Imidazole ketone erastin

Ferroptosis; system Xc-
System xc- (cystine-glutamate antiporter) inhibitor (induces ferroptosis via cysteine deprivation and subsequent glutathione depletion) [1]

Imidazole ketone erastin（IKE）能有效减少DLBCL细胞数量[1]
18个DLBCL细胞系对IKE抑制表现出不同的敏感性，IC50<100 nM的细胞系被归类为敏感细胞系，IC50>10μM的细胞系归类为耐药细胞系，而IC50值在100 nM至10μM之间的细胞系则被归类为中度耐药细胞系（图1B）。我们进一步测试了与铁下垂抑制剂fer-1共同治疗后，IKE诱导的致死程度，fer-1是一种自由基捕获抗氧化剂，可抑制铁下垂过程中的致命脂质过氧化（Skouta等人，2014，Zilka等人，2017）。与fer-1的联合治疗挽救了DLBCL细胞系中由IKE诱导的细胞死亡，表明IKE在这些细胞系中诱导的致死性是由脂质过氧化和铁中毒引起的。[1]
先前的研究发现，IKE抑制谷氨酸释放，而IKE亲本类似物erastin抑制胱氨酸摄取。因此，我们测试了细胞水平的还原型谷胱甘肽（GSH），其生物合成需要半胱氨酸，作为IKE效力的读数。荧光法显示IKE对GSH的剂量依赖性耗竭（图1C）；这种效应被10μMβ-ME的共同处理所逆转，它将胱氨酸还原为半胱氨酸，允许其通过系统A、ASC和L进入细胞，从而绕过系统xc−的抑制。在SUDHL-6细胞中，IKE对GSH耗竭的IC50为34 nM（图S1B），而柳氮磺胺吡啶对GSH耗尽的IC50在毫摩尔范围内。[1]
虽然与DFO的联合处理抑制了培养物中IKE诱导的细胞死亡（图S1E），但在IKE处理后，它仅部分消除了脂质代谢变化，这可能是由于DFO抑制了铁介导的脂质过氧化，而不是酶介导的脂质过氧化，这表明诱导细胞死亡只需要一部分脂质代谢变化。[1]

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Imidazole ketone erastin (IKE) 能有效降低18种弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞系的细胞活性，敏感性各异。IC50值范围从<100 nM（敏感）到>10 µM（耐药）。在敏感的SUDHL-6细胞系中，IKE诱导的细胞死亡可被铁死亡抑制剂ferrostatin-1共处理所挽救，证实了铁死亡是其细胞死亡机制。[1]
在SUDHL-6细胞中，IKE处理（500 nM）导致还原型谷胱甘肽剂量依赖性耗竭，其GSH耗竭的IC50为34 nM。该效应可被β-巯基乙醇共处理逆转。[1]
IKE处理在SUDHL-6细胞中诱导了脂质过氧化，通过流式细胞术检测C11-BODIPY荧光增强证实。该增强可被ferrostatin-1共处理抑制。[1]
使用抗二氢吡啶-MDA-赖氨酸加合物抗体进行的免疫荧光染色显示，IKE处理的SUDHL-6细胞中该脂质过氧化加合物水平增加。[1]
SUDHL-6细胞的RT-qPCR分析显示，IKE处理（500 nM）显著上调了与铁死亡和系统 xc- 抑制相关的基因表达，包括 SLC7A11、PTGS2 和 CHAC1。PTGS2 的上调可被ferrostatin-1共处理抑制，而 CHAC1 的上调则不受影响。β-巯基乙醇共处理可阻止所有三个基因的上调。[1]
对IKE处理的SUDHL-6细胞进行的非靶向脂质组学分析显示，62种脂质物种发生显著改变，包括含多不饱和脂肪酸的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和三酰甘油的减少。这些变化可被β-巯基乙醇共处理逆转。Ferrostatin-1共处理增加了TAG水平并降低了单酰甘油水平。[1]
IKE处理上调了参与脂质从头合成、磷脂重塑和酶介导的脂质过氧化的基因的mRNA水平。这种上调可被ferrostatin-1或β-巯基乙醇共处理部分逆转。[1]

IKE体内药代动力学（PK）和药效学（PD）[1]
为了确定IKE在体内研究中的适用性，我们首先通过在NOD/SCID小鼠中使用腹膜内（IP）、静脉内（IV）和口服（PO）途径给药单剂量IKE（50mg/kg，5%DMSO，pH 4的HBSS）来评估多种给药途径。在8小时内测定IKE浓度表明IP是IKE给药的最有效和最实用的方法（表S1）。接下来，在携带SUDHL6异种移植物的NCG小鼠中，在24小时内单剂量服用IKE（50mg/kg，5%DMSO在pH 4的HBSS中，IP）后，测定血浆和肿瘤样本中的IKE浓度。IKE在1.35小时达到最高血浆浓度5.2μg/mL，在3.30小时达到最高肿瘤积聚2.5μg/mL（图3A，表S2）。[1]

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IKE体内非靶向脂质组学研究[1]
我们试图研究体内IKE治疗引起的脂质代谢变化。我们在不同时间点用单剂量IKE对肿瘤组织进行了非靶向脂质组学研究。我们发现IKE治疗后游离脂肪酸、磷脂和二酰基甘油（DAG）的相对丰度显著增加（单因素方差分析p<0.05）（图3F和图3G）。与细胞培养实验的差异可能源于体内不同的肿瘤微环境。鉴定的脂质富含亚油酸和花生四烯酸代谢（图S3A）。DAGs和游离脂肪酸水平的显著增加可能是由ATGL介导的TAG水解引起的（图S3B）。增加的脂肪酸可能反过来促进磷脂重塑以合成特定的磷脂，包括PC和PE。为了探索游离脂肪酸对细胞和铁下垂的影响，我们在有或没有IKE的情况下进行了游离脂肪酸的细胞存活测试。[1]

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IKE PEG-PLGA NP具有适合在体内应用的特性[1]
IKE在酸性水条件下可溶，但在中性水条件下溶解度不同（图1A）。为了改善化合物的递送，我们试图使用纳米粒子制剂。我们选择了基于生物相容性和可生物降解的PEG-PLGA二嵌段共聚物的纳米粒子作为IKE载体系统（图4A）。PEG块用于通过与水分子的紧密结合来创建可变形的水合层，这可以防止单核吞噬细胞系统（MPS）的清除，从而延长循环寿命。PLGA块用于形成疏水性核心，以结合IKE，IKE通过扩散和表面及本体侵蚀提供持续释放。[1]

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IKE抑制体内肿瘤生长，PEG-PLGA-NP制剂提高其治疗指数[1]
我们研究了IKE在携带SUDHL6皮下异种移植物的雄性NCG小鼠体内的疗效。一旦肿瘤体积达到100 mm3，将小鼠随机分为五组，每天通过IP注射一次，分别用载体（pH 4的HBSS中5%的DMSO）、水中未官能化的PEG-PLGA NP、40 mg/kg游离IKE（pH 4时HBSS中5%DMSO）、23 mg/kg游离IKE。在实验期间，每天测量小鼠体重和肿瘤体积，以确定IKE的抗肿瘤作用和可能的毒性。肿瘤生长计算为第一次给药前第0天原始肿瘤体积的倍数变化（图4C）。从治疗的第9天开始，施用40mg/kg IKE、23mg/kg IKE和23mg/kg IKE NP导致肿瘤生长显著减少。23mg/kg游离IKE和23mg/kg IKE NP的肿瘤生长抑制作用没有显著差异；然而，如重量减轻所示，IKE NP的毒性较小（图4D）。与生理盐水载体相比，游离IKE-（pH 4的HBSS中5%的DMSO）处理的小鼠从第9天开始减肥，这可能是由于在pH范围为7.5-8.0的腹膜环境中给药后IKE沉淀造成的，对腹部器官造成损伤，或可能对全身系统xc-抑制产生毒性，或IKE的脱靶毒性。然而，经IKE NP处理的小鼠体重与生理盐水载体组和NP载体组相似；IKE NP制剂的较低毒性可能是由于NP能够防止疏水性药物的聚集（Sun等人，2014），或NP EPR效应，这降低了与常规疏水性药物相关的非特异性分布和全身毒性（Yue等人，2013）。通过使用LC-MS分析IKE肿瘤积聚，我们发现与23mg/kg的游离IKE相比，23mg/kg的IKE NP略微增强了肿瘤积聚，与40mg/kg的游离IKE治疗相当（图S5A）。总体而言，PEG-PLGA-NP制剂增加了IKE的治疗窗口。

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在NCG小鼠的SUDHL-6皮下移植瘤模型中，每日一次腹腔注射Imidazole ketone erastin (IKE)（23 mg/kg 或 40 mg/kg）与溶媒对照组相比，在14天的治疗期内显著抑制了肿瘤生长。[1]
在移植瘤模型中，单次给药后，IKE处理从4小时开始导致肿瘤组织中GSH显著耗竭。[1]
在肿瘤组织中，IKE处理上调了 PTGS2、SLC7A11 和 CHAC1 mRNA的表达，从给药后3小时开始。[1]
肿瘤组织的免疫荧光分析显示，与溶媒对照组相比，IKE处理组中二氢吡啶-MDA-赖氨酸加合物和8-羟基-2'-脱氧鸟苷的水平增加，表明体内诱导了脂质过氧化和氧化应激。[1]
对来自IKE处理小鼠的肿瘤组织进行的非靶向脂质组学显示，游离脂肪酸、磷脂和二酰甘油的相对丰度显著增加。[1]
将IKE配制在可生物降解的聚乙二醇-聚（乳酸-共-乙醇酸）纳米粒中，所得制剂（IKE NP，含23 mg/kg IKE）抑制肿瘤生长的效果与游离IKE（23 mg/kg）相似，但毒性显著降低（小鼠体重减轻减少）。与同等剂量的游离IKE相比，IKE NP显示出轻微的肿瘤蓄积增强。[1]
疗效研究中的免疫荧光分析证实，在游离IKE或IKE NP处理的小鼠肿瘤中，COX-2蛋白、二氢吡啶-MDA-赖氨酸加合物和8-OH-dG的水平增加，而cleaved caspase-3未增加，表明细胞死亡是铁死亡性而非凋亡性。[1]

Glutamate-­‐release assay/谷氨酸释放测定。[2]
人星形细胞瘤细胞（CCF-STTG1）被用作胱氨酸-谷氨酸逆向转运蛋白（xc-）的来源。细胞在96孔板中生长。在>95%融合时，取出培养基，用Earle平衡盐溶液（EBSS）洗涤细胞，以去除培养基中含有的谷氨酸。然后将细胞在37°C下与EBSS（空白）或含有胱氨酸80μM（总计）±erastin（30 nM至100μM）的EBSS一起孵育2小时。已知的靶标抑制剂柳氮磺胺吡啶（SAS）和（S）-4-羧基苯甘氨酸（S-4CPG）用作试验中的阳性对照。在培养期后，用荧光法检测释放到培养基中的谷氨酸。将含有谷氨酸氧化酶（0.04 U/mL）、辣根过氧化物酶（0.125 U/mL）和Amplex UltraRed（50μM）的Tris缓冲液（100 mM，pH 7.4）加入板中，并跟踪荧光变化率（ex 530，em 590）。将数据标准化为总量和空白（（1-（未知-空白）/（总量-空白））100），并根据标准化荧光强度值确定SAS、S-4CPG、erastin、erastin代谢物和erastin类似物的半最大抑制常数（IC50）[2]。

DLBCL Lines Sensitivity Measurement [1]
将DLBCL细胞以每孔10000个细胞的速度铺在白色384孔板（每孔32μL）上，形成技术复制品，并孵育过夜。然后用8μL培养基处理细胞，该培养基含有两倍稀释的载体系列（DMSO），IKE（从100μM开始），有或没有Fer-1（从200μM开始。孵育24小时后，向每个孔中加入40μL 50%CellTiter-Glo 50%细胞培养基，在室温下摇动孵育15分钟。使用Victor X5平板读数器测量发光。[1]

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Flow Cytometry Assay [1]
将20万个SUDHL-6细胞接种在六孔板中，并用DMSO、特定浓度的IKE或fer-1处理。最终细胞密度为0.05百万个细胞/mL。24小时后，通过300×g离心5分钟收集细胞。将细胞重新悬浮在含有2μM C11-BODIPY（BODIPY 581/591 C11）的500μL HBSS中，并在37°C下孵育15分钟。将细胞沉淀并重新悬浮在HBSS中。用门控在FL1通道上测量荧光强度，仅记录活细胞（由DMSO处理组构建的门控）。每种情况下至少分析10000个细胞。

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DLBCL细胞敏感性测定： 将DLBCL细胞接种于384孔板中过夜培养。然后用Imidazole ketone erastin (IKE)的两倍稀释系列（从100 µM开始）处理细胞，可联合或不联合ferrostatin-1。孵育24小时后，使用发光法细胞活力检测试剂评估细胞活力。测量发光值，数据归一化至溶媒对照。计算剂量反应曲线和IC50值。[1]
脂质ROS流式细胞术检测： 用DMSO、IKE或IKE联合ferrostatin-1处理SUDHL-6细胞24小时。收集细胞，重悬于含有脂质过氧化探针C11-BODIPY的缓冲液中并孵育。通过流式细胞术在FL1通道测量荧光强度，圈定活细胞。[1]
还原型谷胱甘肽测量： 用IKE处理细胞24小时，可联合或不联合β-巯基乙醇。收集细胞，洗涤并计数。裂解细胞，上清液去蛋白。使用商业检测试剂盒，按照制造商说明书，通过荧光法测定GSH水平。[1]
定量PCR： 用IKE、ferrostatin-1或β-巯基乙醇处理细胞指定时间。提取RNA，反转录为cDNA，使用基因特异性引物和SYBR Green预混液进行定量PCR反应。mRNA水平以 HPRT1 为内参归一化，并使用ΔΔCt法计算。[1]
细胞免疫荧光： 处理后的细胞固定、透化并封闭。与一抗孵育过夜，然后与荧光标记的二抗孵育。染色细胞核。通过共聚焦显微镜捕获图像，并量化荧光强度。[1]
IKE PEG-PLGA NP的细胞活性测定： 接种细胞，并用游离IKE或IKE负载纳米粒的稀释系列处理。24小时后，使用发光法检测细胞活力。[1]

采用三种不同给药途径对小鼠进行药代动力学分析[1]
注射前称量NOD/SCID小鼠（12周龄，体重约28 g），并按每笼3只小鼠的密度分组。将IKE溶解于pH 4的5% DMSO/95% Hank's平衡盐溶液（HBSS）中，配制成5 mg/mL的溶液。另取不含IKE的pH 4的5% DMSO/95% HBSS溶液（赋形剂1）作为赋形剂。所有溶液均使用0.22 μm Steriflip过滤器进行除菌。小鼠分别采用三种不同的给药途径：腹腔注射（IP）和口服（PO）50 mg/kg IKE，以及静脉注射（IV）17 mg/kg IKE。分别于0、1、3、4和8小时采集各时间点3只小鼠的样本。此外，每组另设三只小鼠作为对照组，分别通过腹腔注射（IP）、口服（PO）和静脉注射（IV）给予等量的载体1，并在8小时后采集样本。在适当时间点，用二氧化碳窒息法处死小鼠3分钟，并通过心脏穿刺采集约0.5 mL血液。血液立即转移至K3 EDTA微量离心管（SARSTEDT 41.1504.105）中，并置于冰上。样本在4℃下以2100 × g离心10分钟，然后将血浆转移至干净的离心管中。血浆样本经液氮速冻后储存于-80℃。IKE的提取方法为：取100 μL血浆，加入900 μL乙腈。样本在室温下旋转混合至少5分钟，并在4℃下以4000 × g超声处理10分钟后进行浓缩。移除上清液，并在 GeneVac 蒸发器上以 HPLC 设置过夜干燥。干燥后，将样品重悬于 100 μL 甲醇中，并进行液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 分析，每个样品分析两次。质量控制标准样品通过将 IKE 溶解于 100 μL 水中，并采用相同步骤进行提取制备，以确保提取效率。[1]

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在携带 SUDHL6 异种移植瘤的 NCG 小鼠中进行药代动力学和药效学分析[1]
将 IKE 溶解于 pH 4 的 5% DMSO/95% HBSS 溶液中，配制成 5 mg/mL 或 3 mg/mL 的溶液。以pH值为4的5% DMSO/95% HBSS溶液作为载体1。使用NanoAssemblr制备的IKE-PEG-PLGA纳米颗粒和未功能化的PEG-PLGA纳米颗粒（不含IKE）（载体2）在去离子水中透析过夜，并至少更换两次透析液。透析后的IKE-PEG-PLGA纳米颗粒和未功能化的PEG-PLGA纳米颗粒经Amicon Ultra-15超滤离心管浓缩，配制成浓度为80 mg/mL的PEG-PLGA纳米颗粒溶液。[1]

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IKE功效研究[1]
将IKE溶解于pH值为4的5% DMSO/95% HBSS溶液中，配制成浓度为4 mg/mL的溶液。以pH值为4的5% DMSO/95% HBSS溶液作为载体1。使用NanoAssemblr制备的IKE修饰的PEG-PLGA纳米颗粒和未功能化的PEG-PLGA纳米颗粒（未负载IKE）（载体2）在去离子水中透析过夜；透析液至少更换两次。透析后的IKE修饰的PEG-PLGA纳米颗粒和未功能化的PEG-PLGA纳米颗粒经Amicon Ultra-15超滤离心管浓缩，制备浓度为80 mg/mL的PEG-PLGA纳米颗粒溶液。

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NOD/SCID小鼠的药代动力学：将咪唑酮类药物erastin (IKE) 溶解于pH 4的5% DMSO/Hank's平衡盐溶液(HBSS)中。小鼠单次给予IKE（腹腔注射和口服途径为50 mg/kg；静脉注射途径为17 mg/kg）。在不同时间点采集血样。分离血浆，并用乙腈提取IKE。采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析样品，以测定IKE浓度随时间的变化。[1]
异种移植模型的药代动力学/药效学：将皮下移植SUDHL-6异种移植瘤的NCG小鼠单次给予IKE（50 mg/kg，腹腔注射，溶于pH 4的5% DMSO/HBSS）。在不同时间点对小鼠实施安乐死。收集血浆和肿瘤样本。将肿瘤样本匀浆化，提取 IKE 并用液相色谱-质谱联用（LC-MS）进行定量。同时，另取肿瘤样本进行谷胱甘肽（GSH）测定、qPCR、免疫荧光和脂质组学分析。[1]
异种移植模型疗效研究：将携带 SUDHL-6 异种移植瘤（肿瘤体积约 100 mm³）的 NCG 小鼠随机分组。连续 14 天，每天腹腔注射一次以下药物：载体（5% DMSO/HBSS pH4）、空白 PEG-PLGA 纳米颗粒、游离 IKE（23 或 40 mg/kg，溶于 5% DMSO/HBSS pH4）或载 IKE 的 PEG-PLGA 纳米颗粒（相当于 23 mg/kg IKE 溶于水）。每日测量肿瘤大小和小鼠体重。小鼠在末次给药后3小时处死，并收集肿瘤进行分析（IKE浓度、生物标志物、脂质组学）。[1]

在NOD/SCID小鼠中，单次腹腔注射咪唑酮类药物erastin (IKE) (50 mg/kg)后，血浆浓度(Cmax)在1.35小时达到峰值(Tmax)，为5.2 µg/mL。与静脉注射和口服途径相比，腹腔注射被认为是最有效且最便捷的给药途径。[1] 在携带SUDHL-6异种移植瘤的NCG小鼠中，单次腹腔注射IKE (50 mg/kg)后，血浆浓度在1.35小时达到峰值(Cmax)，为5.2 µg/mL，肿瘤浓度在3.30小时达到峰值(Cmax)，为2.5 µg/mL。血浆半衰期(T1/2)为1.83小时，肿瘤半衰期为3.50小时。 [1]
与血浆相比，PEG-PLGA纳米颗粒包裹的IKE在肿瘤组织中的蓄积量增加，且与等剂量游离IKE相比，肿瘤蓄积量略有提高。[1]
IKE具有中等水溶性，在酸性条件下可溶，但在中性pH条件下溶解度较低。[1]

在疗效研究中，每日腹腔注射游离的咪唑酮类药物erastin (IKE)（23 mg/kg 和 40 mg/kg，溶于 5% DMSO/HBSS pH4 溶液）导致小鼠体重显著下降，该现象从治疗第 9 天左右开始出现。[1]
观察到的游离 IKE 的毒性（体重下降）归因于药物在腹腔（pH 值约为 7.5-8.0）中的潜在沉淀和/或系统性抑制或脱靶效应。[1]
将 IKE 制成 PEG-PLGA 纳米颗粒（IKE NP，相当于 23 mg/kg IKE）可显著降低这种毒性，与载体对照组相比，小鼠体重未出现显著下降。这种毒性的降低归因于纳米颗粒能够防止药物聚集，并通过增强渗透性和滞留性 (EPR) 效应增强肿瘤靶向性，从而降低全身暴露量。 [1]
给予空白PEG-PLGA纳米颗粒（每日750 mg/kg，持续两周）未引起可检测到的体重减轻或可观察到的毒性迹象。[1]

[1]. Imidazole Ketone Erastin Induces Ferroptosis and Slows Tumor Growth in a Mouse Lymphoma Model. Cell Chem Biol. 2019 Jan 31. pii: S2451-9456(19)30030-3.

铁死亡是一种受调控的细胞死亡形式，可通过抑制胱氨酸-谷氨酸逆向转运蛋白系统xc-诱导。在现有的xc-抑制剂中，咪唑酮类化合物erastin (IKE) 是一种强效且代谢稳定的xc-抑制剂，同时也是一种铁死亡诱导剂，具有潜在的体内应用价值。我们利用弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)异种移植模型研究了IKE的药代动力学和药效学特征，结果表明IKE通过抑制xc-发挥抗肿瘤作用，导致谷胱甘肽耗竭、脂质过氧化，并在体外和体内诱导铁死亡生物标志物的表达。我们利用非靶向脂质组学和qPCR技术，鉴定了IKE诱导的铁死亡过程中脂质代谢的独特特征。此外，可生物降解的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米颗粒被用于辅助IKE递送，并在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）异种移植模型中显示出比游离IKE更低的毒性。[1]

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在原本不具有亲电官能团的骨架上引入反应性羰基，从而构建可逆共价抑制剂，是一种潜在的提高化合物效力的有效策略。然而，醛类化合物代谢不稳定，这使得该策略无法应用于动物模型或人体临床研究中。为了克服这一限制，我们设计了能够形成可逆共价加合物的酮基官能团，同时该官能团具有较高的代谢稳定性，并能提高其侧链骨架的水溶性。我们用铁死亡诱导剂和实验性治疗药物erastin测试了该策略，并观察到化合物效力显著提高。特别是，一种名为 IKE 的新型羰基 erastin 类似物展现出更高的效力、溶解度和代谢稳定性，因此是未来体内癌症治疗应用的理想候选药物。[2]

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咪唑酮 erastin (IKE) 是 erastin 的一种类似物，其设计包含酮基、异丙氧基取代基和咪唑部分。与 erastin 相比，这些修饰赋予了 IKE 纳摩尔级的效力、更高的代谢稳定性以及在酸性条件下更高的水溶性。[1]
IKE 可诱导铁死亡，这是一种由脂质过氧化驱动的铁依赖性细胞死亡，其主要机制是通过抑制胱氨酸-谷氨酸反向转运系统 xc-，导致半胱氨酸缺乏、谷胱甘肽耗竭和谷胱甘肽过氧化物酶 4 (GPX4) 失活。 [1]
该研究强调了诱导铁死亡作为治疗依赖胱氨酸输入的癌症（例如弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL））的潜在策略。[1]
研究采用可生物降解的PEG-PLGA纳米颗粒作为递送系统，通过增强肿瘤蓄积和降低全身毒性来提高IKE的治疗指数。[1]
研究鉴定了铁死亡的药效学生物标志物，包括PTGS2、SLC7A11和CHAC1 mRNA的上调，以及体内脂质过氧化加合物（MDA-赖氨酸）和氧化性DNA损伤（8-OH-dG）水平的升高。[1]
脂质组学分析揭示了IKE诱导的铁死亡过程中脂质代谢的显著变化，包括含PUFA的磷脂和TAG的减少，以及脂质生物合成和重塑途径的激活。[1]

C35H35CLN6O5

655.1426

654.235

C, 64.17; H, 5.39; Cl, 5.41; N, 12.83; O, 12.21

1801530-11-9

91824786

White to yellow solid powder

4.5

110Ų

0

8

11

47

1120

0

PSPXJPWGVFNGQI-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C35H35ClN6O5/c1-24(2)47-32-12-7-25(31(43)20-40-14-13-37-23-40)19-30(32)42-33(38-29-6-4-3-5-28(29)35(42)45)21-39-15-17-41(18-16-39)34(44)22-46-27-10-8-26(36)9-11-27/h3-14,19,23-24H,15-18,20-22H2,1-2H3

3-(5-(2-(1H-imidazol-1-yl)acetyl)-2-isopropoxyphenyl)-2-((4-(2-(4-chlorophenoxy)acetyl)piperazin-1-yl)methyl)quinazolin-4(3H)-one

Imidazole ketone erastin; IKE; Imidazole ketone erastin; 1801530-11-9; IKE; PUN30119; PUN-301193-(5-(2-(1H-imidazol-1-yl)acetyl)-2-isopropoxyphenyl)-2-((4-(2-(4-chlorophenoxy)acetyl)piperazin-1-yl)methyl)quinazolin-4(3H)-one; CHEMBL3629671; 2-({4-[2-(4-chlorophenoxy)acetyl]piperazin-1-yl}methyl)-3-{5-[2-(imidazol-1-yl)acetyl]-2-isopropoxyphenyl}quinazolin-4-one; Imidazole ketone erastinIKE; Ferroptosis inducer IKE;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。