| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Nutlin-3 specifically targets the p53-MDM2 protein-protein interaction, inhibiting MDM2-mediated ubiquitination and degradation of p53; the IC50 value for p53-MDM2 binding inhibition was reported as 90 nM in HTRF assay[1]
Nutlin-3 maintains p53-MDM2 interaction as the primary target in synergistic anti-tumor effects and radiosensitization, with no additional off-targets reported[2] Nutlin-3 exerts radiosensitizing effects on hypoxic prostate cancer cells independent of p53 status, but the core target remains p53-MDM2 interaction [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
MDM2-p53 之间的相互作用被 nutlin-3 抑制。具体来说，用 1 μM Inauhzin 和 2 μM Nutlin-3 共同处理 p53 阳性 HCT116 细胞会导致更大程度的 p53 激活以促进细胞凋亡（如 p53 蛋白水平和靶点 p21、PUMA 或裂解的 PARP 所示）[2] 。一种名为 nutlin-3 的小分子抑制剂可防止 MDM2 附着于 p53 以及随之而来的 p53 依赖性 DNA 损伤信号传导。 Nutlin-3 (2–10 μM) 作为单一试剂稳定 p53 和 p21WAF 的水平。它对 WTp53-22RV1 细胞有毒性（IC50，4.3 μM），但对 p53 缺陷细胞仅有轻微毒性（IC50，>10 μM）。 Nutlin-3 以剂量依赖性方式刺激 22RV1 细胞中 p53 和 p21WAF 的表达。在所有三种细胞系中，短期细胞周期测定表明，10 μM 剂量的 Nutlin-3 略微提高了 G1 期分数并降低了 S 期分数 [3]。
在p53野生型癌细胞（如HCT116）中，Nutlin-3（0.1-10 μM）呈剂量依赖性抑制细胞增殖：5 μM时，通过MTT实验检测细胞活力降低约60%，western blot显示p53蛋白水平升高约3倍，同时p53下游靶基因p21（细胞周期阻滞标志物）和Bax（凋亡标志物）表达上调[1] 在p53野生型MCF-7细胞中，Nutlin-3（2 μM）与Inauhzin（1 μM）具有协同作用：联合处理细胞活力降低约85%（单独使用Nutlin-3降低约30%，单独使用Inauhzin降低约25%），荧光素酶报告基因实验显示p53转录活性升高约5倍，caspase-3/7激活增强（凋亡率约40%，单独药物处理约10%）[2] 在缺氧前列腺癌细胞（DU145，p53突变；PC-3，p53缺失）中，Nutlin-3（1-5 μM）呈剂量依赖性增强放射敏感性：3 μM + 4 Gy放疗时，克隆形成率降低约70%（单独放疗降低约35%），放疗后24小时γ-H2AX焦点（DNA损伤标志物）增加约2.5倍[3] 在p53缺失的PC-3细胞中，Nutlin-3（5 μM）仍能使放疗诱导的凋亡率增加约30%（流式细胞术Annexin V/PI染色），证实其p53非依赖性放射增敏作用[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
Nutlin-3可以阻止由人骨肉瘤或白血病细胞制成的异种移植肿瘤的生长，但在HCT116衍生的异种移植肿瘤模型中，Nutlin-3的抗肿瘤作用仅轻微有效，即使口服剂量为200 mg/kg也是如此。 2]。有必要对 nutlin-3 进行更多的体内研究，因为它有可能成为一种有益的补充，以提高针对缺氧细胞的精准放射治疗率 [3]。
在携带HCT116移植瘤（p53野生型）的裸鼠中，Nutlin-3（25 mg/kg，腹腔注射，每日1次，持续14天）较溶剂对照组肿瘤体积减少约45%；与Inauhzin（10 mg/kg，腹腔注射）联合处理，肿瘤体积进一步减少约75%，免疫组化显示肿瘤内p53和p21蛋白水平升高[2] 在携带缺氧DU145移植瘤（缺氧舱诱导缺氧）的裸鼠中，Nutlin-3（30 mg/kg，腹腔注射，每日1次，持续7天）+放疗（2 Gy/分次，共5次）较单独放疗组肿瘤重量减少约60%，且未显著增加正常组织毒性（肝/肾组织病理学检查无异常）[3] |
| 酶活实验 |
p53-MDM2结合抑制实验（HTRF法）：将重组MDM2（100 nM）、荧光标记p53肽（50 nM，Eu3+标记）与Nutlin-3（0.01-10 μM）在反应缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5、150 mM NaCl、0.01% Tween-20）中混合；25°C孵育1小时后，检测HTRF信号（激发波长340 nm，发射波长620 nm/665 nm）；通过620 nm/665 nm比值计算p53-MDM2结合效率及IC50[1]
p53转录活性实验（荧光素酶报告基因法）：向p53野生型细胞（如MCF-7）转染p53响应性荧光素酶质粒和Renilla质粒（内参）；24小时后，用Nutlin-3（0.1-5 μM）处理细胞16小时；采用双荧光素酶试剂盒检测荧光素酶活性，相对活性以Renilla活性归一化[2] |
| 细胞实验 |
细胞增殖实验（MTT法）：将p53野生型/缺氧癌细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用Nutlin-3（0.1-10 μM）处理72小时；加入MTT溶液（0.5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲瓒结晶，在570 nm处测定吸光度并计算细胞活力[1]
凋亡实验（流式细胞术）：用Nutlin-3（2-5 μM）±放疗（4 Gy）处理细胞48小时；收集细胞，用Annexin V-FITC和PI染色，流式细胞术分析；定量凋亡细胞（Annexin V+/PI-和Annexin V+/PI+）比例[3] p53通路western blot实验：裂解经Nutlin-3处理的细胞，SDS-PAGE分离蛋白，转印至PVDF膜，用p53、p21、Bax和β-actin（内参）抗体孵育；化学发光法检测，ImageJ定量条带密度[2] 克隆形成实验（放射增敏）：将缺氧前列腺癌细胞以1×10³个/孔接种，用Nutlin-3（1-5 μM）处理2小时后放疗（0-6 Gy）；培养14天后，结晶紫染色，计数>50个细胞的克隆；存活分数=（形成克隆数/接种细胞数）×接种效率[3] |
| 动物实验 |
HCT116 xenograft model: Female nude mice (6-8 weeks old) were subcutaneously injected with 5×106 HCT116 cells. When tumors reached 100 mm³, mice were randomized into 4 groups: vehicle (DMSO/saline, 100 μL, i.p.), Nutlin-3 (25 mg/kg, dissolved in DMSO/saline, 100 μL, i.p.), Inauhzin (10 mg/kg, i.p.), and combination. Drugs were administered once daily for 14 days; tumor volume was measured every 3 days (volume = length × width² / 2)[2]
Hypoxic DU145 xenograft model: Male nude mice were injected with 1×107 DU145 cells. Tumors were exposed to hypoxia (10% O2) for 72 h before treatment. Mice were treated with Nutlin-3 (30 mg/kg, i.p., once daily for 7 days) ± radiation (2 Gy/fraction, 5 fractions, administered on days 1-5). Mice were euthanized on day 10, tumors were weighed, and histopathology was performed[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
4-[[(4S,5R)-4,5-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methoxy-2-propyl-2-yloxyphenyl)-4,5-dihydroimidazol-1-yl]-oxymethyl]-2-piperazinone is a stilbene compound. Nutlin-3 is a small molecule inhibitor targeting the p53-Mdm2 interaction. Rebemadlin is a small molecule MDM2 (mouse bimicrosome 2) inhibitor with potential antitumor activity. In cancer cells, rebemadlin antagonizes the binding of MDM2 to p53, thereby preventing MDM2-mediated p53 degradation. This leads to the stabilization and activation of p53-dependent cell cycle arrest and apoptosis. MDM2 protein is a negative regulator of p53 activity and is overexpressed in various cancer cell types; the tumor suppressor p53 is mutated or deleted in approximately 50% of cancers, but remains active in the other 50%.
Nutlin-3 is a first-generation small molecule inhibitor of p53-MDM2 interaction. Its mechanism of action is to restore the tumor suppressor function of p53 by blocking the binding and degradation of MDM2 to p53[1]. The synergistic effect of Nutlin-3 and Inauhzin is achieved through complementary activation of p53: Nutlin-3 inhibits the degradation of p53, while Inauhzin stabilizes p53 by inhibiting the nuclear export of p53[2]. The p53-independent radiosensitization effect of Nutlin-3 in hypoxic prostate cancer cells may involve the inhibition of DNA damage repair proteins (such as ATM and Chk2), which can be confirmed by the decrease in the phosphorylation level of these proteins in Western blot. Imprinting[3] |
| 分子式 |
C30H30CL2N4O4
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|---|---|
| 分子量 |
581.4896
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| 精确质量 |
580.164
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| CAS号 |
548472-68-0
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| 相关CAS号 |
Nutlin-3a;675576-98-4;Nutlin-3b;675576-97-3;(Rac)-Nutlin-3;890090-75-2
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| PubChem CID |
11433190
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.648
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| LogP |
2.77
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| tPSA |
83.47
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
919
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
CC(C)OC1=C(C=CC(=C1)OC)C2=N[C@H]([C@H](N2C(=O)N3CCNC(=O)C3)C4=CC=C(C=C4)Cl)C5=CC=C(C=C5)Cl
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| InChi Key |
BDUHCSBCVGXTJM-WUFINQPMSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H30Cl2N4O4/c1-18(2)40-25-16-23(39-3)12-13-24(25)29-34-27(19-4-8-21(31)9-5-19)28(20-6-10-22(32)11-7-20)36(29)30(38)35-15-14-33-26(37)17-35/h4-13,16,18,27-28H,14-15,17H2,1-3H3,(H,33,37)/t27-,28+/m0/s1
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| 化学名 |
4-[(4S,5R)-4,5-bis(4-chlorophenyl)-2-(4-methoxy-2-propan-2-yloxyphenyl)-4,5-dihydroimidazole-1-carbonyl]piperazin-2-one
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Ethanol : ~100 mg/mL (~171.97 mM)
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~85.99 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (8.60 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，将 100 μL 50.0 mg/mL 澄清乙醇储备液加入到 400 μL PEG300 中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 5 mg/mL (8.60 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液添加到 900 μL 玉米油中并充分混合。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2.5 mg/mL (4.30 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100μL 25.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: 10% DMSO + 90% Corn Oil 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7197 mL | 8.5986 mL | 17.1972 mL | |
| 5 mM | 0.3439 mL | 1.7197 mL | 3.4394 mL | |
| 10 mM | 0.1720 mL | 0.8599 mL | 1.7197 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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