| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Arginase
The primary target of nor-NOHA di-acetate is arginase, a binuclear manganese metalloenzyme that catalyzes the hydrolysis of L-arginine to L-ornithine and urea. Arginase exists in two isoforms: arginase I (cytosolic, primarily in the liver) and arginase II (mitochondrial, in various tissues). By inhibiting arginase, nor-NOHA increases the availability of L-arginine for nitric oxide synthase (NOS), thereby enhancing the production of nitric oxide (NO). This mechanism has potential therapeutic applications in conditions where NO signaling is impaired, such as cardiovascular diseases, erectile dysfunction, and pulmonary hypertension. nor-NOHA is a potent and selective arginase inhibitor with Ki values in the nanomolar range. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在低氧（1.5% O2）条件下，nor-NOHA（0.1-1 mM，72 h）以剂量依赖的方式诱导 K562 细胞凋亡[1]。nor-NOHA（1 mM，72 h）可减弱 K562 或 KCL22 细胞中由低氧介导的伊马替尼耐药性[1]。
体外实验表明，nor-NOHA 二乙酸酯是一种强效且选择性的精氨酸酶抑制剂。其活性通常通过精氨酸酶活性测定来测量，该测定方法监测 L-精氨酸生成尿素的量。IC50 或 Ki 值由剂量反应曲线确定。为了确认其特异性，需要评估该化合物对精氨酸酶相对于其他酶（包括一氧化氮合酶 (NOS)）的选择性。通过测量 NO 水平的细胞实验，证实了该化合物增强 NO 生成的能力。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
or-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可显著缩小雄性Sprague-Dawley大鼠的梗死面积[2]。nor-NOHA（100 mg/kg，静脉注射，单次）可提高雄性Sprague-Dawley大鼠的血浆瓜氨酸和亚硝酸盐水平，并降低血浆鸟氨酸水平[2]。体内研究表明，nor-NOHA二乙酸酯在心血管疾病、勃起功能障碍以及其他NO信号通路受损的疾病中具有潜在的治疗应用价值。该化合物通过抑制精氨酸酶并增强NO的生成，可以改善血管舒张、降低血压并改善勃起功能。此外，该化合物对免疫功能和伤口愈合的影响也已被研究。尽管现有文献中缺乏详细的体内疗效数据，但其作用机制支持其潜在的治疗应用。
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| 酶活实验 |
精氨酸酶活性测定[1]
精氨酸酶活性分析方法参照文献并稍作修改。对细胞进行计数，取等量细胞用50μl裂解缓冲液（含1mM EDTA、0.1% Triton X-100和蛋白酶抑制剂的PBS）裂解，并在4℃下以14,000g离心15分钟。将上清液与50μl新鲜配制的活化缓冲液（10mM MnCl2、50mM Tris-HCl pH 7.5）和50μl 0.5M精氨酸混合，并在56℃下加热10分钟。随后，向混合物中加入800μl酸性溶液（H₂SO₄ (96%)/H₃PO₄ (85%)/H₂O，体积比1/3/7）和25μl 9% α-异亚硝基丙苯酮（溶于乙醇），并在100℃下加热15分钟。混合物在黑暗中显色。最后，取250μl转移至96孔板，在550nm处测定吸光度值（OD）。 nor-NOHA二乙酸酯的体外酶/受体结合试验包括使用纯化的精氨酸酶（精氨酸酶I或II）进行精氨酸酶抑制试验。通过监测在酶存在和不同浓度抑制剂存在下L-精氨酸生成尿素的量来测定化合物的抑制活性。尿素的生成通常使用比色法测定（例如，二乙酰单肟法）。 IC50 和 Ki 值由剂量反应曲线确定。通过对一氧化氮合酶 (NOS) 和其他酶的选择性分析来评估化合物的特异性。 |
| 细胞实验 |
使用 Seahorse 分析仪测定细胞呼吸[1]
将 0.1×10⁶ 个 K562 细胞接种于聚赖氨酸包被的 XF-24 孔细胞培养微孔板中，培养基为添加了 4.5 g/L 葡萄糖和 1 mM 丙酮酸钠的 XF 检测培养基。细胞以 200 g 离心 1 分钟固定于微孔板上。使用 Seahorse Bioscience 公司的 XF24 分析仪测定细胞耗氧率 (OCR)、细胞外酸化率 (ECAR) 和光子产生率 (PPR)。测量按照制造商的说明进行，使用指定浓度的寡霉素、羰基氰化物-4-(三氟甲氧基)苯腙 (FCCP) 和鱼藤酮/抗霉素 A (R/A；均购自 Sigma-Aldrich)。使用 Seahorse XF 软件进行数据分析。 在表达精氨酸酶的细胞系（例如巨噬细胞、内皮细胞或平滑肌细胞）中进行 nor-NOHA 二乙酸酯的体外细胞活性测定。用不同浓度的 nor-NOHA 处理细胞，并通过评估尿素生成量来测定精氨酸酶活性。使用 Griess 法或荧光 NO 指示剂测定 NO 生成量。同时评估该化合物对细胞增殖、迁移和其他功能反应的影响。这些测定证实 nor-NOHA 在细胞环境中与其靶点结合，并产生预期的 NO 生成增强作用。 |
| 动物实验 |
Sprague-Dawley大鼠接受30分钟冠状动脉结扎，随后进行2小时再灌注。在缺血前15分钟，分别给予动物生理盐水、精氨酸酶抑制剂N-ω-羟基-正-L-精氨酸（nor-NOHA），以及或不给予NO清除剂羧基-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧基-3-氧化物（cPTIO）或NOS抑制剂N(G)-单甲基-L-精氨酸（l-NMMA）。对照组梗死面积占危险面积的79±4%。nor-NOHA治疗使梗死面积减少至39±7%（P<0.001）。给予cPTIO或l-NMMA完全消除了nor-NOHA的保护作用。缺血性心肌中精氨酸酶 I 的表达显著升高（P < 0.05）。Nor-NOHA 治疗导致血浆亚硝酸盐水平升高（P < 0.05），瓜氨酸/鸟氨酸比值升高 10 倍（P < 0.001），表明精氨酸的利用途径向 NOS 转移。
结论：抑制精氨酸酶可通过依赖于 NOS 活性和 NO 生物利用度的机制保护心肌免受梗死损伤，其机制是通过将精氨酸的利用途径从精氨酸酶转移到 NOS。这些发现提示，靶向精氨酸酶是未来预防心肌缺血再灌注损伤的一种有前景的治疗策略。[2] 在心血管疾病、勃起功能障碍和其他疾病的动物模型中，已开展了 nor-NOHA 二乙酸酯的体内动物研究。动物通过口服或腹腔注射给药，并根据具体的疾病模型评估结果。在心血管模型中，评估血压和血管功能。在勃起功能障碍模型中，评估勃起功能。进行药代动力学研究以确定化合物的生物利用度、半衰期和组织分布。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
去甲诺哈二乙酸酯的药代动力学性质表明，其分子量为336.30，分子式为C12H20N4O8。该化合物是去甲诺哈的二乙酸盐，提高了其溶解度和稳定性。它可溶于水和二甲基亚砜（DMSO）。储存时，应在适宜的条件下保存粉末以保持其稳定性。其理化性质表明，它具有良好的类药特性。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
nor-NOHA二乙酸酯的毒理学信息主要来源于其在临床前研究中作为研究化合物的应用。作为一种精氨酸酶抑制剂，其潜在的靶向作用可能包括增强NO生成，这可能导致低血压和其他心血管效应。治疗开发需要进行全面的毒理学研究，包括评估心血管、肾脏和免疫功能。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
ω-羟基-nL-精氨酸是一种L-α-氨基酸。N-羟基-nL-精氨酸（nor-NOHA）正在临床试验NCT02009527（缺血再灌注损伤中的精氨酸酶抑制剂）中进行研究。包括慢性粒细胞白血病（CML）在内的癌细胞依赖于低氧环境在宿主体内持续存在并逃避免疫治疗。因此，针对癌细胞特异性低氧反应的药物研发引起了广泛关注。然而，白血病研究面临的一大挑战是识别白血病细胞和正常细胞之间差异表达的、可靶向的低氧反应。此前，我们发现尿素循环中的一种酶——精氨酸酶2（ARG2）在CML细胞中过表达，但在正常祖细胞中则不表达。ARG2是低氧诱导因子（HIF1-α和HIF2-α）的靶点，并且是细胞生长所需的多胺合成所必需的。因此，我们研究了临床验证的精氨酸酶抑制剂Nω-羟基-去甲精氨酸（nor-NOHA）在缺氧条件下对白血病细胞的疗效。值得注意的是，nor-NOHA在缺氧条件下能有效诱导表达ARG2的细胞凋亡，但在常氧条件下无效。与BCR-ABL1激酶抑制剂联合治疗可克服缺氧介导的耐药性。虽然nor-NOHA本身在靶向白血病缺氧反应方面显示出潜力，但我们意外地发现其抗白血病活性与ARG2抑制无关。使用CRISPR/Cas9敲除ARG2基因对白血病细胞的活力及其对nor-NOHA的敏感性没有影响。ARG2敲除和nor-NOHA对细胞呼吸的不同影响进一步证实了这一差异。总之，我们发现nor-NOHA在表达ARG2的缺氧细胞中具有显著但非靶向的抗白血病活性。由于nor-NOHA已用于临床试验，并广泛用于内皮功能障碍、免疫抑制和代谢的研究，因此在将其活性归因于精氨酸酶（ARG）抑制之前，必须仔细评估其各种生物学效应。[1]
nor-NOHA二乙酸酯是一种强效且选择性的精氨酸酶抑制剂，精氨酸酶是一种与一氧化氮合酶竞争L-精氨酸的酶。nor-NOHA通过抑制精氨酸酶来增强一氧化氮的生成。该化合物在心血管疾病和勃起功能障碍方面具有潜在的应用价值。nor-NOHA二乙酸酯尚未获准用于临床，可从研究化学品供应商处获得，用于临床前研究。 |
| 分子式 |
C9H20N4O7
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|---|---|
| 分子量 |
296.277702331543
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| 精确质量 |
296.133
|
| 元素分析 |
C, 36.49; H, 6.80; N, 18.91; O, 37.80
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| CAS号 |
1140844-63-8
|
| 相关CAS号 |
189302-40-7; 1140844-63-8 (acetate); 291758-32-2 (HCl); 2250019-93-1 (nor-NOHA monoacetate)
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| PubChem CID |
16760508
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
209
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| 氢键供体(HBD)数目 |
7
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
213
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
OC([C@H](CC/N=C(\N)/NO)N)=O.OC(C)=O.OC(C)=O
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| InChi Key |
PQFYTZJPYBMTCT-QTNFYWBSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H12N4O3.2C2H4O2/c6-3(4(10)11)1-2-8-5(7)9-12;2*1-2(3)4/h3,12H,1-2,6H2,(H,10,11)(H3,7,8,9);2*1H3,(H,3,4)/t3-;;/m0../s1
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| 化学名 |
acetic acid;(2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid
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| 别名 |
nor-NOHA acetate; 1140844-63-8; nor-NOHA (acetate); acetic acid;(2S)-2-amino-4-[[amino-(hydroxyamino)methylidene]amino]butanoic acid; 2S-amino-4-[[(hydroxyamino)iminomethyl]amino]-butanoic acid, diacetate; Nor-NOHA Dihydrochloride; N-Omega-hydroxy-l-norarginine diacetate salt; nor-NOHA acetate?;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~200 mg/mL (~675.04 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3752 mL | 16.8759 mL | 33.7519 mL | |
| 5 mM | 0.6750 mL | 3.3752 mL | 6.7504 mL | |
| 10 mM | 0.3375 mL | 1.6876 mL | 3.3752 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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