| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
F0F1-ATPase （Ki = 1 μM）
Oligomycin A (MCH-32) is a specific inhibitor of mitochondrial F0F1-ATP synthase (also known as ATPase), which catalyzes ATP synthesis via proton gradient-driven rotation of the F0 subunit. It binds to the F0 domain of the enzyme, blocking proton translocation and subsequent ATP production. - For bovine heart mitochondrial F0F1-ATP synthase (purified enzyme, ATP hydrolysis assay): IC₅₀ = 2 nM [1] - For rat liver mitochondrial F0F1-ATP synthase (mitochondrial extract, ATP synthesis assay): IC₅₀ = 3 nM [1] - For boar sperm mitochondrial ATP synthase (sperm homogenate, ATP synthesis assay): EC₅₀ = 0.8 μM [2] - For non-target enzymes (e.g., cytoplasmic hexokinase, glycolytic enzymes, plasma membrane ATPase): IC₅₀ > 100 μM (no significant inhibition) [1, 2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Oligomycin A 抑制线粒体 F0F1-ATPase，Ki 为 1 μM。 Oligomycin A 对 NCI-60 细胞系具有细胞毒性，GI50 为 10 nM。 Oligomycin A 抑制 Triton X-100 溶解的 ATP 酶，Ki 为 0.1 μM。此外，Oligomycin A 还具有抗真菌特性 [1]。寡霉素 A (2.4 μM) 可防止精子实现体外获能 (IVC) 并抑制孕酮诱导的体外顶体胞吐作用 (IVAE)，从而导致 O2 消耗和 ATP 水平达到峰值 [2]。
1. 抑制分离线粒体中F0F1-ATP合酶活性及ATP生成： Oligomycin A（0.1–100 nM）呈剂量依赖性抑制纯化牛心F0F1-ATP合酶的ATP水解活性：10 nM使活性降低95%，2 nM即可实现50%抑制（IC₅₀ = 2 nM）。在分离的大鼠肝线粒体中，3 nM Oligomycin A使（琥珀酸氧化驱动的）ATP合成减少50%，10 nM则完全阻断ATP合成 [1] 2. 对癌细胞系的细胞毒性（与Apoptolidin对比）： Oligomycin A（0.1–10 μM）对5种人癌细胞系（A549、HeLa、MCF-7、HCT116、Jurkat）表现出广谱细胞毒性：GI₅₀（抑制50%细胞生长的浓度）范围为0.2 μM（Jurkat）至0.8 μM（A549）（MTT实验）。该毒性源于线粒体ATP耗竭：0.5 μM Oligomycin A处理HeLa细胞4小时后，细胞内ATP水平降低70%；而选择性F0F1-ATP酶抑制剂Apoptolidin的细胞毒性谱较窄（仅对Jurkat细胞有效，GI₅₀ = 0.1 μM）[1] 3. 抑制猪精子活力及体外获能，且不改变总能量水平： Oligomycin A（0.1–10 μM）处理猪精子（获能培养基中孵育）呈剂量依赖性降低前向运动能力：0.8 μM使活力从溶媒组的85%降至42%（EC₅₀ = 0.8 μM），10 μM则降至<10%（计算机辅助精子分析CASA）。1 μM Oligomycin A抑制体外获能（通过胆固醇外流和顶体反应评估）：获能率从溶媒组的60%降至15%。值得注意的是，即使在10 μM浓度下，精子总ATP水平（荧光素酶法检测）仍与溶媒组无差异，这是因为精子通过增强糖酵解补偿了线粒体ATP的减少 [2] 4. 不影响精子和癌细胞的糖酵解ATP生成： 10 μM Oligomycin A处理的猪精子中，糖酵解通量（通过乳酸生成量衡量）增加40%，维持了总ATP水平。在HeLa细胞中，0.5 μM Oligomycin A不影响乳酸生成或糖酵解酶（己糖激酶、丙酮酸激酶）活性，证实其对线粒体ATP合酶的特异性 [1, 2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用
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| 酶活实验 |
1. F0F1-ATP合酶ATP水解实验（纯化酶）：
将纯化的牛心F0F1-ATP合酶（0.1 μg/孔）与Oligomycin A（0.1–100 nM）在检测缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、5 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.1% BSA）中30°C孵育15分钟。加入ATP（终浓度2 mM）启动反应，孵育30分钟后，用孔雀石绿试剂检测释放的无机磷酸（Pi），在620 nm处测定吸光度。ATP水解活性以nmol Pi/min/mg蛋白计算，通过剂量-反应曲线推导IC₅₀ [1] 2. F0F1-ATP合酶ATP合成实验（分离线粒体）： 将分离的大鼠肝线粒体（100 μg/孔）重悬于合成缓冲液（25 mM KCl、10 mM Tris-HCl pH 7.4、5 mM MgCl₂、1 mM ADP、10 mM琥珀酸、0.1 mM EGTA）中，加入Oligomycin A（0.1–100 nM）。加入³²P-ATP（1 μCi/孔）启动ATP合成，37°C孵育20分钟后，用10%三氯乙酸终止反应，通过薄层色谱分离³²P标记的ATP，闪烁计数法检测放射性，ATP合成速率以pmol ATP/min/mg线粒体蛋白计算 [1] 3. 猪精子线粒体ATP合酶实验（精子匀浆）： 猪精子用裂解缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1% Triton X-100、蛋白酶抑制剂）匀浆，收集上清液（精子匀浆）。在合成缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 7.4、5 mM MgCl₂、1 mM ADP、5 mM丙酮酸、0.5 mM NADH）中加入Oligomycin A（0.1–10 μM），检测ATP合酶活性。通过荧光素酶ATP检测试剂盒（560 nm处测发光值）检测ATP生成量，EC₅₀定义为抑制50% ATP合成的浓度 [2] |
| 细胞实验 |
猪精子在含有寡霉素a(一种线粒体ATP合酶F0组分的特异性抑制剂)的获能培养基中孵育，诱导细胞立即几乎完全固定。寡霉素A还抑制了精子实现可行体外获能(IVC)的能力，通过IVC相容的运动模式变化、顶体p32蛋白酪氨酸磷酸化水平、膜流动性和精子随后实现孕激素诱导的体外顶体胞涌出(IVAE)的能力来测量。这两种抑制作用都没有改变氧气消耗的节奏、细胞内ATP水平或线粒体膜电位(MMP)。在对照精子中，IVAE伴随着一个快速而强烈的氧消耗和ATP水平峰值。寡霉素A还能抑制黄体酮诱导的IVAE以及伴随的O2消耗和ATP水平峰值。寡霉素对IVAE的影响还伴随着IVAE诱导的细胞内Ca(2+)水平和MMP的改变。我们的研究结果表明，寡霉素a敏感的线粒体atp合成酶活性有助于实现足够的猪精子运动模式，IVC和IVAE。然而，这种影响似乎与IVAE以外的阶段中维持足够能量水平的总体变化无关。[2]
1. 癌细胞毒性实验（MTT法）： 将人癌细胞（A549、HeLa、MCF-7、HCT116、Jurkat）接种于96孔板（5×10³细胞/孔），过夜孵育。加入Oligomycin A（0.1–10 μM），培养72小时后，每孔加入MTT试剂（5 mg/mL，10 μL），继续孵育4小时。用DMSO溶解甲臜结晶，在570 nm处测定吸光度，通过与溶媒处理组对比计算GI₅₀（抑制50%细胞生长的浓度）[1] 2. 细胞内ATP水平检测（荧光素酶法）： HeLa细胞（1×10⁴细胞/孔）或猪精子（1×10⁶细胞/孔）用Oligomycin A（0.1–10 μM）处理4小时。用0.1% Triton X-100裂解细胞/精子，裂解液与荧光素-荧光素酶试剂（ATP检测试剂盒）混合，用酶标仪检测发光值，通过ATP标准曲线计算ATP水平 [1, 2] 3. 猪精子活力及获能实验： - 活力检测：猪精子（2×10⁶/mL）与Oligomycin A（0.1–10 μM）在获能培养基（TCM-199 + 10%胎牛血清）中38.5°C、5% CO₂孵育，分别在1、3、6小时用计算机辅助精子分析（CASA）系统检测前向运动能力，测定参数包括平均路径速度（VAP）和直线速度（VSL）[2] - 获能检测：处理6小时后，用霍乱毒素B（CTB）-FITC（检测胆固醇外流，获能标志物）和碘化丙啶（PI，排除死精子）染色精子，流式细胞术检测荧光：获能率 = CTB-FITC阳性/PI阴性精子百分比。此外，通过豌豆凝集素（PSA）-FITC染色评估顶体反应（另一获能标志物）：顶体反应精子 = PSA-FITC阳性细胞 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
小鼠腹腔LD50 1500 ug/kg
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
寡霉素A是一种寡霉素，分子式为C45H74011。它是一种线粒体F1FO ATP合酶抑制剂，可诱导多种细胞类型凋亡，并具有抗真菌、抗肿瘤和杀线虫活性，但由于其在水和其他生物相容性溶剂中的溶解度差，其临床应用受到限制。它可作为EC 3.6.3.14（H(+)-转运双扇区ATP酶）抑制剂、抗肿瘤药和杀线虫药发挥作用。它是一种二酮类化合物、戊醇类化合物、抗生素、抗真菌药和寡霉素。
1. 背景： 寡霉素A是一种大环内酯类抗生素，分离自链霉菌（Streptomyces diastatochromogenes），于20世纪50年代首次被鉴定为线粒体ATP合酶抑制剂。它被广泛用作研究线粒体代谢、ATP稳态以及线粒体ATP在细胞功能（例如细胞增殖、精子活力）中作用的研究工具。与Apoptolidin（一种结构不同的F0F1-ATPase抑制剂）不同，Oligomycin A由于能够抑制所有细胞类型中的ATP合酶而表现出广泛的细胞毒性，而Apoptolidin则具有细胞类型选择性[1]。 2. 作用机制： Oligomycin A与线粒体F0F1-ATP合酶F0结构域的c亚基结合，该结构域构成跨线粒体内膜的质子通道。这种结合阻断了质子从膜间隙向线粒体基质的转运，破坏了ATP合酶催化ATP合成（由ADP和Pi合成）所需的质子梯度。在细胞中，这会导致线粒体ATP耗竭，但某些细胞类型（例如精子、癌细胞）可以通过增加糖酵解来补偿，从而维持总ATP水平[1, 2]。 3. 研究应用： - 在癌症研究中：用于研究癌细胞对线粒体代谢的依赖性（氧化磷酸化与糖酵解，“瓦博格效应”）。其广泛的细胞毒性限制了其临床应用，但它可作为线粒体靶向细胞毒性药物的阳性对照[1]。 - 在生殖生物学中：用于研究线粒体ATP在精子运动和获能中的作用。研究发现，寡霉素A在不降低总ATP水平的情况下抑制精子获能，这表明精子需要局部线粒体ATP（而非糖酵解ATP）来维持与获能相关的过程（例如胆固醇外流、顶体反应）[2]。 4. 局限性： 寡霉素A由于其广泛的毒性（影响所有含线粒体的细胞，包括正常细胞）而无临床应用价值。此外，由于其在水溶液中的溶解度差且可能具有全身毒性，因此也不适用于体内研究（纳入的文献中未报道体内数据）。另外，其在高浓度下对ATP合酶的抑制是不可逆的，因此不太适合用于研究可逆代谢调控[1, 2]。 |
| 分子式 |
C45H74O11
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|---|---|
| 分子量 |
791.06
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| 精确质量 |
790.523
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| 元素分析 |
C, 68.50; H, 9.20; O, 22.30
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| CAS号 |
579-13-5
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| 相关CAS号 |
Oligomycin;1404-19-9;Oligomycin D;1404-59-7;Oligomycin C;11052-72-5;Oligomycin B;11050-94-5
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| PubChem CID |
52947716
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.1±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
886.3±65.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
150-151ºC
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| 闪点 |
252.0±27.8 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.543
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| LogP |
6.17
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| tPSA |
180.05
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
56
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| 分子复杂度/Complexity |
1390
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| 定义原子立体中心数目 |
18
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| SMILES |
CC[C@@H]\1CC[C@H]2[C@H]([C@H]([C@@H]([C@]3(O2)CC[C@@H]([C@@H](O3)C[C@@H](C)O)C)C)OC(=O)/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](C(=O)[C@@H]([C@H]([C@@H](C(=O)[C@]([C@H]([C@@H](C/C=C/C=C1)C)O)(C)O)C)O)C)C)O)C)C
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| InChi Key |
STEWZSZUSBALCS-HQBODTQXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C45H72O11/c1-12-34-17-15-13-14-16-27(4)42(51)44(11,53)43(52)32(9)40(50)31(8)39(49)30(7)38(48)26(3)18-21-37(47)54-41-29(6)35(20-19-34)55-45(33(41)10)23-22-25(2)36(56-45)24-28(5)46/h13-15,17-18,21,24-27,29-36,38,40-42,46,48,50-51,53H,12,16,19-20,22-23H2,1-11H3/b14-13+,17-15+,21-18+,28-24-/t25-,26-,27+,29+,30-,31-,32-,33-,34-,35-,36-,38+,40+,41+,42-,44+,45-/m1/s1
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| 化学名 |
(1S,2R,4E,5R,6R,6S,7S,8R,10S,11S,12R,14S,15R,16S,18E,20E,22S,25R,28R,29S)-22-ethyl-3,4,5,6-tetrahydro-7,11,14,15-tetrahydroxy-6-[(1Z)-2-hydroxy-1-propen-1-yl]-5,6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethyl-spiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2-[2H]pyran]-3,9,13-trione
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| 别名 |
05HQS4AI99; 579-13-5; Oligomycin A; EINECS 209-437-3; UNII-05HQS4AI99; BRN 5702132; RP-32705; MCH-32;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.16 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (3.16 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.16 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.16 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入400 μL PEG300 中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL 生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.16 mM) (饱和度未知) in 10% EtOH + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 EtOH 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 6 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol :15 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.2641 mL | 6.3206 mL | 12.6413 mL | |
| 5 mM | 0.2528 mL | 1.2641 mL | 2.5283 mL | |
| 10 mM | 0.1264 mL | 0.6321 mL | 1.2641 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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isoGDP trisodium
6-Bn-ADP sodium
Aloracetam
Methyl pyruvate
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