nor-NOHA HCl

别名: N-Hydroxy-nor-L-Arginine; H-norArg(delta-OH)-OH; 189302-40-7; 291758-32-2; Nomega-hydroxy-nor-L-arginine; N-Hydroxy-nor-arginine; N-Hydroxy-nor-L-arginine; (2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid; NOR-N-OMEGA-HYDROXY-L-ARGININE; nor-NOHA HCl; nor-NOHA hydrochloride. Nω-羟基或-L-精氨酸盐酸盐
目录号: V56774 纯度: ≥98%
Nor-NOHA,也称为 N-羟基-正-L-精氨酸,是一种精氨酸酶抑制剂。
nor-NOHA HCl CAS号: 291758-32-2
产品类别: Others 11
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格
500mg
1g
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Other Forms of nor-NOHA HCl:

  • nor-NOHA
  • nor-NOHA di-acetate
  • nor-NOHA monoacetate
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产品描述
Nor-NOHA,也称为 N-羟基-正-L-精氨酸,是一种精氨酸酶抑制剂。 nor-NOHA 在缺氧条件下特异性引起白血病细胞凋亡,但 CRISPR/Cas9 排除了精氨酸酶 2 (ARG2) 作为功能靶点。 Nor-NOHA可通过抑制Arg1引起细胞凋亡并抑制HepG2细胞的侵袭和迁移能力,这与iNOS表达增加和NO浓度升高有关。
生物活性&实验参考方法
靶点
Arginase
体外研究 (In Vitro)
精氨酸酶抑制剂Nor-NOHA可诱导表达ARG2的细胞凋亡。 Nor-NOHA可减弱缺氧介导的对伊马替尼的耐药性。 Nor-NOHA诱导的细胞死亡与ARG2无关。 ARG2敲除和NOHA对细胞呼吸有明显的影响。 在缺氧条件下,表达ARG2−的白血病细胞,包括CML祖细胞,对精氨酸酶抑制剂和Nor-NOHA敏感。因此,Nor-NOHA可以克服缺氧介导的CML祖细胞伊马替尼耐药。出乎意料的是,通过RNAi和CRISPR/Cas9诱变的广泛验证,我们发现ARG2的功能丧失并不是Nor-NOHA处理产生的表型的原因,尽管Nor-NOHA确实抑制了ARG2的精氨酸酶活性。[1]
体内研究 (In Vivo)
nor-NOHA(100 mg/kg,静脉注射,一次)可显著减少雄性 Sprague-Dawley 大鼠的梗死面积 [2]。nor-NOHA(100 mg/kg,静脉注射,一次)可增加雄性 Sprague-Dawley 大鼠血浆瓜氨酸和亚硝酸盐水平,并降低血浆鸟氨酸水平 [2]
酶活实验
精氨酸酶活性测定[1]
精氨酸酶活性经修饰后按描述进行分析。计数细胞,等量细胞在50μl裂解缓冲液(PBS加1mM EDTA, 0.1% Triton X−100和蛋白酶抑制剂)中裂解,4℃下14000 g离心15分钟。将上清液与50μl新配制的活化缓冲液(10mM MnCl2, 50mM Tris-HCl pH7.5)和50μl 0.5M精氨酸混合,在56℃下加热10分钟。然后,加入800μl酸性溶液(H2SO4 (96%)/H3PO4 (85%)/H2O, 1/3/7, v/v/v)和25μl 9% α -异硝基丙烯酮(乙醇),在100℃下加热15 min。让这种混合物在黑暗中显色。最后将250μl转移到96孔板上,在550nm处测量外径。
细胞实验
Seahorse分析仪测量细胞呼吸[1]
0.1x106 K562细胞每孔镀于聚L -赖氨酸包被的XF - 24孔细胞培养微孔板上,XF Assay培养基中添加4.5 g/L葡萄糖和1mM丙酮酸钠。将细胞自旋固定在200g的微孔板上1分钟。细胞耗氧率(OCR)、细胞外酸化率(ECAR)和光子产生率(PPR)采用Seahorse Bioscience公司的XF24分析仪进行测定。根据制造商的说明进行测量,使用低霉素,羰基氰化物- 4 -(三氟甲氧基)苯腙(FCCP)和鱼藤酮&抗霉素A (R/A;所有来自Sigma - Aldrich)在指定的浓度。数据分析使用Seahorse XF软件。
动物实验
Sprague-Dawley rats were subjected to 30 min of coronary artery ligation, followed by 2 h of reperfusion. The animals were given either saline, or the arginase inhibitor N-omega-hydroxy-nor-l-arginine (nor-NOHA) with or without the NO scavenger carboxy-2-phenyl-4,4,5,5-tetramethyl-imidazoline-1-oxyl-3-oxide (cPTIO) or the NOS inhibitor N(G)-monomethyl-l-arginine (l-NMMA) iv 15 min before ischaemia. The infarct size was 79 +/- 4% of the area at risk in the control group. Nor-NOHA treatment reduced the infarct size to 39 +/- 7% (P < 0.001). Administration of cPTIO or l-NMMA completely abolished the protective effect of nor-NOHA. Expression of arginase I was significantly (P < 0.05) increased in ischaemic myocardium. Nor-NOHA treatment resulted in higher plasma levels of nitrite (P < 0.05) and a 10-fold increase in the citrulline/ornithine ratio (P < 0.001), indicating a shift in arginine utilization towards NOS.
Conclusion: Inhibition of arginase protects from myocardial infarction by a mechanism that is dependent on NOS activity and bioavailability of NO by shifting arginine utilization from arginase towards NOS. These findings suggest that targeting of arginase is a promising future therapeutic strategy for protection against myocardial IR injury.[2]
参考文献

[1]. The arginase inhibitor Nω-hydroxy-nor-arginine (nor-NOHA) induces apoptosis in leukemic cells specifically under hypoxic conditions but CRISPR/Cas9 excludes arginase 2 (ARG2) as the functional target. PLoS One. 2018 Oct 11;13(10):e0205254.

[2]. Arginase inhibition mediates cardioprotection during ischaemia-reperfusion. Cardiovasc Res. 2010 Jan 1;85(1):147-54.

其他信息
Nomega-hydroxy-nor-l-arginine is a L-alpha-amino acid.
N-Hydroxy-nor-L-arginine (nor-NOHA) is under investigation in clinical trial NCT02009527 (Arginase Inhibition in Ischemia-reperfusion Injury).
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C5H14CL2N4O3
分子量
249.092
精确质量
176.091
元素分析
C, 24.11; H, 5.67; Cl, 28.46; N, 22.49; O, 19.27
CAS号
291758-32-2
相关CAS号
189302-40-7; 1140844-63-8 (acetate); 291758-32-2 (HCl); 2250019-93-1 (nor-NOHA monoacetate)
PubChem CID
446124
外观&性状
Colorless to light yellow solid powder
LogP
-4.6
tPSA
131.46
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
5
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
12
分子复杂度/Complexity
182
定义原子立体中心数目
1
SMILES
ON/C(=N/CC[C@@H](C(=O)O)N)/N
InChi Key
AKPIIXWPTMFQQJ-QTNFYWBSSA-N
InChi Code
InChI=1S/C5H12N4O3.2ClH/c6-3(4(10)11)1-2-8-5(7)9-12;;/h3,12H,1-2,6H2,(H,10,11)(H3,7,8,9);2*1H/t3-;;/m0../s1
化学名
(S,E)-2-amino-4-(2-hydroxyguanidino)butanoic acid dihydrochloride
别名
N-Hydroxy-nor-L-Arginine; H-norArg(delta-OH)-OH; 189302-40-7; 291758-32-2; Nomega-hydroxy-nor-L-arginine; N-Hydroxy-nor-arginine; N-Hydroxy-nor-L-arginine; (2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid; NOR-N-OMEGA-HYDROXY-L-ARGININE; nor-NOHA HCl; nor-NOHA hydrochloride.
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.0146 mL 20.0731 mL 40.1461 mL
5 mM 0.8029 mL 4.0146 mL 8.0292 mL
10 mM 0.4015 mL 2.0073 mL 4.0146 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
Arginase Inhibition in Ischemia-reperfusion Injury
CTID: NCT02009527
Phase: Phase 1
Status: Completed
Date: 2015-04-20
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