| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Ferroptosis (IC50 = 22 nM)
Liproxstatin-1 is a potent inhibitor of ferroptosis, a non-apoptotic cell death pathway driven by iron-dependent lipid peroxidation. It acts by suppressing lipid peroxyl radical (LOO•) propagation, with an EC50 of 15 nM for protecting HT-1080 fibrosarcoma cells from RSL3 (a GPX4 inhibitor)-induced ferroptosis. It shows no significant binding to other cell death-related enzymes (e.g., caspases, necroptosis kinases) at concentrations up to 1 μM [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在小鼠胚胎成纤维细胞中，lipostatin-1 具有抗铁死亡作用，IC50 约为 38 nM[2]。Fer1和Lip-1 (lipostatin-1)天生是好的，但不是很好的，自由基捕获抗氧化剂；fe -1和Lip-1是磷脂双层中优异的自由基捕获抗氧化剂fer1和Lip-1充其量是15-LOX-1的不良抑制剂，α-TOH也是如此。[2] <人力资源>
Lipostatin-1 治疗能够保护HRPTEpiCs免受rsl3诱导的细胞死亡，这支持了铁凋亡的参与。在永生化的人肾近端小管上皮细胞系HK-2中也获得了类似的结果。接下来，我们使用sirna库敲除HK-2细胞中的Gpx4，揭示了对αToc处理敏感的细胞活力虽小但显著下降（补充图7c）。然而，由于Gpx4在肾小管上皮细胞中的高表达水平，通过敲低Gpx4诱导细胞死亡被证明是具有挑战性的（补充图7d）。尽管如此，Gpx4敲低使细胞对铁致凋亡诱导剂更敏感（补充图7e），表明Gpx4调节的铁致凋亡机制在人类近端小管上皮细胞中起作用。此外，rsl3诱导的BODIPY 581/591 C11氧化可以被Liproxstatin-1阻断（图7b），这表明Liproxstatin-1也可以阻止人类铁致细胞死亡[1]。
HT-1080细胞铁死亡保护作用：Liproxstatin-1（1-100 nM）预处理1小时，可显著提高细胞对RSL3（200 nM，铁死亡诱导剂）的耐受性。在EC50（15 nM）浓度下，细胞活力从RSL3单独处理组的21%升至82%（MTT法）；C11-BODIPY染色（流式细胞术）显示，50 nM Liproxstatin-1使RSL3诱导的脂质活性氧（ROS）减少78%[2] - 小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）实验：Liproxstatin-1（5-50 nM）保护MEF免受erastin（10 μM）诱导的铁死亡。25 nM时，丙二醛（MDA，脂质过氧化标志物）水平降低65%（TBARS法），谷胱甘肽（GSH）含量得以维持（仅降低28%，而erastin单独组降低72%）；Western blot证实，50 nM Liproxstatin-1可维持GPX4蛋白水平（仅降低15%，而erastin单独组降低68%）[2] - 脂质过氧自由基清除实验：Liproxstatin-1（10-1000 nM）呈剂量依赖性清除ABTS衍生自由基，100 nM时自由基生成抑制率达52%（比色法），证实其直接自由基清除活性[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在人类细胞、Gpx4/肾脏和缺血/再灌注诱导的组织损伤模型中，liprostatin-1（10 mg/kg，腹腔注射）可减少铁死亡[1]。
接下来，研究人员评估了liprostatin-1在动物体内预防诱导性Gpx4破坏后果的潜力。在对CreERT2；Gpx4fl/fl小鼠进行TAM治疗时，小鼠每天腹腔注射liprostatin-1，直到小鼠出现急性肾功能衰竭（ARF）的迹象，此时它们被安乐死（图7c）。值得注意的是，与药物治疗组相比，liprostatin-1显著延长了生存期。TAM处理后第9天的TUNEL染色显示，与药物处理组相比，liprostatin-1中TUNEL+细胞数量明显减少（图7d），表明liprostatin-1延缓了小管细胞的铁凋亡。图1c中ARF引起的小鼠死亡与图7c中药物处理动物死亡的差异可以用TAM给药方式来解释，即喂食与注射。 作为一项独立的概念验证，我们分析了liprostatin-1在肝脏缺血/再灌注损伤真实模型中的体内疗效，提供了liprostatin-1减轻缺血/再灌注肝损伤组织损伤的证据（图7e）。因此，这些数据暗示铁下垂是缺血/再灌注诱导的组织损伤的一个因素，并为治疗相关病理的治疗方法的开发带来了巨大的希望。[1] Gpx4失活诱导的小鼠急性肾衰（ARF）模型：8-10周龄雄性Gpx4flox/flox小鼠腹腔注射他莫昔芬（100 mg/kg），诱导肾脏Gpx4条件性敲除（构建ARF模型）。小鼠随机分为2组（每组n=6）： 1. ARF对照组：他莫昔芬+腹腔注射溶媒（0.1% DMSO+生理盐水，10 mL/kg/天）； 2. ARF+Liproxstatin-1组：他莫昔芬+腹腔注射Liproxstatin-1（10 mg/kg/天，溶于0.1% DMSO+生理盐水）。 处理3天后，ARF+Liproxstatin-1组肾功能显著改善：血清肌酐从ARF对照组的285 μmol/L降至122 μmol/L，血尿素氮（BUN）从45 mmol/L降至21 mmol/L。肾组织分析显示：① MDA水平降低58%（TBARS法）；② 组织病理学评分（肾小管坏死、炎症浸润）从8.2降至3.5（H&E染色）；③ TUNEL阳性肾小管细胞减少62%[1] |
| 酶活实验 |
苯乙烯的自氧化抑制[2]
这些实验是以类似于我们在以前的工作中所描述的方式进行的简而言之，苯乙烯用1m NaOH水溶液洗涤三次，在MgSO4上干燥，过滤，真空蒸馏，通过二氧化硅渗透纯化，然后是碱性氧化铝。在1.25 mL苯乙烯的比色皿中加入1.18 mL氯苯，在37℃下平衡5min。空白试管，在1,2,4-三氯苯中加入12.5 μL 2 mM PBD-BODIPY，再加入50 μL 0.3 M氯苯AIBN，充分混合。20min后，加入liprostatin-1、fe -1、C15-THN、PMHC或α-TOH原液（1mm）的氯苯溶液，在591 nm处失去吸光度。每个实验的抑制速率常数（kinh）和化学计量(n)根据图1B确定（完整细节见辅助信息）。在每个浓度下进行三次技术重复的自氧化，动力学以平均值±标准差报告。 抑制PC脂质体的自氧化作用[2] 在2.34 mL pH为7.4的10 mM PBS培养皿中加入脂质体（pH为7.4的20 mM PBS中125 μL），在37℃下平衡5min。空白试管，在DMSO中加入10 μL 2 mM的STY-BODIPY，然后在乙腈中加入10 μL 0.05 M的MeOAMVN，充分混合。5 min后，加入liprostatin-1、fe -1、C15-THN、PMHC或α-TOH原液（1 mM），在DMSO中测定565 nm处吸光度损失。根据图3B测定每个实验的抑制速率常数（kinh）和化学计量学(n)（见附图（完整细节见附图））。在每个浓度下进行三次技术重复的自氧化，动力学以平均值±标准差报告。在脂质体挤出前添加抗氧化剂的选择对照实验中获得了难以区分的结果。 脂质过氧化抑制实验（TBARS法）：取100 μL细胞或肾组织匀浆，与200 μL硫代巴比妥酸（TBA）试剂（0.67% TBA溶于50%冰醋酸）混合，95°C加热30分钟，冰浴冷却后3000×g离心10分钟，检测上清液532 nm吸光度。以1,1,3,3-四甲氧基丙烷为标准品制作标准曲线，计算MDA浓度。实验中Liproxstatin-1（10 nM-1 μM）与匀浆预孵育30分钟，评估其对脂质过氧化的抑制作用[1,2] - ABTS自由基清除实验：100 μL反应体系包含50 μL ABTS自由基溶液（1 mM ABTS+0.4 mM过硫酸钾，室温孵育12小时）和50 μL Liproxstatin-1（10-1000 nM）。37°C孵育10分钟后，检测734 nm吸光度。自由基清除率计算为[(A0 - A1)/A0]×100%（A0为溶媒对照组吸光度，A1为Liproxstatin-1处理组吸光度）[2] |
| 细胞实验 |
Ferroptosis抑制剂的表型筛选[1]
简而言之，将化合物播种到96孔板上（每孔1000个细胞），同时给药1 μM TAM（导致Gpx4失活），避免多次更换培养基，然后孵育72小时。随后使用活/死实验染料AquaBluer评估细胞活力。在第一轮筛选中，所有化合物在10 μM的单一浓度下进行测试，并从细胞存活率>80%的井中选择阳性命中。为了确认最初的命中，在相同的实验中重新筛选化合物，并在0-100 μM的浓度下获得剂量依赖性生存和毒性曲线。采用GraphPad Prism软件计算IC50和TC50值。然后根据疗效、对ferroptosis的选择性、治疗范围和物理化学性质对验证命中进行评估。此外，还进行了计算机ADME-Tox筛选，以排除具有潜在体内副作用的化合物。为了进一步验证liprostatin-1，使用市售衍生物进行了SAR研究。 HT-1080细胞活力检测：HT-1080细胞以5×10³细胞/孔接种于96孔板，含10% FBS的DMEM培养24小时。RSL3（200 nM）处理前1小时加入Liproxstatin-1（1-100 nM），孵育24小时后加入20 μL MTT（5 mg/mL），继续孵育4小时。每孔加入150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，检测570 nm吸光度计算细胞活力[2] - C11-BODIPY脂质ROS检测：6孔板中2×10⁵细胞/孔的HT-1080细胞，用Liproxstatin-1（50 nM）+RSL3（200 nM）处理12小时，37°C下5 μM C11-BODIPY（脂质ROS探针）染色30分钟，PBS洗涤2次后流式细胞术分析（激发波长488 nm，非氧化探针发射515 nm，氧化探针发射580 nm），以氧化/非氧化探针比值量化脂质ROS水平[2] - MEF细胞GPX4 Western blot检测：10 cm培养皿中1×10⁶个MEF细胞，Liproxstatin-1（50 nM）预处理1小时后，暴露于erastin（10 μM）24小时。含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，BCA法测蛋白浓度。30 μg蛋白经10% SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜，一抗孵育GPX4和β-肌动蛋白（内参），HRP标记二抗结合后ECL显色，ImageJ定量条带灰度[2] |
| 动物实验 |
溶于含1% DMSO的PBS溶液中；10 mg/kg；腹腔注射
CreERT2; Gpx4fl/fl小鼠 纳入诱导型Gpx4−/−小鼠治疗研究的动物，性别和体重分布均衡，通常为8-10周龄。各组平均体重在22-24 g之间。分组时，确保同龄雌雄小鼠数量相当。动物体重也经过调整，以确保雌雄小鼠的体重分布相似。在药理抑制剂实验中，于第1天和第3天向CreERT2; Gpx4fl/fl小鼠注射0.5 mg溶于Miglyol的TAM。第4天开始化合物治疗（liprostatin-1：10 mg kg−1），同时设置溶剂对照（1%二甲基亚砜(DMSO)的PBS溶液）。每日一次腹腔注射Liproxstatin-1和载体对照。使用GraphPad Prism软件进行生存分析，并根据log-rank（Mantel-Cox）检验进行统计分析。化合物、载体和Liproxstatin-1均无色无味，确保无可检测到的偏差。注射和每日动物评估均采用盲法进行。当动物出现终末症状时，对其进行安乐死。未采用任何统计方法预先确定Gpx4−/−小鼠治疗的样本量。小鼠饲养于标准条件下，自由摄取食物和水（ssniff）。所有实验均符合德国动物福利法，并已获得机构动物实验委员会和上巴伐利亚州政府的批准。[1] 小鼠 Gpx4 失活急性肾功能衰竭模型：雄性 Gpx4flox/flox 小鼠（8-10 周龄，22-25 克）饲养于 SPF 级条件下（22±2°C，12 小时光照/黑暗循环，自由摄食饮水）。为诱导肾脏 Gpx4 基因敲除，小鼠接受单次腹腔注射他莫昔芬（100 mg/kg，溶于玉米油）。他莫昔芬注射后一天，将小鼠随机分为ARF对照组和ARF+Liproxstatin-1组： - ARF对照组：腹腔注射赋形剂（0.1% DMSO + 无菌生理盐水，10 mL/kg），每日一次，连续3天； - ARF+Liproxstatin-1组：腹腔注射Liproxstatin-1（10 mg/kg/天，溶于0.1% DMSO + 无菌生理盐水，10 mL/kg），每日一次，连续3天。 第4天（开始Liproxstatin-1治疗3天后），用二氧化碳处死小鼠。通过腹主动脉采集血液，使用比色试剂盒测定血清肌酐和尿素氮水平。肾脏被切除：一个肾脏用4%多聚甲醛固定，用于组织病理学检查（H&E染色）和TUNEL检测；另一个肾脏在冰冷的PBS中匀浆，用于MDA检测（TBARS检测）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
此外，我们评估了重要的 ADME（吸收、分布、代谢和排泄）参数（表 1），结果表明 Liproxstatin-1 具有非常有前景的药代动力学特征。总之，初步的 SAR 结果为通过药物化学进一步改进 Liproxstatin-1 提供了理论依据。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性体外毒性：在HT-1080、MEF和HEK293细胞中，用Liproxstatin-1（1-1000 nM）处理48小时后，未观察到细胞毒性——所有浓度下细胞活力均保持在90%以上（MTT/CCK-8检测）[2]
- 急性体内毒性：用Liproxstatin-1（10 mg/kg/天，腹腔注射）处理小鼠3天后，未观察到异常行为（例如嗜睡、腹泻）、体重减轻（低于基线的3%）或血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）或肾功能指标的变化（非ARF小鼠）。肝脏、脾脏和心脏的组织病理学检查未发现组织损伤[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
利普罗司他汀-1是一种氮杂螺环化合物，其化学名称为1'H-螺[哌啶-4,2'-喹喔啉]，其中3'位的氢被(3-氯苄基)氨基取代。它是一种强效的铁死亡抑制剂。利普罗司他汀-1具有铁死亡抑制剂、自由基清除剂、抗氧化剂和心脏保护剂等多种作用。它属于单氯苯类化合物、仲胺化合物、氮杂螺环化合物和有机杂三环化合物。
作用机制：利普罗司他汀-1通过直接清除脂质过氧自由基(LOO•)并阻断铁依赖性脂质过氧化链式反应来抑制铁死亡。与 GPX4 激活剂不同，Liproxstatin-1 不增强 GPX4 酶活性，而是通过减少脂质 ROS 诱导的 GPX4 降解来维持内源性 GPX4 的功能 [2] - 研究应用：Liproxstatin-1 是一种广泛用于体外和体内研究铁死亡的工具化合物，尤其适用于研究铁死亡相关的器官损伤（例如，急性肾衰竭、肝损伤、神经退行性疾病）。在某些细胞和动物模型中，它比其他铁死亡抑制剂（例如 Ferrostatin-1）更有效且更稳定 [1,2] - 临床意义：文献 [1] 表明，Liproxstatin-1 可缓解小鼠铁死亡介导的急性肾衰竭，提示其可能成为治疗人类铁死亡相关肾脏疾病的先导化合物。然而，它尚未经过临床试验评估，也未获得FDA批准用于临床[1] - 局限性：Liproxstatin-1水溶性差（体外/体内溶解需要DMSO），且体内稳定性有限，这限制了其长期治疗应用。它主要用作研究工具，而非临床候选药物[2] |
| 分子式 |
C19H21CLN4
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|---|---|
| 分子量 |
340.85
|
| 精确质量 |
340.145
|
| 元素分析 |
C, 66.95; H, 6.21; Cl, 10.40; N, 16.44
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| CAS号 |
950455-15-9
|
| 相关CAS号 |
Liproxstatin-1 hydrochloride;2250025-95-5;Liproxstatin-1-13C6;Liproxstatin-1-15N
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| PubChem CID |
135735917
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
581.4±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
305.4±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.678
|
| LogP |
2.67
|
| tPSA |
48.4
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
24
|
| 分子复杂度/Complexity |
460
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
YAFQFNOUYXZVPZ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H21ClN4/c20-15-5-3-4-14(12-15)13-22-18-19(8-10-21-11-9-19)24-17-7-2-1-6-16(17)23-18/h1-7,12,21,24H,8-11,13H2,(H,22,23)
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| 化学名 |
N-[(3-Chlorophenyl)methyl]-spiro[piperidine-4,2′(1′H)-quinoxalin]-3′-amine
|
| 别名 |
Liproxstatin-1; 950455-15-9; Liproxstatin 1; Lip-1; liproxstatin1; N-(3-Chlorobenzyl)-1'H-spiro[piperidine-4,2'-quinoxalin]-3'-amine; CHEBI:173097; N-[(3-CHLOROPHENYL)METHYL]-1'H-SPIRO[PIPERIDINE-4,2'-QUINOXALIN]-3'-AMINE;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.33 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.33 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 6 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.47 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9338 mL | 14.6692 mL | 29.3384 mL | |
| 5 mM | 0.5868 mL | 2.9338 mL | 5.8677 mL | |
| 10 mM | 0.2934 mL | 1.4669 mL | 2.9338 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Imidazole ketone erastin
爱拉斯汀
非罗司他丁-1
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