| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 靶点 |
Arginase
nor-NOHA monoacetate targets arginase enzymes, specifically arginase-1 (Arg1) and arginase-2 (Arg2). Arginase is a key enzyme in the urea cycle that converts L-arginine into L-ornithine and urea. By competitively inhibiting arginase, this compound prevents the breakdown of L-arginine, thereby increasing its availability for nitric oxide synthase (NOS) to produce nitric oxide (NO), a critical vasodilator and signaling molecule. This mechanism is particularly relevant in the tumor microenvironment, where arginase activity suppresses T-cell receptor expression and anti-tumor immunity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在低氧（1.5% O2）条件下，nor-NOHA（0.1-1 mM，72 h）以剂量依赖的方式诱导K562细胞凋亡[1]。nor-NOHA（1 mM，72 h）可减弱K562或KCL22细胞中低氧介导的伊马替尼耐药性[1]。nor-NOHA单乙酸酯在体外表现出强效的抑制活性，对大鼠肝精氨酸酶的Ki值为0.5 µM，IC50值为2 µM。它对人II型精氨酸酶（Arg2）的选择性比I型精氨酸酶（Arg1）高约10倍。在功能性实验中，它增强了乙酰胆碱对离体主动脉环和肠系膜动脉环的作用，表明其能够增强NO介导的血管舒张。它还能抑制肺癌移植瘤的生长，证实了其抗肿瘤潜力。
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| 体内研究 (In Vivo) |
nor-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可显著缩小雄性Sprague-Dawley大鼠的梗死面积[2]。nor-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可提高雄性Sprague-Dawley大鼠的血浆瓜氨酸和亚硝酸盐水平，并降低血浆鸟氨酸水平[2]。体内实验表明，nor-NOHA单乙酸酯具有显著的生物活性。其在动物模型中抑制精氨酸酶的能力与增强免疫反应和减少肿瘤生长有关。该化合物被用于研究精氨酸酶在癌症、心血管疾病和免疫功能障碍等疾病中的作用。通过增加NO的可用性，它可以改善血管功能并调节炎症反应，凸显了其在临床前疾病模型中的治疗潜力。
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| 酶活实验 |
精氨酸酶活性测定[1]
精氨酸酶活性分析方法参照文献并稍作修改。对细胞进行计数，取等量细胞用50μl裂解缓冲液（含1mM EDTA、0.1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂的PBS）裂解，并在4℃下以14,000g离心15分钟。将上清液与50μl新鲜配制的活化缓冲液（10mM MnCl2、50mM Tris-HCl pH 7.5）和50μl 0.5M精氨酸混合，并在56℃下加热10分钟。随后，向混合物中加入800μl酸性溶液（H₂SO₄ (96%)/H₃PO₄ (85%)/H₂O，体积比1/3/7）和25μl 9% α-异亚硝基苯丙酮（溶于乙醇），并在100℃加热15分钟。混合物在黑暗中显色。最后，取250μl转移至96孔板，在550nm处测定吸光度值（OD）。 精氨酸酶抑制活性采用体外酶活性测定法进行评估。将重组或组织来源的精氨酸酶与其底物L-精氨酸和不同浓度的nor-NOHA单乙酸酯孵育。通过比色法测定尿素的生成量，并根据剂量-反应曲线计算抑制常数（Ki）或半数抑制浓度（IC₅₀）。通过改变底物浓度可以证实抑制作用的竞争性。 |
| 细胞实验 |
使用 Seahorse 分析仪测定细胞呼吸[1]
将 0.1×10⁶ 个 K562 细胞接种于聚赖氨酸包被的 XF-24 孔细胞培养微孔板中，培养基为添加了 4.5 g/L 葡萄糖和 1 mM 丙酮酸钠的 XF 检测培养基。细胞以 200 g 离心 1 分钟固定于微孔板上。使用 Seahorse Bioscience 公司的 XF24 分析仪测定细胞耗氧率 (OCR)、细胞外酸化率 (ECAR) 和光子产生率 (PPR)。测量按照制造商的说明进行，使用指定浓度的寡霉素、羰基氰化物-4-(三氟甲氧基)苯腙 (FCCP) 和鱼藤酮/抗霉素 A (R/A；均购自 Sigma-Aldrich)。使用 Seahorse XF 软件进行数据分析。 在巨噬细胞或癌细胞系等细胞培养模型中评估了 nor-NOHA 单乙酸酯的细胞活性。用该化合物处理细胞，并通过定量细胞裂解液中的尿素生成量来测量其对精氨酸酶活性的影响。可通过测量 NO 生成量或通过蛋白质印迹分析精氨酸酶表达来评估其对 L-精氨酸代谢和下游信号传导的影响。此外，还评估了该化合物对细胞增殖和免疫功能的影响。 |
| 动物实验 |
Sprague-Dawley大鼠接受30分钟冠状动脉结扎，随后进行2小时再灌注。在缺血前15分钟，分别给予动物生理盐水、精氨酸酶抑制剂N-ω-羟基-正-L-精氨酸（nor-NOHA），以及或不给予NO清除剂羧基-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧基-3-氧化物（cPTIO）或NOS抑制剂N(G)-单甲基-L-精氨酸（l-NMMA）。对照组梗死面积占危险面积的79±4%。nor-NOHA治疗使梗死面积减少至39±7%（P<0.001）。给予cPTIO或l-NMMA完全消除了nor-NOHA的保护作用。缺血性心肌中精氨酸酶 I 的表达显著升高（P < 0.05）。Nor-NOHA 治疗导致血浆亚硝酸盐水平升高（P < 0.05），瓜氨酸/鸟氨酸比值升高 10 倍（P < 0.001），表明精氨酸的利用途径转向 NOS。
结论：抑制精氨酸酶可通过依赖于 NOS 活性和 NO 生物利用度的机制保护心肌免受梗死损伤，其机制是通过将精氨酸的利用途径从精氨酸酶转向 NOS。这些发现提示，靶向精氨酸酶是未来预防心肌缺血再灌注损伤的一种有前景的治疗策略。[2] 在动物研究中，nor-NOHA 单乙酸酯通常通过腹腔注射 (ip) 或静脉注射 (iv) 给药。给药方案因模型而异；例如，在肿瘤模型中，可能需要每日给药以评估其对肿瘤生长的影响。疗效终点包括肿瘤体积、免疫细胞浸润以及靶组织中精氨酸酶活性和NO生成的标志物。药效学生物标志物用于确认靶点结合情况。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
诺诺哈单乙酸酯是一种小分子（分子量 236.23），可溶于水和二甲基亚砜 (DMSO)。建议以粉末形式储存于 -20°C。其详细的药代动力学参数，例如半衰期和生物利用度，在公开资料中尚未得到充分记载，但其在动物模型中的应用表明，它适用于体内研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
由于nor-NOHA单乙酸酯是一种研究用试剂，并非用于人类治疗，因此其毒理学数据有限。在有效剂量的临床前研究中，该试剂通常耐受性良好，但其安全性尚未通过正式的毒理学研究确定。与所有研究用化学品一样，应遵循标准的实验室安全预防措施。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ω-羟基-nL-精氨酸是一种L-α-氨基酸。N-羟基-nL-精氨酸（nor-NOHA）正在临床试验NCT02009527（缺血再灌注损伤中的精氨酸酶抑制剂）中进行研究。包括慢性粒细胞白血病（CML）在内的癌细胞依赖于低氧环境在宿主体内持续存在并逃避免疫治疗。因此，针对癌细胞特异性低氧反应的药物研发引起了广泛关注。然而，白血病研究面临的一大挑战是识别白血病细胞和正常细胞之间差异表达的、可靶向的低氧反应。此前，我们发现尿素循环中的一种酶——精氨酸酶2（ARG2）在CML细胞中过表达，但在正常祖细胞中则不表达。ARG2是低氧诱导因子（HIF1-α和HIF2-α）的靶点，并且是细胞生长所需的多胺合成所必需的。因此，我们研究了临床验证的精氨酸酶抑制剂Nω-羟基-去甲精氨酸（nor-NOHA）在缺氧条件下对白血病细胞的疗效。值得注意的是，nor-NOHA在缺氧条件下能有效诱导表达ARG2的细胞凋亡，但在常氧条件下无效。与BCR-ABL1激酶抑制剂联合治疗可克服缺氧介导的耐药性。虽然nor-NOHA本身在靶向白血病缺氧反应方面显示出潜力，但我们意外地发现其抗白血病活性与ARG2抑制无关。使用CRISPR/Cas9敲除ARG2基因对白血病细胞的活力及其对nor-NOHA的敏感性没有影响。ARG2敲除和nor-NOHA对细胞呼吸的不同影响进一步证实了这一差异。总之，我们发现nor-NOHA在表达ARG2的缺氧细胞中具有显著但非靶向的抗白血病活性。由于nor-NOHA已用于临床试验，并广泛用于内皮功能障碍、免疫抑制和代谢的研究，因此在将其活性归因于精氨酸酶抑制之前，必须仔细评估其各种生物学效应。[1]nor-NOHA单乙酸酯（CAS：2250019-93-1）是一种特性明确且广泛用于研究精氨酸酶生物学的工具。其水溶性和强效的抑制活性使其成为体外和体内实验中便捷有效的化合物。该化合物在阐明精氨酸酶在免疫抑制和血管功能障碍中的作用方面发挥了重要作用，并且仍然是开发更具选择性的精氨酸酶抑制剂的重要参考。
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| 分子式 |
C7H16N4O5
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|---|---|
| 分子量 |
236.225741386414
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| 精确质量 |
236.112
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| 元素分析 |
C, 35.59; H, 6.83; N, 23.72; O, 33.86
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| CAS号 |
2250019-93-1
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| 相关CAS号 |
189302-40-7; 1140844-63-8 (acetate); 291758-32-2 (HCl); 2250019-93-1 (nor-NOHA monoacetate)
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| PubChem CID |
131648256
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
171
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
16
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| 分子复杂度/Complexity |
213
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
OC([C@H](CC/N=C(\N)/NO)N)=O.OC(C)=O
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| InChi Key |
RYUGHGOGNIYFKU-DFWYDOINSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H12N4O3.C2H4O2/c6-3(4(10)11)1-2-8-5(7)9-12;1-2(3)4/h3,12H,1-2,6H2,(H,10,11)(H3,7,8,9);1H3,(H,3,4)/t3-;/m0./s1
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| 化学名 |
acetic acid;(2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid
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| 别名 |
Nor NOHA monoacetate; 2250019-93-1; nor-NOHA (monoacetate); nor-NOHA monoacetate; N-OMega-hydroxy-L-norarginine acetate salt; AKOS032962868; HY-112885B; N-OMega-hydroxy-L-norarginineacetatesalt;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~423.32 mM)
H2O : ~50 mg/mL (~211.66 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (423.32 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.2332 mL | 21.1658 mL | 42.3316 mL | |
| 5 mM | 0.8466 mL | 4.2332 mL | 8.4663 mL | |
| 10 mM | 0.4233 mL | 2.1166 mL | 4.2332 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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