规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
5mg |
|
||
10mg |
|
||
25mg |
|
||
50mg |
|
||
100mg |
|
||
250mg |
|
||
500mg |
|
||
Other Sizes |
|
体外研究 (In Vitro) |
体外活性:GSK-963(也称为 GSK963 或 GSK963)是一种有效的选择性 RIP1 激酶抑制剂。在生化和细胞测定中,GSK963 明显比 Nec-1(一种已知的 RIP1 激酶抑制剂)更有效,在人和小鼠细胞中抑制 RIP1 依赖性细胞死亡,IC50 介于 1 至 4 nM 之间。 GSK963 对 RIP1 的选择性比 339 种其他激酶高 10 000 倍,缺乏针对 IDO 的可测量活性,并且具有非活性对映体 GSK962,可用于确认靶向效果。 GSK963 增强的体外效力也适用于体内,在 TNF 诱导的无菌休克模型中,GSK963 在与 Nec-1 匹配的剂量下提供了更大的低温保护。总之,我们相信 GSK963 代表了检查 RIP1 体外和体内功能的下一代工具,并应有助于澄清我们目前对 RIP1 在疾病发病机制中作用的理解。激酶测定:使用 ADP-Glo 发光测定测定化合物对抗 RIP1 激酶活性的效力,该测定如前所述测量 ATP 到 ADP 的转化。简而言之,主要反应由 50 mM HEPES pH 7.5、50 mM NaCl、30 mM MgCl2、1 mM DTT、0.5 mg/ml BSA 和 0.02% 中的 10 nM GST-RIPK1 (1–375) 和 50 μM ATP 组成章节。将 5 微升酶和 5 μl ATP 以最终测定浓度的两倍添加到板中,并在室温下孵育 4 小时。在读板器上测量发光。测试化合物抑制表示为内部测定对照的抑制百分比。细胞测定:在 caspase 抑制剂 zVAD-FMK 或 QVD-Oph 存在下,用 TNF 在 BMDM、L929 和 U937 细胞中诱导坏死性细胞死亡(BMDM:50 ng/ml TNF+50 μM zVAD;L929:100 ng/ml TNF) +50 μM QVD;U937:100 ng/ml TNF+25 μM QVD)。为了评估 RIP1 抑制剂的效果,用化合物(剂量反应)预处理细胞 30 分钟。 19-21小时后,通过使用CellTiter-Glo发光细胞活力测定(Promega,Fitchburg,WI,USA)测量细胞ATP水平来评估诱导的细胞死亡。为了诱导中性粒细胞坏死性凋亡,用 TNF (10 ng/ml)、QVD-Oph (50 μM) 和 SMAC 模拟物 (100 nM) 刺激新鲜分离的人中性粒细胞。如上所述评估诱导的细胞死亡。
|
||
---|---|---|---|
体内研究 (In Vivo) |
C57BL/6 小鼠购自 Taconic,并饲养在特定的无病原体条件下。所有动物程序均在葛兰素史克实验动物护理评估和认证协会认可的设施中根据葛兰素史克实验动物护理、福利和治疗政策进行,并经过动物护理和使用机构的审查和批准葛兰素史克委员会。
|
||
动物实验 |
|
||
参考文献 |
Cell Death Discov.2015 Jul 27;1:15009.
|
分子式 |
C14H18N2O
|
|
---|---|---|
分子量 |
230.31
|
|
CAS号 |
2049872-86-6
|
|
相关CAS号 |
GSK963;2049868-46-2
|
|
SMILES |
CC(C)(C)C(N1N=CC[C@@H]1C2=CC=CC=C2)=O
|
|
化学名 |
|
|
别名 |
|
|
存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
溶解度 (体外) |
|
|||
---|---|---|---|---|
溶解度 (体内) |
Solubility in Formulation 1: ≥ 2.5 mg/mL (10.85 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly. Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C,1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution. Solubility in Formulation 2: ≥ 2.5 mg/mL (10.85 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 25.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly. 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 4.3420 mL | 21.7099 mL | 43.4197 mL | |
5 mM | 0.8684 mL | 4.3420 mL | 8.6839 mL | |
10 mM | 0.4342 mL | 2.1710 mL | 4.3420 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
GSK′963A is a potent and selective inhibitor of RIP1 kinase. (a) Chemical structures of GSK′963A (active analog), GSK′962A (inactive analog) and Necrostatin-1. (b) Dose–response curves for GSK′963, GSK′962 and Nec-1 in the FP binding assay evaluating the affinity of compounds for RIP1 (ATP-binding pocket).Cell Death Discov.2015 Jul 27;1:15009. th> |
---|
GSK′963A is highly potent in human and mouse cell-based assays and selective for inhibition of necroptosis. (a–d) Dose–response curves for GSK′963, GSK′962 and Nec-1 in cell-based assays.Cell Death Discov.2015 Jul 27;1:15009. td> |
GSK′963A protects mice from TNF+zVAD-induced hypothermia. (a) Pharmacokinetic profile of GSK′963A dosed i.p. at 10 mg/kg in C57BL/6 mice. The data represent the combined results of the three independent animals. (b) Modeling of predicted % inhibition against RIP1 using the observed pharmacokinetic profile of GSK′963 in conjunction with the potency in inhibiting TNF+zVAD necroptosis in mouse L929 cells.Cell Death Discov.2015 Jul 27;1:15009. td> |