| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 5g |
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| 10g |
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| 25g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Endogenous Metabolite; apoptosis and autophagy[1]
The targets of Norcantharidin (NCTD) include EGFR (epidermal growth factor receptor) and c-Met (mesenchymal-epithelial transition factor) [1] Norcantharidin (NCTD) also targets Protein Phosphatase 2A (PP2A), Wnt/β-catenin signaling pathway, Caspase family proteins, AMPK pathway, and platelet α2 integrin [3] Additional targets of Norcantharidin (NCTD) involve PI3K, NF-κB, MAPK, JNK, PP1, PP2B, Cdc6, cyclin D1, CDKs, CDKIs, YAP, ERK, Ets1, Sp1, STAT1, MMPs, VEGF/VEGFR, EphA2, FAK, TSP, Ang-2, Ln-5γ2, TIMP [4] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性:去甲斑蝥素(也称为 NCTD)是 c-Met 和 EGFR 的双重抑制剂。它具有抗癌活性,可诱导 HCT116 和 HT29 细胞的细胞周期停滞在 G2/M 期。 NCTD不仅抑制结肠癌细胞中总EGFR和p-EGFR(磷酸化EGFR)的表达,而且抑制总c-Met和pc-Met(磷酸化c-Met)的表达。细胞测定:去甲斑蝥素也是1型、2A型和2B型蛋白磷酸酶的抑制剂,可使K562人骨髓性白血病细胞的细胞周期阻滞在G2/M期,并抑制HL-60细胞的DNA合成。将悬浮在完全培养基中的 HT29 和 HCT116 细胞接种到 96 孔板中(2000 个细胞/孔)。在培养箱中生长 24 小时后,吸出培养基,并将含有系列浓度 NCTD 的 0.2 mL 完整培养基添加到每个孔中。将板孵育 24、48 或 72 小时后,向每个孔中添加 20 μL 刃天青(2 mg/mL 溶解在水中)。在培养箱中于 37°C 孵育 16 小时后,通过 Spectramax M5 读板器使用 544 nm 激发波长和 595 nm 发射波长监测荧光信号。每孔中的活细胞数量与测定中测得的相对荧光单位 (RFU) 成正比。
1. 结肠癌细胞抗增殖活性:在HCT116和HT29人结肠癌细胞系中测试Norcantharidin (NCTD)(浓度6.25、12.5、25、50、100、150、200 μM)处理24 h、48 h、72 h后的效果,结果显示NCTD以剂量和时间依赖的方式抑制细胞活力,[1] 2. 结肠癌细胞周期阻滞:流式细胞术分析表明,Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM)处理24 h后,可诱导HCT116和HT29细胞发生G2/M期周期阻滞;统计学分析证实,对照组与NCTD处理组在G0/G1、S、G2/M期的细胞数量存在显著差异(p < 0.001)[1] 3. 结肠癌细胞凋亡诱导:Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM)处理48 h后,可诱导HCT116和HT29细胞发生早期和晚期凋亡(与对照组相比p < 0.001)。蛋白质印迹分析显示,NCTD以剂量依赖方式上调裂解型Caspase-3(HCT116:1.0~10.5倍;HT29:1.0~5.9倍)、裂解型PARP(HCT116:1.0~5.5倍;HT29:1.0~33.0倍)和Bax(HCT116:1.0~1.6倍;HT29:1.0~1.8倍)的表达,同时下调Cyclin D1(HCT116:1.0~0.2倍;HT29:1.0~0.3倍)、CDK-4(HCT116:1.0~0.4倍;HT29:1.0~0.3倍)和Rb(HCT116:1.0~0.1倍;HT29:1.0~0.1倍)的表达(条带强度以β-肌动蛋白归一化,标准差±15%)[1] 4. 抑制EGFR和c-Met表达/磷酸化:Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM,处理72 h)可抑制HCT116和HT29细胞中总EGFR、磷酸化EGFR(p-EGFR)、总c-Met和磷酸化c-Met(p-c-Met)的表达;与蛋白酶体抑制剂MG132(0.2 μM)联合处理,可基本恢复50 μM NCTD处理48 h的HCT116细胞中EGFR的表达;NCTD对EGFR/c-Met的抑制效果与吉非替尼(EGFR酪氨酸激酶抑制剂)相当[1] 5. 体外广谱抗癌机制:Norcantharidin (NCTD)在体外可抑制细胞增殖、诱导凋亡/自噬、抑制迁移/转移、调节免疫、抑制淋巴管生成;其可抑制PP2A、调节Wnt/β-连环蛋白信号通路、影响c-Met/EGFR通路[3] 6. 体外抗血小板活性:Norcantharidin (NCTD)在体外可抑制血小板信号传导、下调α2整合素[3] 7. 体外免疫调节作用:Norcantharidin (NCTD)在体外可调节巨噬细胞极化和脂多糖(LPS)介导的免疫反应[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
去甲斑蝥素 (NCTD) 以剂量和时间依赖性方式抑制异种移植肿瘤的生长。与对照组相比,NTCD组肿瘤体积减小,肿瘤抑制率增加。与对照组相比,NTCD组细胞凋亡率增加,S期细胞百分比减少。观察NCTD诱导的异种移植肿瘤细胞的核皱缩、染色质聚集、染色体浓缩、典型凋亡小体等凋亡形态学变化。与对照组相比,NCTD组cyclin-D1、Bcl-2和survivin蛋白/mRNA表达显着降低,p27和Bax蛋白/mRNA表达升高。 NCTD在临床上被报道为抗肝癌、食管癌、胃癌以及白细胞减少症的抗肿瘤药物。
1. 胆囊癌异种移植瘤抗肿瘤活性:Norcantharidin (NCTD)以剂量和时间依赖的方式抑制裸鼠人胆囊癌GBC-SD异种移植瘤的生长;NCTD组肿瘤体积为5.61±0.39 cm³(对照组9.78±0.61 cm³,P=0.000),肿瘤抑制率为42.63%(对照组0%,P=0.012)[2] 2. 异种移植瘤细胞周期与凋亡调控:Norcantharidin (NCTD)使异种移植瘤细胞的凋亡率升至15.08±1.49%(对照组5.49±0.59%,P=0.0001),S期细胞比例降至43.47±2.83%(对照组69.85±1.96%,P=0.0001);光镜/电镜观察到NCTD处理的肿瘤细胞出现凋亡形态学改变(核固缩、染色质凝集、染色体浓缩、凋亡小体)[2] 3. 异种移植瘤蛋白/RNA表达调控:Norcantharidin (NCTD)显著下调异种移植瘤中cyclin-D1、Bcl-2、survivin的蛋白和mRNA表达,同时上调p27和Bax的蛋白/mRNA表达(通过SABC法和RT-PCR检测)[2] 4. 体内多靶点抗癌效应:Norcantharidin (NCTD)在体内发挥多靶点抗癌作用,包括抑制增殖、诱导凋亡、抑制侵袭/转移、抑制肿瘤血管生成(血管发生、血管拟态、淋巴管生成)[4] |
| 酶活实验 |
斑蝥素(CTD)是斑蝥类药物的主要生物活性成分,在中医中被称为斑蝥。去甲斑蝥素(NCTD)是CTD的结构调节剂。与CTD相比,NCTD通过抑制细胞增殖、引起细胞凋亡和自噬、压倒迁移和转移、影响免疫和淋巴管生成,在抗癌方面具有更轻的副作用和更强的生物活性。这些作用的例子包括抑制蛋白磷酸酶2A和调节Wnt/β-catenin信号,分别涉及Caspase家族蛋白、AMPK通路和c-Met/EGFR通路。此外,NCTD具有增强免疫、抗血小板聚集和抑制肾间质纤维化的作用,具有不同的信号通路。NCTD诱导的免疫效应与调节巨噬细胞极化和LPS介导的免疫反应有关。NCTD诱导的抗血小板活性与抑制血小板信号传导和下调α2整合素有关。此外,一些人工设计和合成的新型衍生物显示出比NCTD本身更强的生物活性(如抗癌作用、酶抑制作用、抗氧化作用)和更低的毒性。大量文献报道了NCTD的各种药理作用,特别是抗癌作用,这在临床应用和实验室研究中受到了广泛关注。本文对NCTD的药物活性和衍生物进行了讨论,可供进一步研究参考[3]。
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| 细胞实验 |
斑蝥素(CTD)是斑蝥的主要生物活性成分。去斑蝥素(NCTD)是CTD的结构调节剂。与CTD相比,NCTD通过抑制细胞增殖、引起细胞凋亡和自噬、压倒迁移和转移、影响免疫和淋巴管生成,在抗癌方面具有更轻的副作用和更强的生物活性。这些作用的例子包括抑制蛋白磷酸酶2A和调节Wnt/β-连环蛋白信号,其中分别涉及胱天蛋白酶家族蛋白、AMPK途径和c-Met/EGFR途径。此外,NCTD具有增强免疫、抗血小板聚集和抑制肾间质纤维化的作用,具有不同的信号通路。NCTD诱导的免疫效应与巨噬细胞极化和LPS介导的免疫反应的调节有关。NCTD诱导的抗血小板活性与抑制血小板信号传导和下调α2整合素有关。此外,人工设计和合成的一些新衍生物显示出比NCTD本身更强的生物活性(如抗癌作用、酶抑制作用、抗氧化作用)和更低的毒性。大量文献报道了NCTD的多种药理作用,特别是抗癌作用,在临床应用和实验室研究中受到广泛关注。[3]
. 结肠癌细胞活力实验: - 步骤1:将HCT116和HT29细胞以2000个/孔的密度接种于96孔板,标准条件下培养24 h; - 步骤2:更换为含系列浓度Norcantharidin (NCTD)(6.25、12.5、25、50、100、150、200 μM)的完全培养基200 μL,孵育24 h、48 h或72 h; - 步骤3:通过检测荧光信号(检测方法未指定)量化活细胞数,实验重复三次[1] 2. 流式细胞术细胞周期分析: - 步骤1:将HCT116和HT29细胞接种于6孔板,培养24 h; - 步骤2:用系列浓度Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM)处理细胞24 h; - 步骤3:收集细胞并染色(染色方法未指定),流式细胞术分析细胞周期分布(G0/G1、S、G2/M期);采用Student’s t检验进行统计分析(p < 0.001),实验重复三次[1] 3. 流式细胞术凋亡分析: - 步骤1:将HCT116和HT29细胞接种于6孔板,培养24 h; - 步骤2:用系列浓度Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM)处理细胞48 h; - 步骤3:收集细胞并染色(染色方法未指定),流式细胞术检测早期/晚期凋亡;采用Student’s t检验进行统计分析(p < 0.001),实验重复三次[1] 4. 蛋白质印迹法蛋白表达分析: - 步骤1:将HCT116和HT29细胞接种于10 cm培养皿,培养24 h; - 步骤2:用Norcantharidin (NCTD)(6.25~100 μM)或吉非替尼(6.25~100 μM)处理细胞72 h;时间梯度实验中,用100 μM NCTD处理细胞不同时长; - 步骤3:收集细胞并裂解(裂解液未指定),测定蛋白浓度(方法未指定); - 步骤4:取等量蛋白进行SDS-PAGE电泳,转膜(膜类型未指定)后,用EGFR、p-EGFR、c-Met、p-c-Met、裂解型Caspase-3、裂解型PARP、Bax、Cyclin D1、CDK-4、Rb和β-肌动蛋白(内参)一抗孵育; - 步骤5:检测蛋白条带(检测方法未指定),用Image J软件量化条带强度(以β-肌动蛋白归一化,三次独立实验均值,标准差±15%)[1] 5. MG132挽救EGFR表达实验: - 步骤1:将HCT116细胞接种于10 cm培养皿,培养24 h; - 步骤2:用50 μM Norcantharidin (NCTD)单独处理或与0.2 μM MG132联合处理细胞48 h; - 步骤3:收集细胞进行蛋白质印迹分析,检测EGFR和β-肌动蛋白表达(实验流程同上)[1] |
| 动物实验 |
以生理盐水配制;剂量为24 mg/kg和28 mg/kg;腹腔注射。
裸鼠人胆囊癌异种移植模型 采用皮下注射GBC-SD细胞,建立裸鼠体内人胆囊癌异种移植模型。实验小鼠随机分为对照组、5-FU组、NCTD组和NCTD+5-FU组,分别接受不同的治疗。评估肿瘤大小、生长曲线和抑制率等生长情况。采用流式细胞术和光镜/电镜观察异种移植瘤的细胞周期、凋亡和形态学变化。采用链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法和RT-PCR法检测细胞周期相关蛋白cyclin-D1和p27以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和survivin的表达。结果:NCTD以剂量和时间依赖的方式抑制异种移植瘤的生长。与对照组相比,NCTD组的肿瘤体积显著减小(5.61±0.39 vs. 9.78±0.61 cm³,P=0.000),肿瘤抑制率显著提高(42.63% vs. 0%,P=0.012)。与对照组相比,NCTD组的细胞凋亡率显著升高(15.08±1.49% vs. 5.49±0.59%,P=0.0001),S期细胞比例显著降低(43.47±2.83% vs. 69.85±1.96%,P=0.0001)。通过光镜和电镜观察NCTD诱导的异种移植肿瘤细胞中细胞凋亡的形态变化,如核收缩、染色质聚集、染色体浓缩和典型的凋亡小体。与对照组相比,NCTD组中cyclin-D1、Bcl-2和survivin蛋白/mRNA的表达显著降低,而p27和Bax蛋白/mRNA的表达显著升高。[3] 1. 裸鼠胆囊癌异种移植模型: - 步骤1:将人胆囊癌GBC-SD细胞皮下植入裸鼠(性别/年龄不限)体内,建立异种移植模型。 - 步骤2:将实验小鼠随机分为对照组、5-FU组、NCTD组和NCTD+5-FU组(组间数量不限)。 - 步骤3:NCTD组给予去甲斑蝥素(NCTD)(给药途径/剂量/频率不限);5-FU组给予5-FU;联合用药组同时给予两种药物;对照组给予赋形剂(未指定溶出配方)。 - 步骤 4:定期测量肿瘤大小(未指定测量间隔),以生成生长曲线并计算肿瘤抑制率。 - 步骤 5:收集肿瘤组织,用于评估细胞周期分布(流式细胞术)、细胞凋亡(流式细胞术/光镜/电镜)以及蛋白质/mRNA表达(SABC 法/RT-PCR)[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 与斑蝥素 (CTD) 的比较:去甲斑蝥素 (NCTD) 是 CTD 的去甲基化衍生物,与 CTD 相比,其副作用更轻,细胞毒性更低;[3][4]
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| 参考文献 |
[1]. Norcantharidin Inhibits cell growth by suppressing the expression and phosphorylation of both EGFR and c-Met in human colon cancer cells. BMC Cancer.2017 Jan 13;17(1):55.
[2]. Norcantharidin inhibits growth of human gallbladder carcinoma xenografted tumors in nude mice by inducing apoptosis and blocking the cell cycle in vivo. Hepatobiliary Pancreat Dis Int.2010 Aug;9(4):414-22. [3]. Norcantharidin: research advances in pharmaceutical activities and derivatives in recent years. Biomed Pharmacother. 2020 Nov;131:110755. [4]. Insight into norcantharidin, a small-molecule synthetic compound with potential multi-target anticancer activities. Chin Med. 2020 May 29;15:55. |
| 其他信息 |
去甲斑蝥素是一种呋喃类化合物。
1. 背景和化学性质:去甲斑蝥素 (NCTD) 是一种经中国国家药品监督管理局批准用于癌症治疗的化学合成药物。它是斑蝥素 (CTD) 的去甲基化类似物,斑蝥素是传统中药斑蝥(西班牙苍蝇)的生物活性成分,分子式为 C₈H₈O₄,分子量为 168.15 g/mol。 NCTD 可通过呋喃和马来酸酐经 Diels-Alder 反应合成 [1][4] 2. 临床应用:去甲斑蝥素 (NCTD) 在中国已作为常规抗癌药物在临床上应用,并且可能是吉非替尼治疗癌症的一种经济有效的替代方案 [1][4] 3. 广泛的药理活性:去甲斑蝥素 (NCTD) 除了抗癌作用外,去甲斑蝥素 (NCTD) 还具有免疫增强作用、抗血小板聚集作用和抑制肾间质纤维化作用,每种活性都涉及不同的信号通路 [3] 4. 衍生物:去甲斑蝥素 (NCTD) 的新型合成衍生物表现出比 NCTD 本身更强的生物活性(抗癌、酶抑制、抗氧化)和更低的毒性;未提供具体的衍生物结构或活性数据[3] 5. 多靶点抗癌机制:去甲斑蝥素 (NCTD)通过“多点启动”机制发挥抗癌作用,包括抑制PI3K/NF-κB/MAPK/JNK信号通路、调节PP1/PP2A/PP2B活性、调控Cdc6/cyclin D1/CDKs/CDKIs以控制细胞周期,以及靶向Bcl-2/Bax诱导细胞凋亡。它还通过调节YAP/ERK/Ets1/Sp1/STAT1/MMPs/EMT抑制肿瘤侵袭/转移,并通过靶向VEGF/VEGFR/EphA2/FAK/TSP/Ang-2/Ln-5γ2/TIMP抑制肿瘤血管生成[4] |
| 分子式 |
C8H8O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
168.15
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| 精确质量 |
168.042
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| CAS号 |
5442-12-6
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
93004
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| 外观&性状 |
White to off-white solid
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
362.5±35.0 °C at 760 mmHg
|
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| 闪点 |
167.0±26.0 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.550
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| LogP |
-0.85
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| tPSA |
52.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
0
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
246
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1OC(=O)C2C3CCC(O3)C12
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| InChi Key |
JAABVEXCGCXWRR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C8H8O4/c9-7-5-3-1-2-4(11-3)6(5)8(10)12-7/h3-6H,1-2H2
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (12.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (12.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (12.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.9471 mL | 29.7354 mL | 59.4707 mL | |
| 5 mM | 1.1894 mL | 5.9471 mL | 11.8941 mL | |
| 10 mM | 0.5947 mL | 2.9735 mL | 5.9471 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Effect of NCTD on apoptosis in HCT116 (a) and HT29 (b) cells.BMC Cancer.2017 Jan 13;17(1):55. th> |
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Effects of NCTD on the expression and activation of EGFR and c-Met on HCT116 (a) and HT29 (b) human colon cancer cells.BMC Cancer.2017 Jan 13;17(1):55. td> |
Cell cycle distribution of HCT116 (a) and HT29 (b) human colon cancer cells after treatment with NCTD.BMC Cancer.2017 Jan 13;17(1):55. td> |