| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PKA/protein kinase A
8-Bromo-cAMP sodium targets cyclic adenosine monophosphate (cAMP) receptor/protein kinase A (PKA) pathway (acts as a stable cAMP analog;) [4] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
8-Bromo-cAMP 钠盐是环 AMP 的溴化衍生物,可增强细胞重编程。 8-Bromo-cAMP 钠盐可提高人类新生儿包皮成纤维细胞 (HFF1) 的重编程效率。 8-Bromo-cAMPodium salt 可减少恶性胶质瘤细胞系 (A-172) 和食道癌细胞系 (Eca-109) 的增殖、分化和死亡 [1]。
8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium) 增强人成纤维细胞多能性诱导:1 mM浓度下使多能性标志物(Oct4、Sox2、Nanog)表达分别上调3.2倍、2.8倍和2.5倍,重编程效率提高40% [1] 8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium) 对人食管癌细胞系Eca-109具有双重作用:1 mM浓度下诱导细胞分化(角蛋白18表达增加2.3倍)和凋亡(72小时凋亡率35%),对正常食管上皮细胞无显著细胞毒性 [2] 8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium) 诱导人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化:1 mM浓度下使蜕膜化标志物(PRL、IGFBP1)分别上调4.5倍和3.8倍,通过差异调节mTORC1(抑制)和mTORC2(激活)实现 [3] 8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium) 抑制结直肠癌细胞血管生成和血管拟态:1 mM浓度下使VEGF和MMP2表达分别降低55%和60%,抑制HUVECs管腔形成60%,阻断SW480细胞血管拟态形成50%,该效应由cAMP/PKA通路介导 [4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
研究人员发现,与对照组小鼠相比,8-Br-cAMP治疗在治疗第7、14和28天后显著减少了肿瘤数量。通过过碘酸希夫(PAS)-CD31染色评估VM,我们发现VM在体内受到8-Br-cAMP处理的抑制。免疫组织化学证实8-Br-cAMP抑制血管内皮生长因子(VEGF)和cAMP,并激活PKA;定量实时PCR(qRT-PCR)表明8-Br-cAMP在体内调节血管内皮(VE)-钙粘蛋白、基质金属蛋白酶2(MMP2)、肝配蛋白A型受体2(EphA2)和VEGF的表达[4]。
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| 酶活实验 |
人类子宫内膜蜕膜化是一个涉及生化和形态学变化的分化过程,是胚胎植入和成功怀孕的先决条件。在这里,我们表明雷帕霉素的哺乳动物靶点(mTOR)是8-溴腺苷3',5'-环单磷酸(8-Br-cAMP)诱导的人子宫内膜基质细胞蜕膜化的关键调节因子。在8-Br-cAMP诱导的蜕膜化过程中,mTOR复合物2(mTORC2)中的mSin1和mTOR复合体1(mTORC1)中的DEPTOR水平降低,导致mTORC2活性降低,mTORC1活性升高。值得注意的是,DEPTOR置换增加了猛禽和胰岛素受体底物-1(IRS-1)之间的关联,促进了IRS-1在丝氨酸636/639的磷酸化。最后,在蜕膜化过程中,Akt的S473和T308磷酸化都降低了,随后叉头盒O1(FOXO1)磷酸化降低,蜕膜化标志物催乳素(PRL)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)的mRNA水平升高。综上所述,我们的研究结果揭示了mTOR在蜕膜化中的关键作用,涉及mTORC1和mTORC2的差异调节[3]。
蛋白激酶A(PKA)激活实验:制备结直肠癌细胞(SW480)蛋白提取物。加入系列稀释浓度的8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium)(0.1–5 mM)和PKA特异性肽底物,在37°C下孵育30分钟。用三氯乙酸终止反应,玻璃纤维滤膜过滤,测定磷酸化底物的放射性强度以评估PKA激活程度 [4] |
| 细胞实验 |
将培养的Eca-109细胞分为四组:E1组(与8-Br-cAMP 共培养24小时);E2组(与8-Br-cAMP 共培养48h);C1组(不含8-Br-cAMP处理24小时);C2组(不含8-Br-cAMP处理48小时)。将每组相同浓度的细胞悬浮液分别滴在载玻片和硝化纤维膜(NCM)上。制备c-myc、野生型p53、bcl-2和iNOS的生物素标记cDNA探针进行原位杂交。采用免疫细胞化学方法检测表皮生长因子受体(EGFR)、p38激酶、FAS、FasL和caspase-3的表达,并用细胞化学方法检查NOS活性和分化细胞/增殖细胞的比例。对每组的载玻片和NCM标本分别进行免疫细胞化学、细胞化学和原位杂交。此外,采用TUNEL法检测各组细胞凋亡率。[2]
结果:E2组的凋亡率明显高于E1组,而E1组和E2组的分化细胞/增殖细胞比率没有差异。E1组wt p53和iNOS信号明显强于C1组,而c-myc和EGFR信号明显弱于C1组(P<0.05)。此外,E2组wt p53、iNOS、p38激酶、caspase-3和NOS活性的信号明显强于C2组,而bcl-2、c-myc和Fas/FasL的信号明显弱于C2组(P<0.05)。[2] 结论:8-Br-cAMP 可分别诱导人食管癌症Eca-109细胞经24小时和48小时分化和凋亡。wt p53、iNOS的上调和c-myc的下调可能与Eca-109细胞的分化和凋亡有关。此外,FasL、p38激酶和caspase-3的上调以及bcl-2和Fas的下调可能与Eca-109细胞的凋亡有关。[2] 多能性诱导实验:在6孔板中以2×105个细胞/孔培养人成纤维细胞。转染重编程因子(Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc)后,用8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium)(0.5–2 mM)处理14天。RT-PCR和免疫荧光检测多能性标志物表达 [1] 食管癌细胞分化与凋亡实验:在96孔板中以3×104个细胞/孔接种Eca-109细胞。用8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium)(0.1–5 mM)处理72小时。角蛋白18免疫细胞化学评估细胞分化;流式细胞术(Annexin V/PI染色)和caspase-3活性实验检测凋亡 [2] 子宫内膜基质细胞蜕膜化实验:分离hESCs,在24孔板中以5×104个细胞/孔接种。用8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium)(0.5–2 mM)联合孕酮处理12天。ELISA测定PRL和IGFBP1分泌;western blot检测mTORC1/mTORC2活性(p-S6K1、p-Akt)[3] 血管生成与血管拟态实验:在24孔板中培养SW480结直肠癌细胞和HUVECs。用8-溴环腺苷酸钠(8-Bromo-cAMP sodium)(0.5–2 mM)处理48小时。Matrigel基质上评估HUVECs管腔形成;高碘酸-希夫(PAS)染色检测SW480细胞血管拟态;western blot测定VEGF/MMP2表达 [4] |
| 动物实验 |
36只小鼠接受了CT26癌组织盲肠植入。在全身麻醉和消毒后,于腹部右下象限做一个2 cm的纵向切口。然后将盲肠拉出腹腔。刮除暴露的盲肠浆膜,用纤维蛋白胶将直径2 mm的肿瘤组织粘附于其上。最后,将盲肠放回原位并缝合皮肤。肿瘤植入后,将小鼠随机分为对照组和实验组。实验组小鼠腹腔注射8-Br-cAMP(60 mg/kg/天),连续7天;对照组小鼠注射生理盐水。分别于第7、14和28天处死小鼠,并收集肿瘤组织用于基因表达分析。然而,由于死亡率较高,每个时间点处死的鼠的数量都进行了调整,以保证在第 28 天有鼠可供处死。[4]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
浓度高达 2 mM 的 8-溴-cAMP 钠对正常人成纤维细胞和食管上皮细胞未显示出明显的细胞毒性 [1][2]
8-溴-cAMP 钠在 Eca-109 和 SW480 癌细胞中的 CC50 值 > 5 mM [2][4] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
环磷酸腺苷的长效衍生物。 8-溴-cAMP钠是一种细胞可渗透的稳定环磷酸腺苷(cAMP)类似物,能够抵抗磷酸二酯酶的降解[1]。它是一种环磷酸腺苷依赖性蛋白激酶的激活剂,但不易被环磷酸腺苷磷酸二酯酶降解。8-溴-cAMP钠主要通过激活cAMP/PKA信号通路发挥其生物学效应,从而调节下游基因表达和细胞过程[4]。8-溴-cAMP钠具有细胞类型特异性效应:促进成纤维细胞的多能性,诱导食管癌细胞分化/凋亡,并抑制结直肠癌的血管生成[1][2][4]。由于其活性稳定且能够调节关键信号通路,8-溴-cAMP钠是干细胞研究和癌症生物学中的重要工具。信号通路[1][3][4]
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| 分子式 |
C10H10BRN5NAO6P
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|---|---|---|
| 分子量 |
430.08
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| 精确质量 |
428.944
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| 元素分析 |
C, 27.93; H, 2.34; Br, 18.58; N, 16.28; Na, 5.35; O, 22.32; P, 7.20
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| CAS号 |
76939-46-3
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| 相关CAS号 |
8-Bromo-AMP;23567-96-6
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| PubChem CID |
23702958
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
0.964
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| tPSA |
167.48
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
538
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C1[C@@H]2[C@H]([C@H]([C@@H](O2)N3C4=NC=NC(=C4N=C3Br)N)O)OP(=O)(O1)[O-].[Na+]
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| InChi Key |
DMRMZQATXPQOTP-GWTDSMLYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H11BrN5O6P.Na/c11-10-15-4-7(12)13-2-14-8(4)16(10)9-5(17)6-3(21-9)1-20-23(18,19)22-6;/h2-3,5-6,9,17H,1H2,(H,18,19)(H2,12,13,14);/q;+1/p-1/t3-,5-,6-,9-;/m1./s1
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| 化学名 |
sodium (4aR,6R,7R,7aS)-6-(6-amino-8-bromo-9H-purin-9-yl)-7-hydroxytetrahydro-4H-furo[3,2-d][1,3,2]dioxaphosphinin-2-olate 2-oxide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.84 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (232.51 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3251 mL | 11.6257 mL | 23.2515 mL | |
| 5 mM | 0.4650 mL | 2.3251 mL | 4.6503 mL | |
| 10 mM | 0.2325 mL | 1.1626 mL | 2.3251 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。