VR23

trypsin-like proteasome (IC50 = 1 nM); chymotrypsin-like proteasome (IC50 = 50-100 nM); caspase-like proteasome (IC50 = 3 μM)

体外活性：在 HeLa 细胞中，VR23 诱导泛素化蛋白积累。在 RPMI 8226 和 KAS 6 细胞中，VR23 抑制细胞生长，IC50 分别为 2.94 和 1.46 μM。 VR23 对硼替佐米 (BTZ) 敏感和耐药的 RPMI 8226 和 ANBL6 细胞也同样有效。当与硼替佐米联合用于上述细胞时，VR23对细胞生长抑制显示出协同作用。此外，VR23 通过引起泛素化细胞周期蛋白 E 的积累来选择性诱导癌细胞凋亡。 激酶测定：用不同浓度的药物处理 96 孔聚集板上指数生长的细胞或不处理（对照）6 小时。用 0.5% NP40 缓冲液提取的蛋白酶体与总体积 100 μL 的等量样品混合，然后与 25 μmol/L 荧光底物（LRR-特异性的胰蛋白酶样活性、LLE-特异性的 caspase 样活性、和 SUVY 特异性的胰凝乳蛋白酶样活性），在 37°C 的黑底 96 孔板中进行。每 5 分钟在 360 nm（激发）和 480 nm（发射）波长下监测一次荧光。细胞测定：VR23 处理使癌细胞经历异常的中心体扩增周期。该循环是由泛素化细胞周期蛋白 E 的积累引起的。硼替佐米被临床批准为胰凝乳蛋白酶样蛋白酶体抑制剂。 VR23与硼替佐米联合使用，在杀死多发性骨髓瘤细胞方面产生协同效应。这种协同作用对于硼替佐米耐药的骨髓瘤细胞也有效。

在移植了 MDA-MB-231 转移性乳腺癌细胞的 ATH490 无胸腺小鼠中，VR23（30mg/kg，腹腔注射）显示出有效的抗肿瘤和抗血管生成活性。 VR23 还可以减少紫杉醇对小鼠造成的不良反应。

在 96 孔聚集板上，指数生长的细胞要么用不同的药物浓度处理，要么不处理（对照）持续 6 小时。使用 0.5% NP40 缓冲液提取的蛋白酶体与等体积的样品混合，形成 100 μL 的总体积。然后将它们置于 37°C 黑底 96 孔板中，并与 25 μmol/L 荧光底物（LRR 特异性的胰蛋白酶样活性、LLE 特异性的 caspase 样活性和 SUVY 特异性的荧光底物）一起孵育。胰凝乳蛋白酶样活性）。每五分钟，使用 360 nm（激发）和 480 nm（发射）波长测量荧光。

对 SRB 和克隆药物进行了检测。使用 Graph Pad Prism V 4.02，使用 S 形剂量反应曲线（可变斜率）计算 IC50 值。

ATH490 athymic mice engrafted with MDA-MB-231 or RPMI 8226 cancer cells
30mg/kg
i.p.

[1]. Cancer Res . 2015 Oct 1;75(19):4164-75.

C19H16CLN5O6S

477.88

477.876

C, 47.75; H, 3.37; Cl, 7.42; N, 14.66; O, 20.09; S, 6.71

1624602-30-7

Yellow solid powder

C1CN(CCN1C2=C3C=CC(=CC3=NC=C2)Cl)S(=O)(=O)C4=C(C=C(C=C4)[N+](=O)[O-])[N+](=O)[O-]

PDQVZPPIHADUOO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C19H16ClN5O6S/c20-13-1-3-15-16(11-13)21-6-5-17(15)22-7-9-23(10-8-22)32(30,31)19-4-2-14(24(26)27)12-18(19)25(28)29/h1-6,11-12H,7-10H2

7-chloro-4-[4-(2,4-dinitrophenyl)sulfonylpiperazin-1-yl]quinoline

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

Note: Listed below are some common formulations that may be used to formulate products with low water solubility (e.g. < 1 mg/mL), you may test these formulations using a minute amount of products to avoid loss of samples.

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Injection Formulation 1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (i.e. 100 μL DMSO stock solution → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH ₂ O to obtain a clear solution.
Injection Formulation 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (i.e. 100 μL DMSO → 400 μLPEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
Injection Formulation 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (i.e. 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
Example: Take the Injection Formulation 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) as an example, if 1 mL of 2.5 mg/mL working solution is to be prepared, you can take 100 μL 25 mg/mL DMSO stock solution and add to 900 μL corn oil, mix well to obtain a clear or suspension solution (2.5 mg/mL, ready for use in animals).

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Injection Formulation 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in saline = 10 : 90 [i.e. 100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in saline)]
*Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution.
Injection Formulation 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (i.e. 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin → 500 μL Saline)
Injection Formulation 6: DMSO : PEG300 : castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (i.e. 50 μL DMSO → 100 μLPEG300 → 200 μL castor oil → 650 μL Saline)
Injection Formulation 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (i.e. 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
Injection Formulation 8: Dissolve in Cremophor/Ethanol (50 : 50), then diluted by Saline
Injection Formulation 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (i.e. 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
Injection Formulation 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (i.e. 100 μL EtOH → 400 μLPEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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Oral Formulation 1: Suspend in 0.5% CMC Na (carboxymethylcellulose sodium)
Oral Formulation 2: Suspend in 0.5% Carboxymethyl cellulose
Example: Take the Oral Formulation 1 (Suspend in 0.5% CMC Na) as an example, if 100 mL of 2.5 mg/mL working solution is to be prepared, you can first prepare 0.5% CMC Na solution by measuring 0.5 g CMC Na and dissolve it in 100 mL ddH2O to obtain a clear solution; then add 250 mg of the product to 100 mL 0.5% CMC Na solution, to make the suspension solution (2.5 mg/mL, ready for use in animals).

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Oral Formulation 3: Dissolved in PEG400
Oral Formulation 4: Suspend in 0.2% Carboxymethyl cellulose
Oral Formulation 5: Dissolve in 0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose
Oral Formulation 6: Mixing with food powders

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Note: Please be aware that the above formulations are for reference only. InvivoChem strongly recommends customers to read literature methods/protocols carefully before determining which formulation you should use for in vivo studies, as different compounds have different solubility properties and have to be formulated differently.

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。