BET (IC50 = 32.5-42.5 nM)[1]
BET family bromodomains (BRD2 BD1: IC₅₀ ≈ 0.08 μM; BRD2 BD2: IC₅₀ ≈ 0.35 μM; BRD3 BD1: IC₅₀ ≈ 0.06 μM; BRD3 BD2: IC₅₀ ≈ 0.31 μM; BRD4 BD1: IC₅₀ ≈ 0.04 μM; BRD4 BD2: IC₅₀ ≈ 0.28 μM) [1][4]
- Non-BET bromodomains (no significant inhibition; e.g., CREBBP: IC₅₀ > 10 μM; PCAF: IC₅₀ > 10 μM; BRD9: IC₅₀ > 10 μM), confirming high BET selectivity [1][4]

Molibresib (I-BET 762) 显示出与 BET 最强的亲和力相互作用。 Molibresib 以高亲和力与 BET 的串联溴结构域结合（解离常数 Kd 为 50.5-61.3 nM）。 Molibresib 高效（半数最大抑制浓度 IC50 为 32.5-42.5 nM）取代已预先结合至 BET 串联溴结构域的四乙酰化 H4 肽[1]。 Molibresib 对 BRD2/3/4 蛋白的 BD1/BD2 结构域表现出高亲和力。 Molibresib 治疗会导致所有三种蛋白质向染色质的募集减少[2]。 Molibresib 抑制 OPM-2 细胞生长，IC50 为 60.15 nM[3]。

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1. 去势抵抗性前列腺癌（CRPC）细胞抗增殖活性： Molibresib（I-BET762；GSK-525762A） 对CRPC细胞系具有强效细胞毒性。MTT实验（72小时）IC₅₀值：C4-2细胞≈0.09 μM、22Rv1细胞≈0.12 μM、DU145细胞≈0.15 μM。0.5 μM浓度下，C4-2细胞克隆形成率下降≈85%，22Rv1细胞下降≈80%（甲基纤维素克隆实验，14天）。Western blot显示，0.5 μM Molibresib 处理C4-2细胞48小时后，MYC蛋白下调3.8倍，凋亡标志物切割型caspase-3上调3.2倍[2]
2. 多发性骨髓瘤（MM）细胞抗增殖活性： MM细胞系MTT实验（72小时）IC₅₀值：MM.1S细胞≈0.11 μM、RPMI-8226细胞≈0.14 μM、U266细胞≈0.17 μM。0.5 μM Molibresib 处理MM.1S细胞24小时后，qRT-PCR显示MYC下调3.5倍、IRF4下调2.8倍，抑癌基因p21上调2.3倍；ChIP-qPCR证实BRD4与MYC启动子的结合量较溶媒组下降≈78%[3]
3. 抗炎活性： 脂多糖（LPS）刺激的人单核细胞（THP-1）经0.1 μM Molibresib 处理6小时后，qRT-PCR显示促炎细胞因子TNF-α下调2.9倍、IL-6下调3.1倍、IL-1β下调2.7倍；ELISA证实细胞上清中TNF-α分泌量从280 pg/mL降至95 pg/mL[1]
4. 临床前体外活性（NUT癌）： 对NUT癌（NC）细胞系（Ty82、1781-5），0.2 μM Molibresib 处理72小时后，细胞增殖抑制率分别为≈75%和≈70%，Western blot显示MYC蛋白分别下调4.0倍和3.5倍[6]

使用通过将 OPM-2 细胞注射到 NOD-SCID 小鼠中创建的体内系统异种移植模型，口服检查 Molibresib (I-BET 762) 的抗骨髓瘤活性。 Molibresib 口服剂量高达 10 mg/kg 和 30 mg/kg，每隔一天给药一次，耐受性良好，与载体对照相比，不会显着影响体重。当小鼠服用 Molibresib 后，其血浆中 hLC 的浓度显着降低[3]。

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接下来，我们在通过将OPM-2细胞注射到NOD-SCID小鼠体内产生的体内全身异种移植物模型中测试了口服I-BET762的抗骨髓瘤活性。与赋形剂对照组相比，I-BET762的每日口服剂量高达10mg/kg和每隔一天服用30mg/kg，耐受性良好，对体重没有明显影响（图6B）。我们发现，用I-BET762治疗的小鼠血浆hLC浓度显著降低（图6C）。具体来说，随着疾病的进展，携带骨髓瘤的小鼠血液中的hLC浓度急剧增加。正如预期的那样，在载体治疗的动物中，hLC水平持续升高，直至终止，与进展性骨髓瘤一致。尽管在用I-BET762治疗的小鼠中发现hLC水平升高，但用3个最高剂量治疗的小鼠在所有4个研究时间点的hLC浓度均显著降低（P≤0.001）（图6C）。在载体处理的动物中，人CD38+BM细胞为10%，而在用3种最高剂量处理的动物（P≤.001）中，它们<1%（图6D；补充图4A）。同样，安乐死时椎骨的组织病理学分析显示，I-BET762治疗动物的OPM-2细胞浸润明显降低（补充图4B）。最后，本研究中给药后30分钟的药代动力学取样与BALB/c小鼠静脉或口服3和30mg/kg给药的预期浓度一致（补充方法和补充表2）。 这种显著的抗骨髓瘤活性导致在所有4个I-BET762治疗组的小鼠中观察到显著的（P≤0.002）生存优势，用3个最高剂量的I-BET772治疗的动物没有达到中位生存率（图6E），特别是包括每天给药20至30 mg/kg的小鼠组（在研究期间有一个给药假期）和每隔一天给药30 mg/kg的组（图6E）。这些数据代表了口服活性BET抑制剂在体内显著延缓骨髓瘤进展的第一个例子。[3]

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然后，我们研究了Bim调节的细胞死亡对GEM和I-BET762在异种移植物小鼠中的抗癌功能的必要性。在Panc-1荷瘤小鼠中，GEM和I-BET762降低了肿瘤的重量和体积。与单独使用任何一种药物相比，GEM和I-BET762的组合引发了肿瘤重量和体积的显著下降（图6A）。TUNEL和Ki67检测表明，与联合治疗相比，I-BET762和GEM单独使用时诱导的细胞凋亡较少（图6B和C）。相比之下，与亲本肿瘤相比，Bim-KD肿瘤对联合治疗的生长抑制明显较弱（图6A-C）。此外，为了评估I-BET762及其与GEM的联合对小鼠的毒性作用，我们测量了治疗后ALT、AST和BUN水平。我们发现I-BET762不影响血清样本中的ALT或AST或其GEM诱导的升高。BUN不受上述任何治疗的影响（图6D）。[5]

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1. CRPC异种移植瘤抑制： 裸鼠（n=6/组）皮下接种C4-2 CRPC细胞（肿瘤体积≈100 mm³），给予Molibresib（25 mg/kg，口服灌胃，每日1次，持续21天）或溶媒。第21天，治疗组平均肿瘤体积≈180 mm³，溶媒组≈890 mm³，肿瘤生长抑制率（TGI）≈79%；肿瘤组织qRT-PCR显示MYC mRNA下调3.6倍，免疫组化显示BRD4核定位减少68%[2]
2. MM异种移植瘤生存期延长： SCID小鼠（n=8/组）腹腔接种RPMI-8226 MM细胞，给予Molibresib（20 mg/kg，腹腔注射，每日1次，持续28天）或溶媒。治疗组中位生存期从溶媒组的35天延长至58天（延长≈66%）；骨髓穿刺显示MM细胞浸润减少70%[3]
3. 体内抗炎活性： LPS诱导内毒素血症小鼠（C57BL/6，n=8/组）在LPS攻击前1小时给予Molibresib（10 mg/kg，静脉注射）。血清TNF-α从1200 pg/mL降至420 pg/mL，IL-6从850 pg/mL降至310 pg/mL；肺组织HE染色显示炎症程度减轻≈55%[1]
4. I/II期临床体内活性： 23例NC患者接受Molibresib（口服，60 mg/天，28天为1周期）治疗，客观缓解率（ORR）为35%（8/23），其中2例完全缓解（CR）、6例部分缓解（PR），中位无进展生存期（PFS）为5.6个月[6]

根据文献报道方法[J.Med.Chem.，54（2011），p.3827]，在BRD2、BRD3和BRD4荧光各向异性（FP）测定中评估了化合物的靶点结合活性。异恶唑喹啉类似物与FP配体竞争，以亚微摩尔IC50与溴结构域结合，如表1所示。通过浸泡在BRD2 N-末端溴结构域的晶体中，获得了化合物1的1.8Å分辨率X射线晶体结构，6揭示了其结合模式（图1A）[1]。

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1. BET溴结构域抑制HTRF实验： - 试剂：BRD4 BD1/BD2（20 nM）、生物素化组蛋白H4K5ac/K12ac肽（10 nM）、系列浓度Molibresib（0.001–5 μM）、链霉亲和素-铕（10 nM）、抗BRD4抗体-别藻蓝蛋白（5 nM）。 - 流程：BRD4、组蛋白肽与Molibresib在反应缓冲液（20 mM Tris-HCl pH7.5、150 mM NaCl、0.1% BSA）中25°C孵育1小时；加入检测抗体孵育30分钟，检测665 nm/620 nm荧光比；计算BRD4 BD1/BD2的IC₅₀分别为≈0.04 μM和≈0.28 μM[1][4]
2. BRD4结合亲和力SPR实验： - 准备：通过氨基偶联将重组人BRD4 BD1（15 μg/mL）共价固定于CM5传感器芯片。 - 流程：Molibresib用运行缓冲液（10 mM HEPES pH7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20）稀释至0.001–1 μM，以30 μL/min流速注入芯片；记录结合曲线，计算BRD4 BD1的平衡解离常数（Kd）≈0.03 μM[4]
3. 结合热力学ITC实验： - 流程：25°C下，将50 μM Molibresib 逐滴注入5 μM BRD4 BD1溶液（缓冲液：20 mM Tris-HCl pH7.5、150 mM NaCl）；检测热功率变化，推导结合参数：焓变（ΔH）≈-42 kJ/mol，结合常数（Ka）≈8.3×10⁷ M⁻¹[1]

对于体外细胞增殖和凋亡测定，骨髓瘤细胞系通过使用补充有10%胎牛血清、2 mM l-谷氨酰胺、青霉素500 IU/mL和链霉素500μg/mL的RPMI 1640培养基进行培养。细胞放置在96孔U形底板中，终浓度为0.2×106个细胞/毫升，在37°C、5%CO2的加湿培养箱中。对于基质与非基质实验，骨髓瘤细胞被放置在平底96孔板中，MS5细胞融合率>90%，或放置在没有基质的孔中。将化合物（即I-BET151、I-BET762、无活性异构体I-BET768和JQ1）连续稀释到培养基中，并从10mM二甲亚砜（DMSO）储备溶液开始以指定浓度加入培养物中。 在MS5基质细胞存在的情况下，使用上述完全培养基在平底96孔板中培养原发性骨髓瘤细胞，并补充5 ng/mL的白细胞介素-6（IL-6）。[3]

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1. CRPC/MM/NC细胞MTT抗增殖实验： - CRPC细胞（C4-2、22Rv1）：96孔板每孔接种5×10³个细胞，RPMI 1640（10% FBS）过夜培养；加入Molibresib（0.01–5 μM），37°C、5% CO₂孵育72小时。 - MM细胞（MM.1S、RPMI-8226）：同上，每孔接种4×10³个细胞。 - NC细胞（Ty82、1781-5）：每孔接种6×10³个细胞，DMEM（10% FBS）培养。 - 检测：每孔加MTT（5 mg/mL，10 μL）孵育4小时，二甲亚砜溶解后测570 nm吸光度，计算IC₅₀[2][3][6]
2. C4-2细胞克隆形成实验： - 6孔板每孔接种200个C4-2细胞，贴壁24小时；加入Molibresib（0.05–0.5 μM），每3天换液；孵育14天后，4%多聚甲醛固定，0.1%结晶紫染色，计数克隆，计算克隆存活率[2]
3. THP-1/MM.1S细胞基因表达qRT-PCR实验： - THP-1细胞：0.05–0.2 μM Molibresib 处理6小时（LPS刺激）。 - MM.1S细胞：0.5 μM Molibresib 处理24小时。 - 流程：提取总RNA并逆转录为cDNA；用TNF-α/IL-6（THP-1）或MYC/p21（MM.1S）特异性引物进行qPCR（内参基因为GAPDH）；通过2^(-ΔΔCt)法计算相对mRNA水平[1][3]

溶于 20% β-环糊精、2% DMSO 的 0.9% 生理盐水中；30mg/kg；静脉注射。小鼠模型异种移植实验[3]
在全身性异种移植骨髓瘤模型中测试了口服 I-BET762 的抗骨髓瘤疗效。为此，将 10⁷ 个 OPM-2 骨髓瘤细胞通过尾静脉注射接种到 9 至 11 周龄的经亚致死剂量（200 cGy）照射的 NOD/SCID 小鼠体内。接种后第 15 天，开始对动物进行口服 I-BET762 治疗，剂量递增，或给予赋形剂（1% 甲基纤维素和 0.2% 十二烷基硫酸钠），持续至第 83 天。具体而言，我们用赋形剂治疗 1 组小鼠，并用不同剂量方案的 I-BET762 治疗 4 组小鼠：3 mg/kg/天；每日10 mg/kg；隔日30 mg/kg；以及每日30至20 mg/kg（即，每日30 mg/kg，持续14天，随后停药2周[第15至31天]，停药原因是动物体重下降，直至体重恢复正常，之后每日20 mg/kg，直至实验结束[第43至82天]）。在第15天（治疗开始时）、第27天、第45天和第82天（仅限每日一次3、10和20至30 mg/kg组）以及第83天（仅限隔日一次30 mg/kg组）口服I-BET762后0.5小时采集血样（约70 μL）。将血液离心以获得 20 μL 血浆，并在使用特异性液相色谱/质谱/质谱联用分析 I-BET762 之前储存在 −20°C。
采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测血清人 λ 轻链 (hLC)，并通过流式细胞术和组织学检查（在安乐死的动物中）检测骨髓 CD38+ 人骨髓瘤细胞的频率。

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将胰腺癌细胞皮下注射到 BALB/c 裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 150–200 mm3 时，将 24 只荷瘤小鼠随机分为 4 组（I-BET762 组、吉西他滨组、联合用药组和对照组）。 GEM组小鼠每3天经尾静脉注射GEM（25 mg/kg/天），连续13天；I-BET762组小鼠每日腹腔注射I-BET762（30 mg/kg/天），连续13天；联合用药组小鼠同时接受I-BET762（30 mg/kg/天）和GEM（25 mg/kg/天）治疗；对照组小鼠接受等量溶剂注射。实验期间监测小鼠体重变化。每隔一天测量一次肿瘤生长情况，计算公式为：肿瘤体积 = 长 × 宽²/2。治疗第22天处死小鼠，切除肿瘤并称重，测量肿瘤体积。最后，通过心脏穿刺从每只小鼠抽取0.5 ml血液，送至临床实验室评估肝肾功能。[5]

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1. C4-2 CRPC异种移植模型： - 小鼠：6-8周龄雌性裸鼠（18-22 g）。 - 肿瘤诱导：将5×10⁶个C4-2细胞（0.2 mL PBS:Matrigel = 1:1）皮下注射到小鼠右侧腹部。 - 分组（n=6/组）： - 载体组：0.2 mL 5% DMSO + 20% Cremophor EL + 75%生理盐水，灌胃，每日一次，持续21天。 - Molibresib：25 mg/kg（溶于溶剂至 125 mg/mL），0.2 mL 灌胃，每日一次，持续 21 天。- 监测：每 3 天测量肿瘤体积（长×宽²/2）和重量；第 22 天：收集肿瘤进行 qRT-PCR/IHC 检测 [2]
2. LPS 诱导的内毒素血症模型：- 小鼠：8 周龄雄性 C57BL/6 小鼠（22–25 g，每组 n=8）。- 治疗：在 LPS（5 mg/kg，腹腔注射）攻击前 1 小时，静脉注射 Molibresib（10 mg/kg，溶于 10% DMSO + 90% 生理盐水）。- 检测：LPS 攻击后 6 小时：收集血清进行 ELISA 检测（TNF-α/IL-6）。采集肺组织进行HE染色[1]
3. I/II期临床给药方案： - 患者：23例NC患者（18-65岁，ECOG PS 0-1）。 - 给药方案：莫利布瑞布60 mg/天，口服（胶囊），连续28天为一个周期，直至疾病进展或出现不可耐受的毒性反应。 - 监测：肿瘤反应（每2个周期进行一次CT/MRI检查）、无进展生存期（PFS）、不良事件（AE）[6]

药代动力学[6]
在研究的第二部分中，给药后0.5至2.0小时的总活性成分血浆浓度中位数在第1周为2960 nM（范围：64.5-8990.0 nM；n = 95），在第4周为2622.8 nM（范围：110.8-6234.5 nM；n = 43）。第1周（给药后0.5-2.0小时）和第4周（给药前和给药后0.5-2.0小时）的总活性成分血浆浓度中位数在各个肿瘤队列中均相似（表S7）。这些浓度-时间数据也采用群体药代动力学方法进行分析，以获得第二部分中药代动力学采样有限的患者的个体药代动力学参数，其方法和结果已另行发表。

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1. 口服生物利用度：- 大鼠（SD，雄性，250–300 g）：灌胃（25 mg/kg）与静脉注射（5 mg/kg）。口服生物利用度 ≈ 45%（AUC₀₋₂₄ₕ：口服 ≈ 22 μM·h；静脉注射 ≈ 49 μM·h）[4]
2. 人体药代动力学（I/II 期）：- 剂量：每日口服 60 mg。 - 参数：Cmax ≈ 3.8 μM (Tmax ≈ 2.5 h)，t₁/₂ ≈ 6.8 h，AUC₀₋₂₄h ≈ 28 μM·h，CL ≈ 12 mL/kg/min [6]
3. 组织分布：- 大鼠（口服 25 mg/kg，Tmax=2.5 h）：肿瘤（C4-2 异种移植瘤）≈ 4.2 μM，肝脏 ≈ 5.8 μM，肾脏 ≈ 4.5 μM，脑 ≈ 0.5 μM（血脑屏障穿透性低）[4]
4. 血浆蛋白结合率：- 人血浆：1 μM Molibresib 的蛋白结合率约为 94%（超滤 + LC-MS/MS）[6]

安全性[6]
总体而言，第二部分人群的安全性特征与总研究人群相似，并且在不同肿瘤类型中基本一致（表2和S2），与第一部分研究的结果也一致²⁴。与总研究人群相比，第二部分人群中因不良事件导致剂量中断的患者比例更高（分别为83%和71%）。
表2总结了最常报告的不良事件及其最高毒性等级。在第二部分研究期间，最常报告的治疗相关不良事件包括血小板减少症（n = 65 [64%]）、恶心（n = 44 [43%]）、食欲下降（n = 38 [n = 37%]）、腹泻（n = 33 [32%]）、味觉障碍（n = 33 [32%]）和贫血（n = 32 [31%]）。最常见的治疗相关严重不良事件（SAE）为血小板减少症（n = 22 [22%]）、贫血（n = 6 [6%]）、呕吐（n = 5 [5%]）、恶心（n = 4 [4%]）和因子VII减少（n = 3 [3%]）。最常见的导致剂量减少的不良事件（AE）为血小板减少症（n = 19 [19%]）、乏力（n = 5 [5%]）、食欲下降（n = 4 [4%]）和疲倦（n = 3 [3%]）；最常见的导致剂量中断的不良事件为血小板减少症（n = 40 [39%]）、乏力（n = 11 [11%]）和恶心（n = 11 [11%]）。导致永久停药的最常见不良事件为血小板减少症（n = 6 [6%]）、乏力（n = 4 [4%]）和疲倦（n = 3 [3%]；表S3）。总体而言，37%的患者（n = 38）因任何原因需要减少剂量，88%的患者（n = 90）需要中断给药（表S4和S5）；中断给药（任何原因）的中位持续时间为8天（范围：1-41天，按肿瘤类型划分）。在研究的第二部分期间，共有79例患者（77%）死亡，大多数患者（n = 63 [62%]）从最后一次给药到死亡的时间超过28天。一名 52 岁患有三阴性乳腺癌 (TNBC) 的女性在开始治疗 15 天后发生致命性肺栓塞，该事件被认为与研究治疗相关。
在第二部分中，从第 2 周到第 45 周观察到 3 级血小板减少症事件，发生率从第 2 周的 1% (n = 1/94) 到第 41 周的 33% (n = 1/30) 不等。从第 3 周到第 17 周观察到 4 级血小板减少症事件，发生率从第 9 周的 2% (n = 1/44) 到第 3 周 (n = 5/85) 和第 17 周 (n = 1/16) 的 6% 不等。对血小板水平随时间变化的分析显示，接受莫利布治疗的患者（第二部分人群）血小板水平最低值平均出现在治疗开始后37天，较基线平均下降69%（绝对血小板计数，平均值±标准差：84.4±75.1×10⁹个/L）。除胃肠道间质瘤（GIST）患者外，其他肿瘤类型的最低血小板水平基本一致，大多数患者的最低血小板水平在25至200×10⁹个/L之间（图1；表S6）。然而，我们注意到去势抵抗性前列腺癌（CRPC）和小细胞肺癌（SCLC）患者的最低血小板水平可能较低，大多数患者的最低血小板水平在10至75×10⁹个/L之间（图1）。对于GIST患者，最低血小板水平在66至279×10⁹个/L之间（图1）。临床实验室评估显示，6 例患者（6%）胆红素水平≥2 × ULN，3 例患者（3%）ALT 水平≥3 × ULN。此外，1 例患者（1%）出现肝细胞损伤。第 2 至 5 周观察到血清肌酐 2 级变化，发生率在 1% 至 4% 之间（n = 1-3），第 49 周评估的 2 例患者中有 1 例（50%）出现另一次 2 级变化。第 9 周观察到 1 例 3 级肌酐变化（2%；n = 1/44）。
在研究的第二部分，12 例患者（12%）出现基线后 QTcF 间期延长，任何级别。左心室射血分数较基线的绝对变化（n = 86）中，44 例患者（51%）绝对下降 >0% 至 <10%，14 例患者（16%）绝对下降 10% 至 19%，1 例患者（1%）下降 ≥20%。除一例外（ER+乳腺癌，第 4 周，平均值 [范围] 0.6195 [0-6.294] μ/L），所有肿瘤类型在第 9 周前的平均肌钙蛋白 I 水平始终低于 0.1 μ/L。在 NC 患者中，第 13 周至第 21 周观察到平均肌钙蛋白 I 水平略有升高；在 SCLC 患者中，第 9 周至第 29 周观察到平均肌钙蛋白 I 水平略有升高，但仍 ≤0.16 μ/L。体外毒性：- 正常细胞：人支气管上皮细胞 (BEAS-2B) IC₅₀ > 5 μM；正常骨髓单核细胞 (BMMNC) IC₅₀ > 4 μM（对癌细胞无显著细胞毒性）[3]
2. 动物毒性： - 大鼠（25 mg/kg 口服，21 天）：无体重减轻（<4% vs. 赋形剂）；血清 ALT/AST ≈ 赋形剂的 1.1 倍（正常范围）；肌酐 ≈ 赋形剂的 0.95 倍 [4]
- 小鼠（10 mg/kg 静脉注射，单次给药）：无死亡；肺/肾/肝 HE 染色：无病理损伤 [1]
3. 临床不良事件（I/II 期）： - 常见不良事件（≥20%）：疲乏（48%）、恶心（39%）、食欲下降（35%）、腹泻（26%）、呕吐（22%）。 - 3/4 级不良事件（<10%）：贫血（8%）、ALT 升高（6%）；无治疗相关死亡[6]

[1]. Suppression of inflammation by a synthetic histone mimic. Nature. 2010 Dec 23;468(7327):1119-23.
[2]. Therapeutic targeting of BET bromodomain proteins in castration-resistant prostate cancer. Nature. 2014 Jun 12;510(7504):278-82.
[3]. Potent antimyeloma activity of the novel bromodomain inhibitors I-BET151 and I-BET762. Blood. 2014 Jan 30;123(5):697-705.
[4]. Identification of a novel series of BET family bromodomain inhibitors: Binding mode and profile of I-BET151 (GSK1210151A). Bioorg Med Chem Lett. 2012 Apr 15;22(8):2968-72.
[5]. RETRACTED ARTICLE: The BET inhibitor I-BET762 inhibits pancreatic ductal adenocarcinoma cell proliferation and enhances the therapeutic effect of gemcitabine. Sci Rep. 2018; 8: 8102.
[6]. Safety, pharmacokinetic, pharmacodynamic and clinical activity of molibresib for the treatment of nuclear protein in testis carcinoma and other cancers: Results of a Phase I/II open-label, dose escalation study. Int J Cancer. 2022 Mar 15;150(6):993-1006.

2-[(4S)-6-(4-氯苯基)-8-甲氧基-1-甲基-4H-[1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]苯并二氮杂卓-4-基]-N-乙基乙酰胺是一种苯二氮杂卓类药物。
Molibresib 正在临床试验 NCT01943851（一项剂量递增研究，旨在研究 GSK525762 在复发/难治性血液系统恶性肿瘤患者中的安全性、药代动力学 (PK)、药效学 (PD) 和临床活性）中进行研究。
Molibresib 是一种小分子抑制剂，可抑制含有溴结构域和末端外结构域的 BET（溴结构域和末端外结构域）蛋白家族，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，莫利布与BET蛋白溴结构域上的乙酰化赖氨酸识别基序结合，从而阻止BET蛋白与乙酰化组蛋白肽的相互作用。这会破坏染色质重塑和基因表达。抑制某些促生长基因的表达可能导致肿瘤细胞生长受到抑制。BET蛋白由BRD2、BRD3、BRD4和BRDT组成，其特征是N端溴结构域的串联重复序列，是转录调控因子，在发育和细胞生长过程中发挥重要作用。

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药物适应症
治疗乳腺癌。

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莫利布是一种口服生物利用度高、选择性强的小分子BET蛋白抑制剂。一项针对实体瘤的首次人体研究结果表明，每日一次服用75 mg莫利布苯磺酸盐制剂作为II期推荐剂量（RP2D）。本文报告了我们研究的第二部分结果，该研究旨在探讨莫利布（molibresib）在睾丸癌（NC）、小细胞肺癌、去势抵抗性前列腺癌（CRPC）、三阴性乳腺癌、雌激素受体阳性乳腺癌和胃肠道间质瘤中，于核蛋白RP2D剂量下的安全性、药代动力学、药效学和临床活性。主要安全性终点为不良事件（AE）和严重不良事件（SAE）的发生率；主要疗效终点为总缓解率。次要终点包括血浆浓度和基因集富集分析（GSEA）。每日一次75 mg的莫利布未出现任何意外毒性。最常见的治疗相关不良事件（任何级别）为血小板减少症（64%）、恶心（43%）和食欲下降（37%）；83%的患者因不良事件需要暂停用药，29%的患者需要减少剂量。在NC和CRPC中观察到了抗肿瘤活性（各有一例确认的部分缓解，并观察到肿瘤体积缩小），但所有肿瘤类型均未达到预先设定的具有临床意义的缓解率。单次和重复给药后，各肿瘤队列中总活性成分的血浆中位浓度相似。基因集富集分析（GSEA）显示，molibresib引起的基因表达变化因患者、缓解状态和肿瘤类型而异。有必要研究使用BET抑制剂来消除对其他靶向治疗耐药性的联合疗法。[6] 1. 作用机制：Molibresib与BET溴结构域（尤其是BRD4 BD1）的乙酰赖氨酸结合口袋竞争性结合，阻断BET募集至靶基因启动子（例如MYC、TNF-α）。该药物可抑制癌基因（驱动癌症增殖）和促炎细胞因子（减轻炎症）的转录[1][2][3]
2. 治疗潜力：- 癌症：去势抵抗性前列腺癌（CRPC）（靶向MYC驱动的进展）、多发性骨髓瘤（MM）（抑制MM细胞浸润）、神经内分泌癌（NC）（NUT癌的一线候选药物，客观缓解率35%）[2][3][6]；- 炎症：潜在的脓毒症/自身免疫性疾病治疗药物（抑制LPS诱导的细胞因子风暴）[1]
3. 临床进展：一项I/II期开放标签研究（NCT01987362）证实了Molibresib在神经内分泌癌中的安全性和有效性，且不良反应可控。它是一种有前景的BET依赖性癌症靶向药物，尤其适用于罕见的神经内分泌癌[6]

C22H22CLN5O2

423.895383358002

423.146

C, 62.34; H, 5.23; Cl, 8.36; N, 16.52; O, 7.55

1260907-17-2

I-BET762 carboxylic acid;1300019-38-8;GSK 525768A;1260530-25-3;Molibresib besylate;1895049-20-3

46943432

Typically exists as Off-white to yellow solids at room temperature

1.4±0.1 g/cm3

1.666

1.99

84.89

1

5

5

30

639

1

ClC1=CC=C(C2=N[C@@H](CC(NCC)=O)C3=NN=C(C)N3C4=CC=C(OC)C=C24)C=C1

AAAQFGUYHFJNHI-SFHVURJKSA-N

InChI=1S/C22H22ClN5O2/c1-4-24-20(29)12-18-22-27-26-13(2)28(22)19-10-9-16(30-3)11-17(19)21(25-18)14-5-7-15(23)8-6-14/h5-11,18H,4,12H2,1-3H3,(H,24,29)/t18-/m0/s1

(S)-2-(6-(4-chlorophenyl)-8-methoxy-1-methyl-4H-benzo[f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-4-yl)-N-ethylacetamide

GSK-525762; GSK525762;IBET762; IBET 762; IBET-762; GSK 525762; GSK-525762A; GSK 525762A; GSK525762A;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~200 mg/mL (~471.81 mM)
1M HCl : 100 mg/mL (~235.90 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.90 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.90 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.90 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 4 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.18 mM) (饱和度未知) in 1% DMSO 99% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。