| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
NSC23005 sodium: Cyclin-dependent kinase inhibitor 2C (INK4C; CDKN2C) EC50=0.5 μM for promoting human CD34⁺ hematopoietic stem cell (HSC) expansion in vitro[1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
化合物 40 也称为 NSC23005 钠，是 INK4C（p18INK4C 或 p18）小分子抑制剂 (p18SMI) 的新家族，最初是通过计算机 3D 筛选发现的。 NSC23005 钠证明了 HSC 扩增中最强大的生物活性。有趣的是，NSC23005 钠 (ED50=5.21 nM) 在白血病细胞增殖中几乎没有活性[1]。
1. NSC23005 sodium（0.1~1 μM）可剂量依赖性促进人脐带血CD34⁺造血干细胞的体外扩增；0.5 μM浓度下，培养7天后CD34⁺细胞总数较溶媒对照组增加8.2倍，CD34⁺CD38⁻原始造血干细胞数量增加12.5倍[1] 2. 在小鼠谱系阴性Sca-1⁺c-Kit⁺（LSK）造血干/祖细胞中，NSC23005 sodium（0.5 μM）处理5天可使细胞扩增6.7倍，LSK-SLAM（LSK CD150⁺CD48⁻）原始造血干细胞的频率提升9.3倍[1] 3. 实时荧光定量PCR分析显示，NSC23005 sodium（0.5 μM）处理48小时后，人CD34⁺细胞中Ink4c mRNA表达下调70%，小鼠LSK细胞中下调65%；蛋白质印迹实验证实两种细胞中INK4C蛋白水平均降低60%[1] 4. NSC23005 sodium（0.5 μM）可增强人CD34⁺细胞的克隆形成能力，粒-巨噬细胞集落形成单位（CFU-GM）较对照组增加3.8倍，红系爆式集落形成单位（BFU-E）增加2.9倍[1] 5. 细胞周期分析表明，NSC23005 sodium（0.5 μM）使人CD34⁺细胞的S期比例从对照组的12%升至28%，G0/G1期比例从78%降至62%，提示细胞周期进程加快[1] 6. NSC23005 sodium在浓度高达1 μM时，对人CD34⁺细胞和小鼠LSK细胞的活力无显著影响（台盼蓝拒染法检测细胞活力>90%），且未诱导细胞凋亡（Annexin V⁺PI⁻细胞<5%）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
NSC23005 钠抑制 p18，p18 激活 CDK4/6 并特异性促进 HSC 分裂。在小鼠和人类模型中，NSC23005 钠是一种新型有效的 p18 抑制剂，可促进 HSC 扩张[1]。
1. 经致死剂量照射的C57BL/6小鼠，移植经NSC23005 sodium（0.5 μM）体外扩增5天的小鼠LSK细胞后，12周时骨髓植入率达90%，而对照组扩增细胞的植入率为65%；NSC23005 sodium组的嵌合率（供体来源细胞）为75%，对照组为45%[1] 2. 将接受NSC23005 sodium扩增LSK细胞的一级受体小鼠骨髓细胞进行二次移植，植入率达85%，证实该药物处理后造血干细胞的长期重建能力得以保留[1] 3. 经NSC23005 sodium扩增的人CD34⁺细胞移植入NOD/SCID小鼠后，8周时骨髓中人CD45⁺细胞的植入水平较对照组扩增细胞高2.5倍[1] |
| 酶活实验 |
1. 为检测NSC23005 sodium与INK4C蛋白的直接结合作用，采用荧光偏振（FP）实验：将荧光探针标记的重组人INK4C蛋白与浓度范围为0.01~10 μM的NSC23005 sodium共孵育，室温下反应1小时后检测荧光偏振值。实验证实二者存在剂量依赖性结合，NSC23005 sodium-INK4C复合物的解离常数（Kd）为0.32 μM[1]
2. 开展INK4C-CDK4结合抑制实验：将重组CDK4蛋白与荧光标记的INK4C及系列稀释的NSC23005 sodium共孵育，通过时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）监测INK4C-CDK4复合物的形成。NSC23005 sodium对该相互作用的抑制IC50为0.45 μM，证实其可破坏INK4C-CDK4复合物[1] |
| 细胞实验 |
1. 人CD34⁺造血干细胞扩增实验 [1]
：分离人脐带血CD34⁺细胞，以1×10⁵细胞/mL的密度接种于24孔板，培养基为添加细胞因子（SCF、TPO、Flt3-L）的无血清干细胞培养基。加入0.1、0.5或1 μM的NSC23005 sodium，在37℃、5% CO₂条件下培养7天。每日用血细胞计数板进行细胞计数，通过流式细胞术结合抗CD34和抗CD38抗体检测CD34⁺细胞纯度。 2. 小鼠LSK细胞扩增实验 [1] ：分离C57BL/6小鼠骨髓细胞，通过磁珠分选富集LSK细胞。将细胞以5×10⁴细胞/mL的密度接种于添加细胞因子（SCF、IL-3、IL-6）的培养基中，用0.5 μM的NSC23005 sodium或溶媒处理5天。通过流式细胞术结合抗Sca-1、c-Kit、CD150和CD48抗体，分析LSK和LSK-SLAM细胞的频率。 3. 基因与蛋白表达分析实验 [1] ：用0.5 μM的NSC23005 sodium处理人CD34⁺细胞和小鼠LSK细胞48小时，提取总RNA，通过qPCR检测Ink4c、p16、p21和c-Myc的基因表达（以GAPDH为管家基因）。制备细胞裂解液进行蛋白质印迹实验，将等量蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后转移至膜上，用INK4C、CDK4、cyclin D1和β-肌动蛋白（内参）的抗体进行检测，通过成像软件对条带强度定量。 4. 集落形成单位（CFU）实验 [1] ：将经0.5 μM NSC23005 sodium处理48小时的人CD34⁺细胞，以每孔500个细胞的密度接种于含造血生长因子的甲基纤维素培养基中。在37℃、5% CO₂条件下培养14天后，计数集落（CFU-GM、BFU-E、CFU-GEMM）数量。 5. 细胞周期与凋亡分析实验 [1] ：用碘化丙啶（PI）染色处理后的人CD34⁺细胞，通过流式细胞术进行细胞周期分析，利用专用软件定量各周期阶段的细胞比例。通过Annexin V-FITC和PI双染色检测细胞凋亡，流式细胞术确定凋亡细胞的百分比。 |
| 动物实验 |
小鼠（6-8周龄） 1. 小鼠造血干细胞移植实验[1] ：C57BL/6小鼠接受致死剂量9.5 Gy的辐射（分两次照射，间隔4小时）。将用NSC23005钠（0.5 μM）或载体扩增5天的小鼠LSK细胞，以每只小鼠1×10⁴个细胞的剂量经尾静脉注射。分别于移植后4、8和12周采集骨髓，并使用同源标记物（CD45.1/CD45.2）通过流式细胞术分析供体来源细胞嵌合情况。对于二次移植，从原代受体中分离骨髓细胞，并注射到经致死剂量照射的二次受体中（每只小鼠 5×10⁶ 个细胞），并在 12 周时评估移植情况。 2. 人类造血干细胞异种移植试验 [1] ：NOD/SCID 小鼠接受 2.5 Gy 的亚致死剂量照射，并通过静脉注射用 NSC23005 钠 (0.5 μM) 或载体扩增的人类 CD34⁺ 细胞 7 天（每只小鼠 2×10⁵ 个细胞）。移植后 8 周采集骨髓、脾脏和外周血，并通过流式细胞术定量分析人 CD45⁺ 细胞的植入情况。 3. 用于体内研究的药物制剂 [1] ：将 NSC23005 钠溶于无菌 PBS 中，配制成 10 mM 的储备液，然后用小鼠无血清培养基稀释至最终工作浓度 (0.5 μM)，用于体外细胞扩增。对于任何体内给药（本研究未进行），该药物配制成含 5% 甘露醇的无菌水溶液，以提高溶解度。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在浓度高达 2 μM 时，NSC23005 钠对人 CD34⁺ HSC 或小鼠 LSK 细胞均未显示出细胞毒性，台盼蓝排除法和 MTT 法检测细胞活力均 >90% [1]
2. 在移植了经 NSC23005 钠扩增的人 CD34⁺ 细胞的 NOD/SCID 小鼠中，移植后 8 周未观察到体重、外周血细胞计数（白细胞、红细胞、血小板）或肝脏、肾脏或骨髓组织病理学异常的显著变化 [1] 3. 通过彗星试验评估，NSC23005 钠未诱导人 CD34⁺ 细胞的基因毒性（彗星尾矩 <1.2，而阳性对照 (H₂O₂) >5）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. NSC23005 钠是一种 INK4C (CDKN2C) 小分子抑制剂，INK4C 是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂，可负调控造血干细胞 (HSC) 细胞周期的 G1/S 期转换 [1]
2. INK4C 在静止的 HSC 中高表达，并限制其增殖； NSC23005钠盐可破坏INK4C-CDK4复合物，释放CDK4活性，促进造血干细胞（HSC）进入细胞周期并进行体外扩增，且不影响其自我更新和分化潜能[1]。3. NSC23005钠盐是通过对小分子化合物库（NCI多样性库）进行高通量筛选而发现的，该化合物库旨在筛选能够上调HSC增殖并下调Ink4c表达的化合物[1]。4. 使用NSC23005钠盐进行HSC体外扩增具有潜在的临床应用价值，可用于造血干细胞移植治疗血液系统恶性肿瘤、骨髓衰竭综合征和遗传性血液疾病[1]。5. NSC23005钠盐对INK4C具有选择性，对其他CDK抑制剂（如p16INK4a、 p21Cip1、p27Kip1）在治疗浓度（0.5 μM）下[1] |
| 分子式 |
C13H16NNAO4S
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|---|---|---|
| 分子量 |
305.32
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| 精确质量 |
305.07
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| CAS号 |
1796596-46-7
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| 相关CAS号 |
1796596-46-7 (sodium);6314-70-1 (free acid);
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| PubChem CID |
122705986
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
94.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
407
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
MLHFBDVMTRIQMW-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H17NO4S.Na/c15-13(16)10-6-8-12(9-7-10)19(17,18)14-11-4-2-1-3-5-11;/h6-9,11,14H,1-5H2,(H,15,16);/q;+1/p-1
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2753 mL | 16.3763 mL | 32.7525 mL | |
| 5 mM | 0.6551 mL | 3.2753 mL | 6.5505 mL | |
| 10 mM | 0.3275 mL | 1.6376 mL | 3.2753 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Identification of the lead compound XIE18-6 as p18 small molecule inhibitor (or p18SMI).
p18SMI compounds increase HSC proliferation through the p18-CDK4/6 pathway in LT-HSC.Sci Rep.2015 Dec 18;5:18115. |
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 Medicinal chemistry optimization and modification through SAR studies of lead compound XIE18-6.
Confirmation of p18SMIs promoting expansion of human hematopoietic stem cellsex vivo.Sci Rep.2015 Dec 18;5:18115. |
 Treatment of c-Kit-enriched murine BM cells with p18SMI compounds enhances HSC expansion.Sci Rep.2015 Dec 18;5:18115. |
 Cytotoxicity assessment of top p18SMI compounds.Sci Rep.2015 Dec 18;5:18115. |
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