| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The target of PF-4981517 (CYP3cide) is cytochrome P450 3A4 (CYP3A4), a mechanism-based (suicide) inhibitor with high selectivity for CYP3A4 over CYP3A5. Key parameters include:
- For recombinant human CYP3A4 (using midazolam 1'-hydroxylation as the activity marker): Half-maximal inhibitory concentration (IC50) = 0.023 μM [1] - For CYP3A4 in pooled human liver microsomes (HLMs, using midazolam 1'-hydroxylation as the marker): IC50 = 0.031 μM [1] - Mechanism-based inactivation parameters for recombinant CYP3A4: Inactivation rate constant (kinact) = 0.14 min⁻¹, Michaelis constant for inactivation (Km) = 0.056 μM, and the inactivation efficiency (kinact/Km) = 2.5 μM⁻¹min⁻¹ [1] - For CYP3A5 (using CYP3A5-high expressor HLMs and midazolam as the substrate): IC50 > 10 μM (negligible inhibitory activity) [1] . |
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用来自无功能 CYP3A5 供体的人肝微粒体 (CYP3A5 3/3)，在检查 CYP3cide 的抑制特性时，观察到非凡的代谢失活效率 (kinact/KI) 为 3300 至 3800 ml • min-1 • μmol-1 。该效率被发现对应于 420-480 nM 的表观 KI 和 1.6 min-1 的最大失活率 (kinact)。当在基因型多态性 CYP3A5 微粒体文库中以完全抑制 CYP3A4 的浓度和预孵育时间评估 CYP3cide 时，CYP3A5 丰度与剩余咪达唑仑 1'-羟化酶活性之间的联系很强[1]。
1. 对重组人CYP3A4活性的抑制：将PF-4981517与重组人CYP3A4、NADPH生成系统及特异性底物咪达唑仑共同孵育时，其以浓度依赖性方式抑制咪达唑仑的1'-羟化反应。浓度为0.1 μM时，CYP3A4活性抑制率达>90%，IC50经测定为0.023 μM。通过超滤去除未结合药物后，抑制活性无显著丢失，证实其对CYP3A4的灭活具有不可逆性 [1] 2. 对人肝微粒体（HLMs）中CYP3A4的抑制：在混合人肝微粒体中，PF-4981517抑制咪达唑仑1'-羟化反应（CYP3A4的经典活性指标）的IC50为0.031 μM。在CYP3A5高表达供体（CYP3A51/1基因型）的肝微粒体中，PF-4981517（0.1 μM）可抑制>90%的CYP3A4介导咪达唑仑代谢，而剩余的代谢活性（归因于CYP3A5）不受影响；浓度高达10 μM时，其对CYP3A5介导咪达唑仑代谢的抑制率<10% [1] 3. 对其他CYP亚型的选择性：PF-4981517对其他主要人CYP亚型的抑制活性极低。对CYP1A2（底物：非那西丁）、CYP2C9（底物：甲苯磺丁脲）、CYP2C19（底物：奥美拉唑）、CYP2D6（底物：右美沙芬）、CYP2E1（底物：氯唑沙宗）的IC50均>10 μM；浓度为10 μM时，对这些CYP亚型的抑制率均<15% [1] 4. 对CYP3A4介导其他药物代谢的抑制：PF-4981517可有效抑制CYP3A4依赖的其他底物代谢。对人肝微粒体中睾酮6β-羟化反应（另一CYP3A4活性指标）的IC50为0.028 μM，对辛伐他汀内酯水解反应（CYP3A4介导）的IC50为0.035 μM；浓度为0.1 μM时，PF-4981517对这些代谢反应的抑制率均>85% [1] 。 |
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| 酶活实验 |
1. 重组人CYP3A4抑制实验：将重组人CYP3A4、NADPH生成系统（葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、NADP+）及特异性底物咪达唑仑（终浓度10 μM）在0.1 M磷酸钾缓冲液（pH 7.4）中混合，加入不同浓度的PF-4981517（0.001、0.005、0.01、0.025、0.05、0.1、0.5、1 μM）或溶媒对照（DMSO，终浓度≤0.1%）。加入NADPH生成系统启动反应，37℃孵育30分钟后，加入2倍体积含内标（如地西泮）的冰乙腈终止反应。10,000×g离心10分钟后，取上清液通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）定量咪达唑仑的主要代谢产物1'-羟基咪达唑仑。抑制率按[1 -（药物组代谢物浓度/对照组代谢物浓度）]×100%计算，采用非线性回归拟合浓度-抑制曲线获得IC50 [1]
2. 人肝微粒体CYP亚型选择性实验：使用混合人肝微粒体（来自>10名供体）或CYP3A5高表达人肝微粒体（CYP3A51/1基因型）。为每个CYP亚型加入特异性底物：非那西丁（CYP1A2）、甲苯磺丁脲（CYP2C9）、奥美拉唑（CYP2C19）、右美沙芬（CYP2D6）、氯唑沙宗（CYP2E1）或咪达唑仑（CYP3A4/CYP3A5）。实验体系包含肝微粒体、NADPH生成系统、底物及PF-4981517（0.001-10 μM）或溶媒对照，孵育及终止条件与重组CYP3A4实验一致。通过LC-MS/MS定量各底物的代谢产物（如非那西丁的代谢产物对乙酰氨基酚、甲苯磺丁脲的代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲），计算每个CYP亚型的IC50 [1] 3. CYP3A4机制性灭活（kinact/Km）实验：将重组人CYP3A4与NADPH生成系统在缓冲液中与不同浓度的PF-4981517（0.01、0.025、0.05、0.1、0.2 μM）混合。在预设时间点（0、2、5、10、15、20、30分钟）取出部分混合液，稀释20倍后加入含咪达唑仑和新鲜NADPH生成系统的“反应体系”中（用于测定剩余酶活性）。稀释后的样品在37℃孵育15分钟，用冰乙腈终止反应，通过LC-MS/MS定量1'-羟基咪达唑仑。以剩余酶活性（相对于0时刻）的自然对数对孵育时间作图，计算各PF-4981517浓度下的灭活速率（kobs）；通过1/kobs对1/[药物浓度]的双倒数图，测定灭活速率常数（kinact）和灭活米氏常数（Km），灭活效率以kinact/Km比值表示 [1] 。 |
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| 动物实验 |
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
1. 作用机制：PF-4981517 是一种基于机制的（自杀式）CYP3A4 抑制剂。经 CYP3A4 代谢后，它形成一种活性中间体，该中间体与 CYP3A4 的血红素基团或载脂蛋白共价结合，导致该酶不可逆失活。这种机制使其区别于可逆性 CYP3A 抑制剂（例如酮康唑），并确保在体外对 CYP3A4 的持续抑制 [1]
2. 作为体外研究工具的用途：PF-4981517 专为体外研究而设计，用于阐明 CYP3A4 和 CYP3A5 在药物代谢中的相对贡献。由于它能选择性地灭活 CYP3A4 而不影响 CYP3A5，因此用 PF-4981517（浓度 ≥0.1 μM）处理 HLM 或重组 CYP3A4/CYP3A5 混合物，可以量化 CYP3A5 介导的代谢（因为 CYP3A4 完全抑制后剩余的活性）。这对于理解由于 CYP3A5 基因多态性（例如，CYP3A51/1 与 CYP3A53/3）导致的药物代谢个体间差异至关重要[1] 3. 与其他 CYP3A 抑制剂的比较：与酮康唑（可同时抑制 CYP3A4 和 CYP3A5）或利托那韦（一种强效但非特异性的 CYP3A 抑制剂）等非选择性 CYP3A 抑制剂不同，PF-4981517 对 CYP3A4 的选择性比 CYP3A5 高 400 倍以上（基于 IC50 比值）。这种高选择性避免了在研究 CYP3A5 介导的代谢时出现混淆结果，使其成为 CYP3A 亚型特异性研究的优良工具 [1] 4. 局限性：PF-4981517 仅供体外使用，尚未评估其在体内的应用（例如，作为治疗药物）。其抑制活性依赖于 NADPH（药物经 CYP3A4 介导活化为活性中间体所必需的物质），因此在缺乏功能性 CYP3A4 或 NADPH 的系统中无效 [1] 。 |
| 分子式 |
C26H32N8
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|---|---|---|
| 分子量 |
456.59
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| 精确质量 |
456.274
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| CAS号 |
1390637-82-7
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| 相关CAS号 |
1390637-82-7;
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| PubChem CID |
71315139
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
630.2±55.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
334.9±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.725
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| LogP |
2.77
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| tPSA |
67.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
678
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CC1=CC=C(C=C1)C2=C(C=NN2C)C3=NN(C4=C3C(=NC=N4)N5CC[C@@H](C5)N6CCCCC6)C
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| InChi Key |
WDWIMDKOXZZYHH-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H32N8/c1-18-7-9-19(10-8-18)24-21(15-29-31(24)2)23-22-25(32(3)30-23)27-17-28-26(22)34-14-11-20(16-34)33-12-5-4-6-13-33/h7-10,15,17,20H,4-6,11-14,16H2,1-3H3/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
1-methyl-3-[1-methyl-5-(4-methylphenyl)pyrazol-4-yl]-4-[(3S)-3-piperidin-1-ylpyrrolidin-1-yl]pyrazolo[3,4-d]pyrimidine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1901 mL | 10.9507 mL | 21.9015 mL | |
| 5 mM | 0.4380 mL | 2.1901 mL | 4.3803 mL | |
| 10 mM | 0.2190 mL | 1.0951 mL | 2.1901 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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