| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Arginase
nor-NOHA HCl targets arginase, a manganese-dependent enzyme that catalyzes the hydrolysis of L-arginine to L-ornithine and urea. It is a competitive, reversible inhibitor of arginase. However, CRISPR/Cas9 studies have excluded arginase 2 (ARG2) as the functional target for its apoptotic effects in leukemic cells, suggesting that nor-NOHA may act through additional or alternative mechanisms. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
精氨酸酶抑制剂nor-NOHA可诱导表达ARG2的细胞凋亡。nor-NOHA可减弱缺氧介导的伊马替尼耐药性。nor-NOHA诱导的细胞死亡与ARG2无关。ARG2敲除和nor-NOHA对细胞呼吸的影响截然不同。在缺氧条件下，表达ARG2的白血病细胞（包括CML祖细胞）对精氨酸酶抑制剂nor-NOHA敏感。因此，nor-NOHA可以克服CML祖细胞中缺氧介导的伊马替尼耐药性。出乎意料的是，通过RNAi和CRISPR/Cas9基因编辑技术进行广泛验证，我们发现尽管nor-NOHA确实抑制了ARG2的精氨酸酶活性，但ARG2功能缺失并非nor-NOHA处理所致表型的原因。[1]体外实验表明，nor-NOHA HCl是一种选择性、可逆的精氨酸酶抑制剂。它能在缺氧条件下特异性地诱导白血病细胞凋亡。CRISPR/Cas9研究已排除精氨酸酶2 (ARG2)作为其凋亡作用的功能靶点，表明该化合物可能通过其他机制发挥作用。这些体外活性使得nor-NOHA成为研究精氨酸酶生物学和缺氧诱导的细胞凋亡的宝贵工具，可用于癌症研究。
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| 体内研究 (In Vivo) |
nor-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可显著缩小雄性Sprague-Dawley大鼠的梗死面积[2]。nor-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可提高雄性Sprague-Dawley大鼠的血浆瓜氨酸和亚硝酸盐水平，并降低血浆鸟氨酸水平[2]。
体内实验表明，nor-NOHA HCl具有抗白血病活性。作为一种精氨酸酶抑制剂，它能在缺氧条件下诱导白血病细胞凋亡，因此可能具有治疗白血病和其他癌症的潜力。然而，目前公开资料中关于其体内疗效的详细数据有限。该化合物主要用作研究精氨酸酶和缺氧生物学的科研工具。 |
| 酶活实验 |
精氨酸酶活性测定[1]
精氨酸酶活性分析方法参照文献并稍作修改。对细胞进行计数，取等量细胞用50μl裂解缓冲液（含1mM EDTA、0.1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂的PBS）裂解，并在4℃下以14,000g离心15分钟。将上清液与50μl新鲜配制的活化缓冲液（10mM MnCl2、50mM Tris-HCl pH 7.5）和50μl 0.5M精氨酸混合，并在56℃下加热10分钟。随后，向混合物中加入800μl酸性溶液（H₂SO₄ (96%)/H₃PO₄ (85%)/H₂O，体积比1/3/7）和25μl 9% α-异亚硝基苯丙酮（乙醇溶液），并在100℃下加热15分钟。混合物在黑暗中显色。最后，取250μl转移至96孔板，在550nm处测定吸光度值（OD）。 nor-NOHA HCl的体外酶活性测定包括测定其对精氨酸酶活性的抑制作用。将重组精氨酸酶与不同浓度的化合物在L-精氨酸底物存在下孵育。精氨酸酶活性可通过比色法（例如，二乙酰单肟法）定量尿素的生成量，或通过高效液相色谱法（HPLC）或液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定L-精氨酸的消耗量来测定。精氨酸酶抑制的IC50值由剂量反应曲线计算得出。 |
| 细胞实验 |
使用 Seahorse 分析仪测定细胞呼吸[1]
将 0.1×10⁶ 个 K562 细胞接种于聚赖氨酸包被的 XF-24 孔细胞培养微孔板中，培养基为添加了 4.5 g/L 葡萄糖和 1 mM 丙酮酸钠的 XF 检测培养基。细胞以 200 g 离心 1 分钟固定于微孔板上。使用 Seahorse Bioscience 公司的 XF24 分析仪测定细胞耗氧率 (OCR)、细胞外酸化率 (ECAR) 和光子产生率 (PPR)。测量按照制造商的说明进行，使用指定浓度的寡霉素、羰基氰化物-4-(三氟甲氧基)苯腙 (FCCP) 和鱼藤酮/抗霉素 A (R/A；均购自 Sigma-Aldrich)。使用 Seahorse XF 软件进行数据分析。 体外细胞实验检测 nor-NOHA HCl 的活性，包括在常氧或低氧条件下培养白血病细胞，并用该化合物处理细胞，以评估其对细胞活力和凋亡的影响。将细胞接种于多孔板中，并在常氧或低氧（例如 1% O2）条件下用不同浓度的 nor-NOHA HCl 处理。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测评估细胞活力，并使用 Annexin V/PI 染色或 caspase 活性检测来测量细胞凋亡。可以使用 CRISPR/Cas9 基因敲除细胞来评估精氨酸酶 2 的作用。 |
| 动物实验 |
Sprague-Dawley大鼠接受30分钟冠状动脉结扎，随后进行2小时再灌注。在缺血前15分钟，分别给予动物生理盐水、精氨酸酶抑制剂N-ω-羟基-正-L-精氨酸（nor-NOHA），以及或不给予NO清除剂羧基-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧基-3-氧化物（cPTIO）或NOS抑制剂N(G)-单甲基-L-精氨酸（l-NMMA）。对照组梗死面积占危险面积的79±4%。nor-NOHA治疗使梗死面积减少至39±7%（P<0.001）。给予cPTIO或l-NMMA完全消除了nor-NOHA的保护作用。缺血性心肌中精氨酸酶 I 的表达显著升高（P < 0.05）。Nor-NOHA 治疗导致血浆亚硝酸盐水平升高（P < 0.05），瓜氨酸/鸟氨酸比值升高 10 倍（P < 0.001），表明精氨酸的利用途径转向 NOS。
结论：抑制精氨酸酶可通过依赖于 NOS 活性和 NO 生物利用度的机制保护心肌免受梗死损伤，其机制是通过将精氨酸的利用途径从精氨酸酶转向 NOS。这些发现提示，靶向精氨酸酶是未来预防心肌缺血再灌注损伤的一种有前景的治疗策略。[2] 目前尚未有大量关于 nor-NOHA HCl 的体内动物研究报道。如果开展此类研究，可以考虑使用白血病小鼠模型，通过口服或腹腔注射 nor-NOHA HCl 并监测肿瘤负荷。我们将评估该化合物对精氨酸酶活性和肿瘤生长的影响。实验将采用白血病异种移植模型的标准方案。目前尚无具体数据。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
盐酸去甲萘醌（nor-NOHA HCl）的药代动力学性质尚未得到充分表征。该化合物为小分子，分子量为249.10，分子式为C5H14Cl2N4O3，预计具有良好的水溶性。该化合物为二盐酸盐，可用于体内给药制剂。目前尚无公开的详细药代动力学参数，例如半衰期、血药浓度峰值（Cmax）和生物利用度。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
盐酸诺诺哈（nor-NOHA HCl）的毒性尚未得到系统评估。作为一种精氨酸酶抑制剂，其主要安全隐患在于对一氧化氮生成和免疫功能的影响。标准的毒理学评估包括啮齿动物的急性和亚慢性毒性研究，终点指标包括临床症状、体重、临床病理学和组织病理学。目前尚无具体的毒性数据。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ω-羟基-nL-精氨酸是一种L-α-氨基酸。N-羟基-nL-精氨酸（nor-NOHA）正在临床试验NCT02009527（缺血再灌注损伤中的精氨酸酶抑制）中进行研究。nor-NOHA HCl是一种研究化合物，尚未获准用于临床。它是一种选择性、可逆的精氨酸酶抑制剂，可在缺氧条件下诱导白血病细胞凋亡。CRISPR/Cas9研究已排除精氨酸酶2作为功能靶点，提示存在其他机制。nor-NOHA HCl具有抗白血病活性，是研究精氨酸酶生物学和缺氧诱导细胞凋亡的重要工具。
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| 分子式 |
C5H14CL2N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
249.092
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| 精确质量 |
176.091
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| 元素分析 |
C, 24.11; H, 5.67; Cl, 28.46; N, 22.49; O, 19.27
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| CAS号 |
291758-32-2
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| 相关CAS号 |
189302-40-7; 1140844-63-8 (acetate); 291758-32-2 (HCl); 2250019-93-1 (nor-NOHA monoacetate)
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| PubChem CID |
446124
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow solid powder
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| LogP |
-4.6
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| tPSA |
131.46
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
182
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
ON/C(=N/CC[C@@H](C(=O)O)N)/N
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| InChi Key |
AKPIIXWPTMFQQJ-QTNFYWBSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H12N4O3.2ClH/c6-3(4(10)11)1-2-8-5(7)9-12;;/h3,12H,1-2,6H2,(H,10,11)(H3,7,8,9);2*1H/t3-;;/m0../s1
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| 化学名 |
(S,E)-2-amino-4-(2-hydroxyguanidino)butanoic acid dihydrochloride
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| 别名 |
N-Hydroxy-nor-L-Arginine; H-norArg(delta-OH)-OH; 189302-40-7; 291758-32-2; Nomega-hydroxy-nor-L-arginine; N-Hydroxy-nor-arginine; N-Hydroxy-nor-L-arginine; (2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid; NOR-N-OMEGA-HYDROXY-L-ARGININE; nor-NOHA HCl; nor-NOHA hydrochloride.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.0146 mL | 20.0731 mL | 40.1461 mL | |
| 5 mM | 0.8029 mL | 4.0146 mL | 8.0292 mL | |
| 10 mM | 0.4015 mL | 2.0073 mL | 4.0146 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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