋白是由某些白血病细胞产生的一种异常激活的酪氨酸激酶。T315I是Bcr-Abl融合蛋白酪氨酸激酶ABL1部分第315位氨基酸的替换，其中苏氨酸（T）突变为异亮氨酸（I）。它在对某些化疗药物产生耐药性方面起着至关重要的作用，其表达与不良预后相关。
沃多巴替尼（K-0706、SCO-088、SUN-K706）是一种强效的第三代口服活性Bcr-Abl1酪氨酸激酶抑制剂，IC50为7 nM。该化合物对大多数具有临床意义的BCR-ABL1点突变体均有活性，包括M244V、L248R、Y253H和E255V，但对BCR-ABL1 T315I无活性。沃多巴替尼正在开发用于治疗慢性粒细胞白血病，尤其适用于对第一代和第二代TKI产生耐药性的患者。该化合物代表了一种有前景的CML新疗法，有望对多种BCR-ABL1突变体有效。 |
| 分子式 |
C27H20CLN3O2
|
|---|---|
| 分子量 |
453.919605255127
|
| 精确质量 |
453.124
|
| 元素分析 |
C, 71.44; H, 4.44; Cl, 7.81; N, 9.26; O, 7.05
|
| CAS号 |
1388803-90-4
|
| PubChem CID |
89884852
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
748.6±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
406.5±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.701
|
| LogP |
5.73
|
| tPSA |
71.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
33
|
| 分子复杂度/Complexity |
774
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1=CC=CC(C)=C1C(NNC(C1C=CC(C)=C(C#CC2=CN=C3C=CC=CC3=C2)C=1)=O)=O
|
| InChi Key |
ZQOBVMHBVWNVBG-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C27H20ClN3O2/c1-17-10-12-22(26(32)30-31-27(33)25-18(2)6-5-8-23(25)28)15-20(17)13-11-19-14-21-7-3-4-9-24(21)29-16-19/h3-10,12,14-16H,1-2H3,(H,30,32)(H,31,33)
|
| 化学名 |
2-chloro-6-methyl-N'-[4-methyl-3-(2-quinolin-3-ylethynyl)benzoyl]benzohydrazide
|
| 别名 |
Vodobatinib; K-0706; K0706; SCO-088; K0706; Vodobatinib [USAN]; K-0706; N8Q12KU2SW; 2-Chloro-6-methyl-N'-(4-methyl-3-(quinolin-3-ylethynyl)benzoyl)benzohydrazide; K0706;
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~125 mg/mL (~275.38 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.58 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2030 mL | 11.0152 mL | 22.0303 mL | |
| 5 mM | 0.4406 mL | 2.2030 mL | 4.4061 mL | |
| 10 mM | 0.2203 mL | 1.1015 mL | 2.2030 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
