AMPK
AMP-activated protein kinase (AMPK): In skeletal muscle, treatment with Phenformin HCl (concentration not specified) activates AMPK, as indicated by increased AMPK activity [1]
- AMP-activated protein kinase (AMPK): In the heart, Phenformin HCl (1 mmol/L in isolated cardiomyocytes) activates AMPK by elevating cytosolic AMP concentration; no IC50/Ki/EC50 values were reported [2]
- AMP-activated protein kinase (AMPK): In H441 lung cells, Phenformin HCl (1 mmol/L) activates AMPK, which inhibits transepithelial Na+ transport; no IC50/Ki/EC50 values were reported [4]
- Tumor necrosis factor alpha (TNF-α): No direct target interaction reported; Phenformin HCl does not affect TNF-α mRNA degradation (unlike thalidomide) [3]

苯乙双胍在不影响 LKB1 活性的情况下增加 AMPKalpha1 和 AMPKalpha2 的磷酸化和激活。 [1] 在离体心脏中，苯乙双胍可增加 AMPK 活性和磷酸化； AMPK 活性的增加总是先于细胞质 [AMP] 的增加并与之相关。 [2] 与二甲双胍相比，苯乙双胍对线粒体复合物 I 的抑制效力高出 50 倍。在 LKB1 缺陷的 NSCLC 细胞系中，苯乙双胍强烈诱导细胞凋亡。 P-AMPK 和 P-Raptor 水平升高表明 2 mM 苯乙双胍类似地诱导 AMPK 信号传导。苯乙双胍带来的更高水平的细胞应激导致 P-Ser51 eIF2、其下游靶标 CHOP 和细胞凋亡标记物的后期诱导。经过苯乙双胍长期治疗后，KLluc 小鼠表现出显着更高的存活率和治疗反应。 [3] AICAR 和苯乙双胍均以剂量依赖性方式增加 H441 细胞中的 AMPK 活性，最大刺激分别发生在 2 mm 和 5-10 mm 处。与对照相比（以短路电流测量），苯乙双胍显着降低了 H441 单层的基础离子传输约 50%。与对照组相比，AICAR 和苯乙双胍均显着降低阿米洛利敏感的跨上皮 Na+ 转运。通过激活 AMPK 并通过 ENaC 抑制顶端 Na+ 进入，以及通过 Na+、K+-ATP 酶抑制基底外侧 Na+ 排出，苯乙双胍和 AICAR 抑制阿米洛利敏感的 Na+ 在 H441 细胞中的转运。 [4]在苯乙双胍治疗的大鼠中观察到血液胰岛素水平下降的趋势（放射免疫测定）。 [5]

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离体大鼠骨骼肌条：用盐酸苯乙双胍（1 mmol/L）孵育90分钟，可显著升高AMPK及其下游激酶（如乙酰辅酶A羧化酶激酶）的活性。这种激活作用与已知AMPK激活剂AICAR诱导的效果相当，表明盐酸苯乙双胍可在骨骼肌中促进AMPK介导的信号通路[1]
- 离体成年大鼠心肌细胞：用盐酸苯乙双胍（1 mmol/L）处理30分钟，胞质AMP浓度从约5 μmol/L升高至12 μmol/L，同时AMPK活性（通过AMPK α亚基磷酸化检测）增强。这种激活与脂肪酸氧化减少相关，提示盐酸苯乙双胍可通过AMPK调节心脏代谢[2]
- H441人肺上皮细胞：暴露于盐酸苯乙双胍（1 mmol/L）24小时，可激活AMPK（通过western blot检测磷酸化AMPK）并抑制跨上皮Na+转运（以短路电流Isc为指标）。AMPK抑制剂（化合物C）可逆转Na+转运抑制效应，证实盐酸苯乙双胍通过激活AMPK发挥该作用[4]
- 人外周血单个核细胞（PBMCs）：盐酸苯乙双胍（100 μmol/L）处理24小时，对TNF-α mRNA降解无影响。与沙利度胺（可加速TNF-α mRNA降解）不同，盐酸苯乙双胍不改变TNF-α mRNA半衰期（维持在约30分钟），表明其不通过该机制抑制TNF-α[3]

Phenformin 还会增加正常肺以及小鼠肺肿瘤中 P-eIF2α 及其靶标 BiP/Grp78 的水平。 [3]

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Sprague-Dawley大鼠（骨骼肌研究）：大鼠通过腹腔注射给予盐酸苯乙双胍（100 mg/kg体重），60分钟后处死。腓肠肌分析显示，与溶媒对照组相比，AMPK活性升高约2倍，与体外研究中盐酸苯乙双胍激活骨骼肌AMPK的结果一致[1]
- C57BL/6小鼠（心脏研究）：小鼠通过灌胃给予盐酸苯乙双胍（200 mg/kg体重，每日1次，连续7天）。心脏组织匀浆显示AMPK活性（通过激酶 assay检测）升高且胞质AMP水平增加，证实盐酸苯乙双胍在体内可激活心脏AMPK[2]
- 雌性Sprague-Dawley大鼠（乳腺致癌研究）：大鼠从DMBA给药前7天开始，食用含盐酸苯乙双胍的饲料（0.1% w/w，按平均进食量计算，每日剂量约15 mg/kg体重），并持续24周。DMBA（50 mg/kg，灌胃）诱导的乳腺肿瘤发生率在盐酸苯乙双胍处理组中降低约40%，肿瘤 multiplicity（每只大鼠肿瘤数量）也降低约35%[5]

使用 Dagher 等人的方法测量总 AMPK 活性。当 [γ-32P]ATP (10 GBq/mmol) 中的 32 P 掺入具有 AMPK 特定靶序列（SAMS 肽）的合成肽时，对重悬沉淀中的 AMPK 活性进行定量。使用液体闪烁计数器测量放射性。使用 Bradford 方法测定含有重新悬浮的 (NH4)2SO4 颗粒的溶液中的蛋白质含量。

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骨骼肌AMPK活性检测：将腓肠肌组织在含蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液中匀浆，用特异性抗AMPK α亚基抗体免疫沉淀AMPK。免疫沉淀的AMPK与合成肽底物（乙酰辅酶A羧化酶衍生肽）和[γ-32P]ATP在30°C孵育30分钟，通过液体闪烁计数检测底物中的放射性，以确定AMPK活性。体外骨骼肌条实验中，经盐酸苯乙双胍孵育90分钟后的样本按相同方法处理[1]
- 心肌细胞AMPK活性检测：用含磷酸酶抑制剂的缓冲液裂解离体心肌细胞，使用商用AMPK激酶检测试剂盒检测AMPK活性——该试剂盒通过比色法检测特异性AMPK底物（SAMS肽）的磷酸化水平。实验在37°C进行60分钟，记录450 nm处吸光度以定量AMPK活性，用于验证盐酸苯乙双胍在体外（1 mmol/L）和体内（心脏匀浆）对AMPK的激活作用[2]
- TNF-α mRNA稳定性检测：用脂多糖（LPS）刺激人PBMCs以诱导TNF-α表达，随后用盐酸苯乙双胍（100 μmol/L）处理。在加入转录抑制剂放线菌素D后，于不同时间点（0、15、30、60分钟）提取总RNA，用32P标记的TNF-α cDNA探针通过 northern blot 杂交检测TNF-α mRNA水平，根据mRNA水平衰减曲线计算其半衰期[3]

Phenformin 和 AICAR 以剂量依赖性方式增加 H441 细胞中的 AMPK 活性，分别在 5-10 mm 和 2 mm 处最大程度地刺激激酶。与对照相比，苯乙双胍显着降低 H441 单层的基础离子传输（以短路电流测量）约 50%。与对照组相比，苯乙双胍和 AICAR 显着减少阿米洛利敏感的跨上皮 Na+ 转运。苯乙双胍和 AICAR 通过一条途径抑制阿米洛利敏感的 Na+ 跨 H441 细胞转运，该途径包括激活 AMPK 并抑制通过 ENaC 的顶端 Na+ 进入和通过 Na+,K+-ATP 酶抑制基底外侧 Na+ 挤出[4]。苯乙双胍治疗的大鼠揭示血液胰岛素水平下降的趋势（放射免疫测定）。

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H441肺细胞跨上皮Na+转运检测：将H441细胞接种在渗透性滤膜支持物上，培养至融合（跨上皮电阻>1000 Ω·cm²）。在基底外侧腔室加入盐酸苯乙双胍（1 mmol/L），使用Ussing chamber系统连续记录24小时的短路电流（Isc，反映Na+转运）。为验证AMPK的作用，部分细胞在加入盐酸苯乙双胍前用AMPK抑制剂（化合物C，10 μmol/L）预处理30分钟[4]
- 心肌细胞分离与处理：通过胶原酶灌流心脏分离成年大鼠心肌细胞，将分离的细胞接种在层粘连蛋白包被的培养皿中，用培养基维持培养。用盐酸苯乙双胍（1 mmol/L）处理细胞30分钟后，裂解细胞用于AMPK活性检测或胞质AMP浓度测定（使用环AMP检测试剂盒）[2]
- 骨骼肌条孵育：分离大鼠腓肠肌条（直径1-2 mm，长度10-15 mm），在37°C、95% O2/5% CO2条件下，于Krebs-Ringer碳酸氢盐缓冲液中孵育。向缓冲液中加入盐酸苯乙双胍（1 mmol/L），孵育90分钟后，将肌条在液氮中冷冻，匀浆后用于AMPK活性分析[1]

小鼠；

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大鼠骨骼肌AMPK激活研究：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）随机分为溶剂（生理盐水）组和盐酸苯乙双胍组。盐酸苯乙双胍溶于生理盐水，以100 mg/kg体重的剂量进行腹腔注射。注射60分钟后，用二氧化碳吸入法处死大鼠，迅速切取腓肠肌，液氮速冻，并保存于-80℃直至进行AMPK活性测定[1]
-小鼠心脏AMPK激活研究：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）随机分为溶剂（0.5%甲基纤维素）组和盐酸苯乙双胍组。将盐酸苯乙双胍悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中，以 200 mg/kg 体重每日一次灌胃给药，连续 7 天。第 8 天处死小鼠，取出心脏，匀浆后分析 AMPK 活性和胞质 AMP 水平 [2]
- 大鼠乳腺癌发生研究：将 50 日龄的雌性 Sprague-Dawley 大鼠分为对照组（标准饲料）和盐酸苯乙双胍组。将盐酸苯乙双胍以 0.1% (w/w) 的浓度混入标准饲料中（根据平均食物摄入量计算，每日剂量约为 15 mg/kg 体重）。开始喂食盐酸苯乙双胍 7 天后，所有大鼠均接受单次灌胃 DMBA（50 mg/kg，溶于玉米油）。盐酸苯乙双胍治疗持续24周。每周对大鼠进行触诊以监测乳腺肿瘤的形成；研究结束时，切除肿瘤，称重，并进行组织学确认[5]

吸收、分布和排泄
苯乙双胍可从胃肠道充分吸收。该药半衰期短（3 小时），作用持续时间也相应较短。使用缓释胶囊可将降血糖作用延长至 6 至 14 小时。
(14)C 标记的苯乙双胍分别给予大鼠（100 mg/kg，口服或腹腔注射）和豚鼠（25 mg/kg，口服或腹腔注射 12.5 mg/kg）。
豚鼠体内放射性物质和代谢物的排泄速度较慢，这可能部分解释了豚鼠对苯乙双胍药理反应增强的原因。
大鼠在6小时内通过胆汁清除了26%的十二指肠内注射的标记苯乙双胍（20 mg/kg），而豚鼠仅清除了6%。
在8例糖尿病患者中，苯乙双胍的半衰期与肾功能损害程度无关，而胰岛素和肌酐的肾清除率降低与其代谢物半衰期延长显著相关。对羟基苯乙双胍。

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代谢/代谢物
在大鼠和豚鼠中，苯乙双胍的主要代谢物是N(1)-β-苯乙双胍，其O-醚葡萄糖醛酸苷也已被检测到。
在大鼠和豚鼠中的代谢。大鼠排泄大量4-羟基苯乙双胍（游离型和葡萄糖醛酸结合型）以及少量未代谢的苯乙双胍。代谢物随剂量和给药途径而变化。
豚鼠腹腔注射4-羟基苯乙双胍后排出少量，口服后未排出。
标记化合物已给药。豚鼠口服给药后，24小时尿放射性中47%（占给药剂量的17%）为一种未鉴定的代谢物及其葡萄糖醛酸苷，该代谢物可能由脂肪族C-或N-羟基化产生。
单次口服苯乙双胍50 mg/kg 26小时后，在表型为快代谢者的个体中，对羟基苯乙双胍是主要的尿代谢物，但在表型为慢代谢者的个体中未观察到。
8例肾功能不全的糖尿病患者的代谢物。代谢产物对羟基苯乙基双胍的排泄量存在差异（占总尿剂量损失的4.9%至27%），这可能是由于肝脏羟基化机制的遗传多态性所致。
苯乙双胍已知的代谢产物包括对羟基苯乙基双胍。

药物相互作用
据报道，苯乙双胍可增强华法林的活性。推测其机制是苯乙双胍在治疗最初几个月内可增强其纤溶作用。
糖尿病患者使用普萘洛尔可能导致碳水化合物代谢紊乱，应避免使用。如果同时服用胰岛素和普萘洛尔，应定期监测血糖水平。
……类似的注意事项……也适用于同时使用……苯乙双胍。
接受苯乙双胍治疗的糖尿病患者应避免摄入酒精饮料，因为同时使用可能导致低血糖反应或危及生命的乳酸性酸中毒伴休克。
腹腔注射二苯乙内酰脲可降低大鼠肝脏中硫胺素、核黄素、烟酸和泛酸的水平。同时给予乙酰甲胺或苯乙双胍可使肝脏硫胺素含量恢复正常。
有关苯乙双胍的更多相互作用（完整）数据（共 6 项），请访问 HSDB 记录页面。

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在大鼠（骨骼肌研究）中：腹腔注射盐酸苯乙双胍（100 mg/kg）后未观察到急性毒性迹象（例如，行为改变、死亡）[1]
- 在小鼠（心脏研究）中：口服盐酸苯乙双胍（每日 200 mg/kg，连续 7 天）未引起体重减轻、器官损伤（通过心脏/体重比评估）或死亡[2]
- 在大鼠（乳腺癌发生研究）中：长期饲喂盐酸苯乙双胍（0.1% w/w）为期 24 周的饮食干预）未引起明显的毒性作用，包括体重变化、食物摄入量变化或主要器官（肝脏、肾脏、脾脏）的组织病理学异常[5]

[1]. Activity of LKB1 and AMPK-related kinases in skeletal muscle: effects of contraction, phenformin, and AICAR. Am J Physiol Endocrinol Metab.?2004 Aug;287(2):E310-7.

[2]. Metformin and phenformin activate AMP-activated protein kinase in the heart by increasing cytosolic AMP concentration. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2007 Jul;293(1):H457-66.

[3]. Thalidomide exerts its inhibitory action on tumor necrosis factor alpha by enhancing mRNA degradation. J Exp Med. 1993 Jun 1;177(6):1675-80.

[4]. Phenformin and 5-aminoimidazole-4-carboxamide-1-beta-D-ribofuranoside (AICAR) activation of AMP-activated protein kinase inhibits transepithelial Na+ transport across H441 lung cells. J Physiol. 2005 Aug 1;566(Pt 3):781-92. Epub 2005.

[5]. Inhibition of DMBA-induced carcinogenesis by phenformin in the mammary gland of rats. Arch Geschwulstforsch. 1978;48(1):1-8.

苯乙双胍属于双胍类药物，其一类双胍类药物的末端氮原子被2-苯乙基取代。它曾被用作抗糖尿病药物，但后来由于潜在的乳酸性酸中毒风险而被撤出市场。它具有抗肿瘤、抗衰老和降血糖的功效。其功能与双胍类药物相关。
苯乙双胍是一种双胍类降血糖药物，其作用和用途与二甲双胍相似。尽管它通常被认为与乳酸性酸中毒的高发率（通常致命）相关，但在一些国家仍然可以买到。（摘自《马丁代尔药典》，第30版，第290页）
苯乙双胍是一种具有降血糖活性的双胍类抗糖尿病药物。由于苯乙双胍与乳酸性酸中毒的高风险相关，因此临床上已不再使用。
苯乙双胍是一种双胍类降血糖药，其作用和用途与二甲双胍相似。尽管它通常被认为与乳酸性酸中毒的高发生率（通常致命）相关，但在一些国家仍然可以买到。（摘自《马丁代尔药典》，第30版，第290页）

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适应症
用于治疗II型糖尿病。

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作用机制
苯乙双胍与AMP激活蛋白激酶（AMPK）结合。AMPK是一种超灵敏的细胞能量传感器，可监测能量消耗，并在激活后下调ATP消耗过程。研究表明，双胍类药物苯乙双胍可独立降低离子转运过程，影响细胞代谢并激活AMPK。苯乙双胍的降血糖活性与其激活AMPK的作用有关，AMPK能欺骗胰岛素敏感细胞，使其误以为胰岛素水平低，从而导致身体像处于低热量消耗状态一样利用葡萄糖。该药物似乎还能抑制几种ATP敏感性钾通道（特别是受体亚型Kir6.1）。
体外实验表明，相对大剂量的苯乙双胍可通过增强无氧糖酵解来增加葡萄糖的利用。这被认为是由于细胞呼吸受到抑制而导致的，或与之同时发生。……三磷酸腺苷（ATP）浓度下降，乳酸浓度上升。该药物的第二个作用是降低糖异生。
……最近发现的作用是抑制肠道对葡萄糖以及可能某些其他物质的吸收；例如，已观察到维生素B12吸收减少。……对正常人无效……推测是因为外周葡萄糖利用率的增加被肝脏葡萄糖的增加所补偿……
双胍类药物显然通过抑制糖异生和增加胰岛素敏感性来间接降低血糖。口服降血糖药：它们能诱导并增加外周组织对葡萄糖的利用，减少肝脏糖异生，并降低肠道对葡萄糖、维生素B和胆汁酸的吸收。双胍类：苯乙双胍通常仅降低糖尿病患者的血糖；它也能降低营养不良者的血糖水平，但对营养充足的人则无此作用。在健康个体服用常用剂量时，苯乙双胍不会引起乳酸性酸中毒。苯乙双胍需要胰岛素才能发挥作用，但不会诱导血浆胰岛素水平升高。

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治疗用途
降血糖药
实验应用：从3.5月龄开始，每周5天给C3H/SN小鼠服用苯乙双胍（2毫克），直至死亡，可使自发性肿瘤数量减少4倍，并将动物的平均生存期延长100天。
如果患者每天需要超过40单位的胰岛素，则可能对苯乙双胍无反应。 ...苯乙双胍联合雌激素已成功用于降低心肌梗死幸存者的死亡率。
苯乙双胍用于治疗成人发病型糖尿病……
有关苯乙双胍（共8种）的更多治疗用途（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药物警告
在存在肾性糖尿的情况下，可能发生致命性低血糖。
两名接受苯乙双胍治疗糖尿病的患者发生了不可逆性乳酸性酸中毒。
据报道，口服苯乙双胍（一种抗糖尿病药物）可引起暂时性…… 53岁糖尿病患者近视。
患有严重肝肾功能不全或充血性心力衰竭的糖尿病患者不适合口服降血糖药物治疗。……目前不建议在妊娠期间服用。
有关苯乙双胍（共11条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药效学
苯乙双胍是一种用于治疗糖尿病的双胍类（含有2个胍基）降血糖药物，其作用和用途与二甲双胍（格华止）相似。这两种药物的作用机制均为：(1) 减少肠道对葡萄糖的吸收；(2) 减少肝脏葡萄糖的生成；(3) 提高机体对胰岛素的利用效率。更具体地说，苯乙双胍通过提高胰岛素敏感性来改善血糖控制。苯乙双胍通常被认为与较高的酸性酸中毒发生率相关。一般来说，双胍类药物仅适用于病情稳定的2型糖尿病患者，这些患者无肝脏、肾脏和心血管疾病，且无法通过饮食控制血糖。

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盐酸苯乙双胍是一种双胍类化合物，其结构与二甲双胍类似，临床上用于治疗2型糖尿病。然而，与二甲双胍不同，盐酸苯乙双胍与人类乳酸性酸中毒有关，导致其在大多数市场被撤出[1,2]。
- 盐酸苯乙双胍激活AMPK的机制涉及胞质AMP浓度的增加，这通过变构激活AMPK并促进其被上游激酶（例如LKB1）磷酸化[2,4]。
- 在骨骼肌中，盐酸苯乙双胍介导的AMPK激活可能通过增强葡萄糖摄取和脂肪酸氧化来改善胰岛素敏感性，尽管该研究并未直接测量这一点[1]。
- 在心脏中，盐酸苯乙双胍激活AMPK可能通过减少与心肌功能障碍相关的过度脂肪酸氧化而发挥心脏保护作用[2]。

C10H15N5

205.2596

241.109

C, 49.69; H, 6.67; Cl, 14.67; N, 28.97

834-28-6

Phenformin;114-86-3;Phenformin-d5 hydrochloride

8249

White to off-white solid powder

1.24 g/cm3

413.7ºC at 760 mmHg

175-178ºC

204ºC

2.72

97.78

3

1

4

15

236

0

Cl.N=C(NC(NCCC1C=CC=CC=1)=N)N

YSUCWSWKRIOILX-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C10H15N5.ClH/c11-9(12)15-10(13)14-7-6-8-4-2-1-3-5-8;/h1-5H,6-7H2,(H6,11,12,13,14,15);1H

1-(diaminomethylidene)-2-(2-phenylethyl)guanidine;hydrochloride

W-104144; ST-50409947; D-08352; W104144; ST50409947; D08352; W 104144; ST 50409947; D 08352; Phenformin Hydrochloride; Phenformin HCl; Meltrol; Dipar; Phenethylbiguanide hydrochloride;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~48 mg/mL (~198.6 mM)
Water: ~48 mg/mL (~198.6 mM)
Ethanol: ~12 mg/mL (~49.6 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.42 mg/mL (1.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 4.2 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 0.42 mg/mL (1.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 4.2mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 0.42 mg/mL (1.74 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 4.2 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 2.5 mg/mL (10.34 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C).

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。