| 规格 | 价格 | |
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| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Ferroptosis (IC50 = 22 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
在小鼠胚胎成纤维细胞中，lipostatin-1 具有抗铁死亡作用，IC50 约为 38 nM[2]。Fer1和Lip-1 (lipostatin-1)天生是好的，但不是很好的，自由基捕获抗氧化剂；fe -1和Lip-1是磷脂双层中优异的自由基捕获抗氧化剂fer1和Lip-1充其量是15-LOX-1的不良抑制剂，α-TOH也是如此。[2] <人力资源>
Lipostatin-1 治疗能够保护HRPTEpiCs免受rsl3诱导的细胞死亡，这支持了铁凋亡的参与。在永生化的人肾近端小管上皮细胞系HK-2中也获得了类似的结果。接下来，我们使用sirna库敲除HK-2细胞中的Gpx4，揭示了对αToc处理敏感的细胞活力虽小但显著下降（补充图7c）。然而，由于Gpx4在肾小管上皮细胞中的高表达水平，通过敲低Gpx4诱导细胞死亡被证明是具有挑战性的（补充图7d）。尽管如此，Gpx4敲低使细胞对铁致凋亡诱导剂更敏感（补充图7e），表明Gpx4调节的铁致凋亡机制在人类近端小管上皮细胞中起作用。此外，rsl3诱导的BODIPY 581/591 C11氧化可以被Liproxstatin-1阻断（图7b），这表明Liproxstatin-1也可以阻止人类铁致细胞死亡[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在人类细胞、Gpx4/肾脏和缺血/再灌注诱导的组织损伤模型中，liprostatin-1（10 mg/kg，腹腔注射）可减少铁死亡[1]。
接下来，研究人员评估了liprostatin-1在动物体内预防诱导性Gpx4破坏后果的潜力。在对CreERT2；Gpx4fl/fl小鼠进行TAM治疗时，小鼠每天腹腔注射liprostatin-1，直到小鼠出现急性肾功能衰竭（ARF）的迹象，此时它们被安乐死（图7c）。值得注意的是，与药物治疗组相比，liprostatin-1显著延长了生存期。TAM处理后第9天的TUNEL染色显示，与药物处理组相比，liprostatin-1中TUNEL+细胞数量明显减少（图7d），表明liprostatin-1延缓了小管细胞的铁凋亡。图1c中ARF引起的小鼠死亡与图7c中药物处理动物死亡的差异可以用TAM给药方式来解释，即喂食与注射。 作为一项独立的概念验证，我们分析了liprostatin-1在肝脏缺血/再灌注损伤真实模型中的体内疗效，提供了liprostatin-1减轻缺血/再灌注肝损伤组织损伤的证据（图7e）。因此，这些数据暗示铁下垂是缺血/再灌注诱导的组织损伤的一个因素，并为治疗相关病理的治疗方法的开发带来了巨大的希望。[1] |
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| 酶活实验 |
苯乙烯的自氧化抑制[2]
这些实验是以类似于我们在以前的工作中所描述的方式进行的简而言之，苯乙烯用1m NaOH水溶液洗涤三次，在MgSO4上干燥，过滤，真空蒸馏，通过二氧化硅渗透纯化，然后是碱性氧化铝。在1.25 mL苯乙烯的比色皿中加入1.18 mL氯苯，在37℃下平衡5min。空白试管，在1,2,4-三氯苯中加入12.5 μL 2 mM PBD-BODIPY，再加入50 μL 0.3 M氯苯AIBN，充分混合。20min后，加入liprostatin-1、fe -1、C15-THN、PMHC或α-TOH原液（1mm）的氯苯溶液，在591 nm处失去吸光度。每个实验的抑制速率常数（kinh）和化学计量(n)根据图1B确定（完整细节见辅助信息）。在每个浓度下进行三次技术重复的自氧化，动力学以平均值±标准差报告。 抑制PC脂质体的自氧化作用[2] 在2.34 mL pH为7.4的10 mM PBS培养皿中加入脂质体（pH为7.4的20 mM PBS中125 μL），在37℃下平衡5min。空白试管，在DMSO中加入10 μL 2 mM的STY-BODIPY，然后在乙腈中加入10 μL 0.05 M的MeOAMVN，充分混合。5 min后，加入liprostatin-1、fe -1、C15-THN、PMHC或α-TOH原液（1 mM），在DMSO中测定565 nm处吸光度损失。根据图3B测定每个实验的抑制速率常数（kinh）和化学计量学(n)（见附图（完整细节见附图））。在每个浓度下进行三次技术重复的自氧化，动力学以平均值±标准差报告。在脂质体挤出前添加抗氧化剂的选择对照实验中获得了难以区分的结果。 |
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| 细胞实验 |
Ferroptosis抑制剂的表型筛选[1]
简而言之，将化合物播种到96孔板上（每孔1000个细胞），同时给药1 μM TAM（导致Gpx4失活），避免多次更换培养基，然后孵育72小时。随后使用活/死实验染料AquaBluer评估细胞活力。在第一轮筛选中，所有化合物在10 μM的单一浓度下进行测试，并从细胞存活率>80%的井中选择阳性命中。为了确认最初的命中，在相同的实验中重新筛选化合物，并在0-100 μM的浓度下获得剂量依赖性生存和毒性曲线。采用GraphPad Prism软件计算IC50和TC50值。然后根据疗效、对ferroptosis的选择性、治疗范围和物理化学性质对验证命中进行评估。此外，还进行了计算机ADME-Tox筛选，以排除具有潜在体内副作用的化合物。为了进一步验证liprostatin-1，使用市售衍生物进行了SAR研究。 |
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
铁死亡是一种非凋亡性细胞死亡形式，由小分子在特定肿瘤类型以及过表达致癌RAS的基因工程细胞中诱导产生。然而，其在非转化细胞和组织中的作用机制尚不明确，仍是一个谜。本文提供了直接的遗传学证据，表明谷胱甘肽过氧化物酶4 (Gpx4) 的敲除会导致一种与病理相关的铁死亡形式。利用可诱导的Gpx4(-/-)小鼠，我们阐明了谷胱甘肽/Gpx4轴在预防脂质氧化诱导的急性肾衰竭及其相关死亡中的关键作用。此外，我们系统地评估了一个小分子库，以寻找可能的铁死亡抑制剂，最终发现了一种强效的螺喹喔啉胺衍生物Liproxstatin-1。该化合物能够抑制细胞、Gpx4(-/-)小鼠以及缺血/再灌注诱导肝损伤的临床前模型中的铁死亡。总之，我们证明铁死亡是一种普遍存在的动态细胞死亡形式，抑制铁死亡有望带来显著的细胞保护作用。[1]
铁死亡是一种受调控的坏死形式，与铁依赖性的脂质氢过氧化物积累有关，而脂质氢过氧化物的积累可能在脂质过氧化参与的退行性疾病的发病机制中发挥关键作用。高通量筛选已鉴定出铁死亡抑制剂ferrostatin-1 (Fer-1) 和liproxstatin-1 (Lip-1)，它们能够有效抑制铁死亡——这种活性被认为与其减缓脂质氢过氧化物积累的能力有关。本文证明，这种活性可能源于它们作为自由基清除抗氧化剂(RTA)的反应活性，而非其作为脂氧合酶抑制剂的效力。尽管苯乙烯自氧化抑制实验表明，Fer-1和Lip-1与过氧自由基的反应速度比α-生育酚(α-TOH)慢约10倍，但在磷脂酰胆碱双层膜中，它们的反应活性却显著高于α-TOH——这与Fer-1和Lip-1作为铁死亡抑制剂的效力高于α-TOH的结果相符。在抑制铁死亡的浓度下，Fer-1、Lip-1 和 α-TOH 均未抑制 HEK-293 细胞中过表达的人 15-脂氧合酶-1 (15-LOX-1)。这些结果与已知的 15-LOX-1 抑制剂 (PD146176) 的结果形成鲜明对比，后者能够在有效抑制铁死亡的浓度下抑制该酶的活性。鉴于 Fer-1 和 Lip-1 可能通过抑制脂质过氧化作为自由基清除剂 (RTA) 来抑制铁死亡，我们评估了 1,8-四氢萘啶醇（以下简称 THNs）的抗铁死亡潜力：THNs 是一类经过合理设计的、具有极高反应活性的自由基清除抗氧化剂。我们首次证明，THNs的固有反应活性可以转化到细胞培养中。在细胞培养中，亲脂性THNs与Fer-1和Lip-1一样，能够有效抑制由药物或基因手段抑制过氧化氢解毒酶Gpx4诱导的小鼠成纤维细胞铁死亡，以及谷氨酸诱导的小鼠海马细胞死亡。这些结果表明，强效的RTA能够抑制铁死亡，并提示脂质过氧化（自氧化）可能在该过程中发挥核心作用。[2] |
| 分子式 |
C19H22CL2N4
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|---|---|
| 分子量 |
377.310781955719
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| 精确质量 |
376.122
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| CAS号 |
2250025-95-5
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| 相关CAS号 |
Liproxstatin-1;950455-15-9;Liproxstatin-1-13C6;Liproxstatin-1-15N
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| PubChem CID |
136590563
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| tPSA |
48.4
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
460
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
HEHOHTKMIOBTKC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H21ClN4.ClH/c20-15-5-3-4-14(12-15)13-22-18-19(8-10-21-11-9-19)24-17-7-2-1-6-16(17)23-18;/h1-7,12,21,24H,8-11,13H2,(H,22,23);1H
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| 化学名 |
N-[(3-chlorophenyl)methyl]spiro[1,4-dihydroquinoxaline-3,4'-piperidine]-2-imine;hydrochloride
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| 别名 |
Liproxstatin-1 (hydrochloride); 2250025-95-5; Liproxstatin-1 hydrochloride; HY-12726A; AKOS034834095; CS-0120787; Liproxstatin-1 HCl (950455-15-9 free base); N-(3-Chlorobenzyl)-1'H-spiro[piperidine-4,2'-quinoxalin]-3'-amine hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6503 mL | 13.2517 mL | 26.5034 mL | |
| 5 mM | 0.5301 mL | 2.6503 mL | 5.3007 mL | |
| 10 mM | 0.2650 mL | 1.3252 mL | 2.6503 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RMC-5127
Degarelix acetate hydrate
DDO-2728
Vatalanib hydrochloride (Vatalanib hydrochloride; PTK787 hydrochloride; ZK-222584 hydrochloride; CGP-797870 hydrochloride)
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