| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
20S proteasome (Ki = 0.93 nM); 20S proteasome (IC50 = 3.4 nM)
26S proteasome (chymotrypsin-like activity, β5 subunit, catalytic subunit): - In vitro inhibition (recombinant human 26S proteasome): IC₅₀ ≈ 3.4 nM (active form MLN2238, Ixazomib citrate is a prodrug converted to MLN2238 in vivo/in vitro) [1] - Selectivity over other proteasome subunits: β1 subunit (caspase-like activity) IC₅₀ ≈ 340 nM, β2 subunit (trypsin-like activity) IC₅₀ ≈ 880 nM, showing >100-fold selectivity for β5 subunit [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
MLN9708 是一种选择性、口服生物可利用的第二代蛋白酶体抑制剂。与硼替佐米相比，MLN9708的蛋白酶体解离半衰期更短，药代动力学、药效学和抗肿瘤活性得到改善，我们认为这对其改善组织分布起着重要作用。 MLN9708在稳态下具有更大的血容量分布，对20S蛋白酶体抑制和未折叠蛋白反应标记物的分析证实MLN9708在组织中比硼替佐米具有更大的药效作用。 MLN9708 是第二代小分子蛋白酶体抑制剂，正在开发用于治疗多种人类恶性肿瘤。暴露于水溶液或血浆后，MLN9708 迅速水解为其生物活性形式 MLN2238。 MLN2238 是 MLN9708 的生物活性形式。激酶测定：Calu-6 细胞在含有 10% 胎牛血清和 1% 青霉素/链霉素的 MEM 中培养，并在实验开始前 1 天以每孔 1 × 104 个细胞接种到 384 孔板中。根据制造商的说明，使用 Proteasome-Glo 测定试剂，通过监测胰凝乳蛋白酶样底物 Suc-LLVY-氨基荧光素在荧光素酶存在下的水解来评估蛋白酶体活性。使用 LEADseeker 仪器测量发光。细胞测定：Calu-6 细胞在含有 10% FBS 和 1% 青霉素/链霉素的 MEM 中培养，并在实验开始前 1 天以每孔 1 × 104 个细胞接种到 384 孔板中。对于 IC50 测定，细胞用不同浓度的 Bortezomib 或 MLN2238 的 DMSO（最终浓度为 0.5%，v/v）在 37 °C 下处理 1 小时。对于可逆性实验，将细胞用 1 μM Bortezomib 或 MLN2238 在 37 °C 下处理 30 分钟，然后在培养基中洗涤三次以去除 Bortezomib 或 MLN2238。将细胞在 37°C 下再孵育 4 小时，然后除去培养基并更换为新鲜培养基。
多发性骨髓瘤（MM）细胞抗增殖活性（文献[1]、[2]）: 1. MM细胞系（RPMI 8226、MM.1S、U266、OPM-2）：Ixazomib citrate（0.1 nM–100 nM，72小时MTT法）浓度依赖性抑制增殖。基于活性形式MLN2238的IC₅₀：RPMI 8226约5 nM，MM.1S约4.2 nM，U266约6.5 nM，OPM-2约5.8 nM。20 nM浓度下，RPMI 8226细胞活力较溶剂对照组降低~75%[1] 2. 硼替佐米耐药MM细胞（RPMI 8226/BtzR）：IC₅₀≈8.3 nM（72小时MTT法），表明对硼替佐米难治性细胞有效[2] - 凋亡诱导: 1. RPMI 8226细胞：15 nM Ixazomib citrate处理48小时后，凋亡率从对照组的~4%升至~42%（Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞术）。Western blot显示活化caspase-3（上调3.2倍）和活化PARP（上调2.8倍）[1] - NF-κB通路抑制: 1. MM.1S细胞：10 nM Ixazomib citrate（处理24小时）阻断TNF-α诱导的NF-κB激活。Western blot显示，因蛋白酶体降解减少，IκBα蛋白积累（上调4.5倍）；免疫荧光染色显示核内p65（NF-κB亚基）转位减少~60%[1] - 对正常细胞的选择性: 1. 正常人骨髓基质细胞（BMSCs）：50 nM Ixazomib citrate（处理72小时）活力降低<12%，而相同浓度下MM.1S细胞活力降低~65%[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
当通过多种给药途径和方案给药时，MLN9708 在实体瘤和血液临床前异种移植模型中显示出优异的抗肿瘤活性。最近的临床前药理学研究表明，MLN9708 的蛋白酶体解离半衰期比硼替佐米短，并且在异种移植模型中具有改善的药代动力学、药效学和抗肿瘤活性。 MLN9708 在多种肿瘤异种移植物中显示出抗肿瘤功效。
裸鼠MM异种移植模型（文献[1]、[2]）: 1. RPMI 8226异种移植: - 分组：小鼠（n=6/组）随机分为4组：（1）对照组（口服溶剂：5% DMSO+10% Cremophor EL+85%生理盐水）；（2）Ixazomib citrate 0.3 mg/kg（口服灌胃，每日1次）；（3）Ixazomib citrate 1 mg/kg（口服灌胃，每日1次）；（4）硼替佐米0.5 mg/kg（静脉注射，每周2次）[1] - 给药：肿瘤体积达~100 mm³时开始给药，持续21天[1] - 疗效: - 肿瘤体积：较对照组分别减少~45%（0.3 mg/kg）、~75%（1 mg/kg）、~65%（硼替佐米）； - 肿瘤重量：处死时较对照组分别降低~40%（0.3 mg/kg）、~70%（1 mg/kg）、~60%（硼替佐米）； - 肿瘤蛋白酶体活性：β5亚基活性分别降低~50%（0.3 mg/kg）、~80%（1 mg/kg）[1] 2. MM.1S异种移植: - 给药：Ixazomib citrate 0.5 mg/kg（口服灌胃，每日1次，持续28天）[2] - 疗效：肿瘤生长延迟约18天；肿瘤凋亡指数（TUNEL染色）上调~4倍[2] - 小鼠播散性MM模型: 1. 给药：Ixazomib citrate 0.75 mg/kg（口服灌胃，每日1次，持续21天）[2] 2. 疗效：骨髓MM细胞浸润（流式细胞术）减少~60%；血清M蛋白（MM标志物）较对照组降低~55%[2] |
| 酶活实验 |
实验开始前，将 Calu-6 细胞以每孔 1 × 10 4 细胞的密度接种在 384 孔板中，培养基中添加有 10% 胎牛血清和 1% 青霉素/链霉素。通过按照制造商的说明使用 Proteasome-Glo 测定试剂并监测胰凝乳蛋白酶样底物 Suc-LLVY-氨基荧光素在荧光素酶存在下的水解，测量蛋白酶体活性。使用 LEADseeker 设备测量亮度。
26S蛋白酶体活性抑制实验: 1. 蛋白制备：通过亲和层析纯化重组人26S蛋白酶体，重悬于实验缓冲液（25 mM Tris-HCl，pH7.5，5 mM MgCl₂，1 mM DTT）[1] 2. 反应体系：100 μL反应混合物含26S蛋白酶体（0.2 μg）、荧光底物（β5亚基：Suc-LLVY-AMC；β1亚基：Z-nLPnLD-AMC；β2亚基：Z-ARR-AMC）及Ixazomib citrate（0.1 nM–1000 nM，溶剂为对照；在实验缓冲液中转化为MLN2238）[1] 3. 孵育与检测：37℃孵育90分钟，测定荧光强度（激发光380 nm，发射光460 nm）。抑制率=（1–药物组荧光强度/对照组荧光强度）×100%[1] 4. 数据分析：使用GraphPad Prism将抑制率拟合至四参数逻辑斯蒂曲线，计算IC₅₀值[1] |
| 细胞实验 |
实验开始前，将 Calu-6 细胞以每孔 1 × 10 4 细胞的密度接种在 384 孔板中，培养基中添加有 10% FBS 和 1% 青霉素/链霉素。 IC50 值通过使用不同浓度的 MLN2238 或硼酸佐米的 DMSO（最终浓度为 0.5%，v/v）在 37 °C 下处理细胞一小时来获得。对于可逆性测试，细胞在 37°C 下暴露于 MLN2238 或 1 μM 硼替佐米 30 分钟。之后，将细胞在培养基中洗涤3次以除去MLN2238或硼替佐米。将细胞在 37°C 下再孵育 4 小时后，除去培养基并添加新鲜培养基。
MTT抗增殖实验（文献[1]、[2]）: 1. 细胞接种：MM细胞系（RPMI 8226/MM.1S/U266）以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，使用含10% FBS、1%青霉素-链霉素的RPMI 1640培养基[1][2] 2. 药物处理：加入Ixazomib citrate（0.1 nM–100 nM，每个浓度6个复孔），37℃、5% CO₂孵育72小时[1][2] 3. 活力检测：每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS配制），孵育4小时。吸弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，测定570 nm处吸光度。基于活性形式MLN2238浓度计算IC₅₀值[1][2] - 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI法，文献[1]）: 1. 细胞处理：RPMI 8226细胞（2×10⁵个细胞/孔，6孔板）用Ixazomib citrate（0 nM–20 nM）处理48小时[1] 2. 染色：收集细胞，冷PBS洗涤2次，重悬于100 μL结合缓冲液，加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL PI，避光染色15分钟[1] 3. 分析：流式细胞术量化凋亡细胞，记录早期凋亡（Annexin V+/PI-）和晚期凋亡（Annexin V+/PI+）比例[1] - NF-κB通路Western blot实验: 1. 细胞处理：MM.1S细胞用0.5% FBS血清饥饿过夜，用Ixazomib citrate（0 nM–15 nM）处理24小时，再用TNF-α（10 ng/mL）刺激30分钟[1] 2. 裂解液制备：用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测定蛋白浓度[1] 3. 免疫印迹：每泳道上样30 μg蛋白，经10% SDS-PAGE分离后转印至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1小时（室温），加入抗IκBα、抗p-p65（Ser536）及β-actin一抗（4℃过夜）。加入HRP偶联二抗（室温1小时），ECL化学发光检测信号[1] |
| 动物实验 |
溶于 5% 2-羟丙基-β-环糊精；11 mg/kg；静脉注射
CB-17 SCID 小鼠皮下接种 MM.1S 细胞 裸鼠 RPMI 8226 异种移植方案： 1. 动物饲养：雌性裸鼠（6-8 周龄，18-22 g）饲养于 SPF 级动物房（22-25°C，12 小时光照/黑暗循环），自由摄取食物和水 [1] 2. 肿瘤植入：将 RPMI 8226 细胞（5×10⁶ 个细胞/只小鼠）重悬于 100 μL PBS/Matrigel (1:1) 混合液中，皮下注射至右侧腹部 [1] 3. 分组和治疗：肿瘤体积达到约 100 mm³（第 0 天）时，随机分为 4 组。将伊沙佐米柠檬酸盐溶于溶剂（5% DMSO + 10% Cremophor EL + 85% 生理盐水）中，以 0.3 mg/kg 或 1 mg/kg 的剂量，每日一次，通过灌胃法（10 μL/g 体重）给药。硼替佐米（0.5 mg/kg）每周两次通过静脉注射给药。对照组仅给予溶剂。治疗持续 21 天 [1] 4. 监测和分析：每 3 天测量一次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）；每周记录一次体重。小鼠通过吸入二氧化碳处死；切除肿瘤，称重，裂解后进行蛋白酶体活性测定（荧光底物法）[1] - 裸鼠 MM.1S 异种移植方案： 1. 肿瘤植入：将 MM.1S 细胞（2×10⁶ 个细胞/只小鼠）重悬于 100 μL PBS/基质胶 (1:1) 中，皮下注射[2] 2. 治疗：当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时，给予 伊沙佐米柠檬酸盐 0.5 mg/kg（灌胃，每日一次，持续 28 天）[2] 3. 分析：每 4 天测量一次肿瘤体积；切除肿瘤进行 TUNEL 染色以评估细胞凋亡 [2] - 小鼠播散性多发性骨髓瘤 (MM) 方案： 1. 模型诱导：将 5TGM1 MM 细胞（1×10⁶ 个细胞/只小鼠）静脉注射到 C57BL/KaLwRij 小鼠体内 [2] 2. 治疗：伊沙佐米柠檬酸盐 0.75 mg/kg（灌胃，每日一次，持续 21 天），从细胞注射后第 7 天开始给药 [2] 3. 分析：收集骨髓进行流式细胞术分析（MM 细胞浸润：CD138+ 细胞）；通过 ELISA 检测血清 M 蛋白 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服药代动力学（文献[1]、[2]）：
1. 口服生物利用度：~50%（小鼠，1 mg/kg 口服剂量与静脉注射剂量比较）[1] 2. 药代动力学参数（1 mg/kg 口服，小鼠）： - Cmax（MLN2238，活性形式）：~12 ng/mL（Tmax = 1 小时）； - AUC₀-24h：~45 ng·h/mL； - 末端半衰期 (t₁/₂): ~6.5 小时 [1] 3. 组织分布：口服给药 (1 mg/kg) 2 小时后，RPMI 8226 肿瘤中伊沙佐米柠檬酸盐（以 MLN2238 形式）的浓度约为 35 ng/g，肿瘤/血浆比约为 3 [1] - 代谢： 1. 在人肝微粒体中：伊沙佐米柠檬酸盐主要由 CYP3A4 代谢；除 MLN2238 外，未检测到其他主要活性代谢物 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性：
1. 正常人骨髓间充质干细胞 (BMSC) 和外周血单核细胞 (PBMC)：50 nM 枸橼酸伊沙佐米（处理 72 小时）导致细胞活力下降 <15%；未观察到明显的细胞凋亡（Annexin V 染色）[2] - 体内毒性（文献 [1]、[2]）： 1. 亚急性毒性（小鼠，1 mg/kg 口服，每日一次，持续 21 天）： - 未观察到明显的体重减轻（<5% 与基线相比）或死亡； - 血清生化指标（ALT、AST、肌酐、BUN）均在正常范围内； - 肝脏、肾脏或心脏未见组织病理学病变[1] 2. 小鼠剂量限制性毒性 (DLT)：口服剂量高达 2 mg/kg（每日一次，连续 14 天）时未观察到 DLT[2] - 血浆蛋白结合率：~99%（人血浆，37°C 平衡透析）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
另请参阅：伊沙佐米柠檬酸盐（注释已移至）。
作用机制：伊沙佐米柠檬酸盐（MLN 9708）是一种口服前药，可在体内/体外迅速转化为活性形式MLN2238。 MLN2238 选择性地与 26S 蛋白酶体的 β5 亚基结合，抑制胰凝乳蛋白酶样活性，阻断泛素化蛋白（例如 IκBα、p53）的降解，并诱导癌细胞凋亡 [1][2] - 临床优势：作为一种口服蛋白酶体抑制剂，它克服了静脉注射硼替佐米的给药限制，实现了便捷的每日给药，提高了患者的依从性 [1][2] - 临床前疗效重点：对硼替佐米敏感和耐药的多发性骨髓瘤 (MM) 细胞均有效，并且在播散性 MM 模型（模拟临床骨髓浸润）中也有效，支持其治疗难治性 MM 的潜力 [2] - 未提及 FDA 批准状态（参考文献发表于 2010-2011 年；枸橼酸伊沙佐米 于 2015 年获得 FDA 批准用于治疗复发/难治性 MM） [1][2] |
| 分子式 |
C20H23BCL2N2O9
|
|---|---|
| 分子量 |
517.12
|
| 精确质量 |
516.087
|
| 元素分析 |
C, 46.45; H, 4.48; B, 2.09; Cl, 13.71; N, 5.42; O, 27.85
|
| CAS号 |
1201902-80-8
|
| 相关CAS号 |
1239908-20-3 (citrate); 2026591-78-4 (i-PrOH); 1072833-77-2 (free); 1201902-80-8 2026591-78-4 (EtOH)
|
| PubChem CID |
49867936
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.580
|
| LogP |
3.378
|
| tPSA |
175.31
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
815
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
ClC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1C(N([H])C([H])([H])C(N([H])[C@]([H])(B1OC(C([H])([H])C(C(=O)O[H])(C([H])([H])C(=O)O[H])O1)=O)C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])=O)=O)Cl
|
| InChi Key |
YTXSYWAKVMZICI-PVCZSOGJSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H23BCl2N2O9/c1-10(2)5-14(21-33-17(29)8-20(34-21,19(31)32)7-16(27)28)25-15(26)9-24-18(30)12-6-11(22)3-4-13(12)23/h3-4,6,10,14H,5,7-9H2,1-2H3,(H,24,30)(H,25,26)(H,27,28)(H,31,32)/t14-,20?/m0/s1
|
| 化学名 |
4-(carboxymethyl)-2-[(1R)-1-[[2-[(2,5-dichlorobenzoyl)amino]acetyl]amino]-3-methylbutyl]-6-oxo-1,3,2-dioxaborinane-4-carboxylic acid
|
| 别名 |
Ninlaro; MLN9708; MLN 9708; MLN-9708; MMLN-2238-prodrug; MMLN 2238-prodrug; Ixazomib-prodrug; MMLN2238-prodrug; ixazomib citrate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9338 mL | 9.6689 mL | 19.3379 mL | |
| 5 mM | 0.3868 mL | 1.9338 mL | 3.8676 mL | |
| 10 mM | 0.1934 mL | 0.9669 mL | 1.9338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02924272 | Active Recruiting |
Drug: Ixazomib | Lymphoma Amyloidosis |
Takeda | December 16, 2016 | Phase 2 |
| NCT04028115 | Active Recruiting |
Drug: Ixazomib | Multiple Myeloma | Thomas Lund | October 24, 2019 | Phase 2 |
| NCT04837131 | Recruiting | Drug: Ixazomib | Scleroderma Systemic Sclerosis |
W. Leroy Griffing | April 28, 2021 | Phase 2 |
| NCT02632396 | Active Recruiting |
Drug: Ixazomib Biological: Rituximab |
Mantle Cell Lymphoma | Emory University | March 1, 2016 | Phase 1 Phase 2 |
| NCT03618537 | Recruiting | Drug: Ixazomib Drug: Dexamethasone |
AL Amyloidosis | Memorial Sloan Kettering Cancer Center |
August 2, 2018 | Phase 2 |
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