Ornithine decarboxylase
Ornithine decarboxylase (ODC), the rate-limiting enzyme in polyamine biosynthesis that catalyzes the conversion of ornithine to putrescine, the first step in the synthesis of polyamines (putrescine, spermidine, and spermine). Eflornithine HCl hydrate is an irreversible suicide inhibitor of ODC that binds to the active site of the enzyme and forms a covalent adduct, leading to permanent inactivation of the enzyme.

依氟鸟氨酸是一种特异性、不可逆的鸟氨酸脱羧酶抑制剂，它通过抑制毛囊中的该酶来减缓毛发生长[2]。

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采用弗朗兹扩散池对依氟鸟氨酸进行了体外渗透研究。当将依氟鸟氨酸乳膏涂抹于预先用微针处理的小鼠皮肤区域时，其抑制毛发生长的活性显著增强，这很可能是因为微针产生的微孔允许依氟鸟氨酸渗透到皮肤中，体外渗透研究证实了这一点。免疫组织化学数据显示，当将依氟鸟氨酸乳膏涂抹于预先用微针处理的皮肤区域时，皮肤和毛囊中的细胞增殖也显著受到抑制。[3]
盐酸依氟鸟氨酸水合物不可逆地抑制鸟氨酸脱羧酶，阻断鸟氨酸转化为腐胺，从而降低细胞内多胺水平。多胺对细胞生长、分化和复制至关重要，其耗竭会导致细胞增殖抑制。在布氏锥虫（非洲昏睡病的病原体）中，由于该寄生虫的生长和存活依赖于多胺，因此多胺耗竭是致命的。该化合物的不可逆作用机制使其即使在药物浓度下降后仍能持续抑制鸟氨酸脱羧酶（ODC）。

在过去五十年中，唯一获批用于治疗人类非洲锥虫病的新型药物是依氟鸟氨酸。它主要用作对美拉胂醇无效的冈比亚锥虫感染的备用药物[1]。在减少面部多毛症患者的面部毛发生长方面，15%依氟鸟氨酸乳膏的效果优于安慰剂。经过24周的疗程，58%的依氟鸟氨酸治疗组患者和34%的安慰剂组患者的面部多毛症症状至少有所改善[2]。当将依氟鸟氨酸乳膏涂抹于预先进行过微针治疗的小鼠皮肤区域时，依氟鸟氨酸的毛发生长抑制活性显著增强[3]。在高血压持续14天后，用依氟鸟氨酸治疗收缩性高血压大鼠，可使氯化钾和去甲肾上腺素引起的收缩力恢复正常，并使乙酰胆碱引起的收缩力减弱[4]。
体内研究表明，盐酸依氟鸟氨酸水合物对西非昏睡病病原体——冈比亚锥虫有效，并被用作该病的一线治疗药物。该化合物对卡氏肺囊虫肺炎（PCP）也有效。由于依氟鸟氨酸能够消耗多胺并抑制细胞增殖，因此已被研究用于治疗多种癌症（尤其是神经母细胞瘤）。外用方面，依氟鸟氨酸可用于减少女性面部多余毛发（Vaniqa）。

在利用沙门氏菌和两种酵母菌株进行的体外研究中，依氟鸟氨酸未诱导突变[1]。

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依氟鸟氨酸盐酸盐体外透过小鼠皮肤的渗透性[3]
采用Franz扩散池装置进行体外渗透试验，方法如前所述（Kumar等，2012；Kumar等，2011；Naguib、Kumar和Cui，2014），使用C57BL/6小鼠背部下方的皮肤。在采集皮肤前24小时，用电动理发器修剪毛发。采集皮肤后，用铝箔包裹，并在-20°C下保存最多一个月，需要时即可使用。文献中通常采用-20°C冷冻皮肤（不使用冷冻保护剂），此类皮肤样本也常用于渗透性研究（Stahl、Wohlert和Kietzmann，2012）。 Dennerlein等人研究表明，将新鲜切取的人体皮肤在-20°C下冷冻保存长达30天，不会影响皮肤的渗透性（Dennerlein等人，2013）。其他研究人员发现，当人体皮肤用铝箔包裹并在-26°C下保存时，皮肤的屏障功能可保持长达6个月（Badran、Kuntsche和Fahr，2009）。去除脂肪层后，将皮肤背面朝上固定在Franz扩散池上。接收室中装有5毫升水，并使用Haake SC 100水循环器（ThermoScientific，Wellington，NH）维持在37°C。在将皮肤固定到Franz扩散池之前，先用Dermaroller®微针滚轮对修剪过的皮肤进行处理，具体方法如前所述（Kumar等人，2011；Naguib、Kumar和Cui，2014）。将皮肤样本置于天平的平面上，用微针滚轮在皮肤表面沿四个垂直方向滚动，每个方向滚动5次，共滚动20次，施加压力为350–400 g，滚动过程中用天平持续测量压力。皮肤扩散面积为0.64 cm²。供体室中加入500 μl水中溶解的4 mg盐酸依氟鸟氨酸，并用封口膜覆盖以防止蒸发。分别在0、1、3、6、8和24小时后，从受体室中取出150 μl样本，并立即补充新鲜培养基。采用高效液相色谱法（HPLC）分析样本，方法参考Saravanan等人（2009）的方法并稍作修改。采用配备 ZORBAX Eclipse Plus C18 (5 μm, 4.6 × 150 mm) 色谱柱的 Agilent 1260 Infinity 高效液相色谱仪进行色谱分析，流动相为乙腈-缓冲液混合物 (70%:30%，v/v)。缓冲液由 0.68 g 磷酸二氢钾溶于 1 L 水中配制而成。流速为 0.8 mL/min。检测波长为 210 nm。
体外酶活性测定包括测定细胞裂解液或纯化酶制剂中的鸟氨酸脱羧酶 (ODC) 活性。将酶与其底物（鸟氨酸）和不同浓度的盐酸依氟鸟氨酸水合物一起孵育，并通过高效液相色谱法或放射性测定法测定腐胺的生成量。通过将酶与化合物预孵育，然后进行充分透析以去除未结合的药物，证实了抑制作用的不可逆性，结果表明酶活性仍然受到抑制。IC50 值由浓度-效应曲线确定。

皮肤组织用10%中性缓冲福尔马林溶液固定24小时，用0.1 M磷酸钠缓冲液（pH 7.4）洗涤，经梯度乙醇脱水，石蜡包埋，并进行垂直切片。切片在德克萨斯大学奥斯汀分校戴尔儿科研究所的组织学和组织处理中心进行苏木精-伊红（H&E）染色或5-溴-2′-脱氧尿苷（BrdU）抗体染色。小鼠在安乐死前30分钟腹腔注射溶于磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.4，10 mM）的BrdU，剂量为100 μg/g体重。所有皮肤切片均在奥林巴斯BX53显微镜下进行检查[3]。
盐酸依氟鸟氨酸水合物的细胞活性测定包括用该化合物处理细胞，并通过高效液相色谱（HPLC）或液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定多胺水平。细胞增殖通过细胞计数或代谢测定进行评估。这些测定证实了该化合物抑制细胞生长和消耗多胺的能力。对于布氏锥虫，通过测量寄生虫的生长和存活率来评估该化合物的杀锥虫活性。这些测定证实，盐酸盐水合物形式与母体化合物具有相同的生物活性。

本研究采用小鼠模型进行体内疗效研究，通过监测在预先用微针处理过的小鼠背部下方皮肤涂抹依氟鸟氨酸乳膏后毛发的再生情况来进行。同时，对治疗区域的皮肤和毛囊进行组织学检查[3]。
雌性C57BL/6小鼠（8-10周龄）由于其毛发生长周期与色素周期同步，是研究不同毛发生长周期阶段生理作用的理想模型（Slominski、Paus和Costantino，1991）。每个实验组包含3-4只小鼠。对麻醉小鼠背部下方皮肤的毛发进行以下处理：使用电动剃毛器修剪；使用之前描述的GiGi®蜂蜜热蜡拔毛（Xiao等，2012）；或使用Nair®脱毛膏进行化学脱毛。去除毛发后的皮肤区域用刮匙涂抹13.9%盐酸依氟鸟氨酸乳膏（每次治疗每只小鼠约50毫克），每日两次，间隔至少8小时，最长持续36天。另一组小鼠用电推剪修剪了涂抹部位的毛发，并在每次涂抹依氟鸟氨酸乳膏前，按照先前描述的方法（Kumar等人，2012）使用微针滚轮进行治疗。简而言之，将小鼠放置在天平的平面上，用微针滚轮在标记的皮肤表面滚动10次，方向与小鼠体长平行，施加350-400克的压力（如天平所示）。对照组小鼠背部皮肤的毛发通过修剪、拔除或使用Nair®化学脱毛去除，但不使用依氟鸟氨酸乳膏进行治疗。在首次涂抹依氟鸟氨酸乳膏后，通过拍摄小鼠皮肤区域的数码照片，评估毛发再生情况，最长观察时间为36天。在研究的最后一天，对动物实施安乐死，并从治疗区域采集皮肤样本进行免疫组织化学研究。[3]
依氟鸟氨酸盐酸盐水合物的体内动物研究通常涉及对非洲锥虫病、癌症或其他疾病的啮齿动物模型进行给药。该化合物以不同的剂量和途径给药，并通过测量寄生虫血症、肿瘤生长或其他疾病特异性终点来评估疗效。药代动力学参数通过连续血液采样确定。这些研究确定了依氟鸟氨酸盐酸盐水合物在各种疾病模型中的疗效和剂量反应关系。

吸收、分布和排泄
口服依福鸟氨酸后，依福鸟氨酸的血浆峰浓度 (Cmax) 在给药后 3.5 小时达到 (Tmax)。食物（高脂肪和高热量）不影响依福鸟氨酸的 Cmax 和 AUC（浓度-时间曲线下面积）。将药片碾碎并加入标准布丁混合物中，对依福鸟氨酸的暴露量（Cmax 和 AUC6h）没有影响。在临床使用条件下，对于面部毛发过多的女性，单次或多次使用 13.9% (w/w) 依福鸟氨酸乳膏制剂后，平均经皮吸收量低于放射性剂量的 1%。临床使用条件包括在给予放射性标记剂量前 2 小时内剃须，以及其他形式的面部脱毛，例如剃毛、拔毛或镊子拔毛。每日两次给药，四天内即可达到稳态。在临床应用条件下，10名面部毛发过多的女性（n=10）每日两次涂抹0.5克乳膏（总剂量1.0克/天；相当于139毫克无水依福鸟氨酸盐酸盐），其稳态血药浓度峰值（Cmax）、谷浓度（Ctrough）和12小时药时曲线下面积（AUC12hr）分别约为10纳克/毫升、5纳克/毫升和92纳克·小时/毫升（以无水依福鸟氨酸盐酸盐游离碱计）。在稳态条件下，每日两次涂抹0.5克乳膏（总剂量1.0克/天），依福鸟氨酸的剂量标准化峰浓度（Cmax）和每日系统暴露量（AUC）预计分别比每日一次口服370毫克低约100倍和60倍。该化合物不经代谢，主要以原形经尿液排出。依福鸟氨酸的分布容积 (Vz/F) 为 24.3 L，清除率 (CL/F) 为 5.3 L/h。在临床应用条件下，对于面部多毛症女性患者，单次或多次使用 13.9% (w/w) 乳膏制剂后，依福鸟氨酸的平均经皮吸收量低于放射性剂量的 1%。临床应用条件包括在涂抹放射性标记药物前 2 小时内剃须。除了其他面部脱毛方法（如剪毛、拔毛或镊子拔毛）外，在临床使用条件下，对于面部毛发过多的女性（n=10），每日两次涂抹0.5克乳膏（总剂量1.0克/天；相当于139毫克无水依福鸟氨酸盐酸盐）后，以无水依福鸟氨酸盐酸盐游离碱表示的稳态Cmax、Ctrough和AUC12hr分别约为10纳克/毫升、5纳克/毫升和92纳克/毫升。
在稳态下，与每日370毫克相比，每日两次涂抹0.5克乳膏（总剂量1.0克/天）可使依福鸟氨酸的剂量标准化峰浓度（Cmax）和每日全身暴露量（AUC）分别降低约100倍和60倍。每日口服一次。
依氟尼汀不经代谢，以原形经尿液排出。
有关依氟尼汀（8种代谢物）的吸收、分布和排泄的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
该化合物不经代谢，主要以原形经尿液排出。

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生物半衰期
依氟尼汀的终末血浆消除半衰期为3.5小时，表观稳态血浆半衰期约为8小时。
依氟尼汀的表观稳态血浆t1/2约为8小时。
盐酸依氟尼汀水合物可口服或静脉注射用于治疗全身感染，也可局部用于治疗多毛症。口服后，该化合物可被吸收，但口服生物利用度有限。依氟尼汀广泛分布于体内，包括中枢神经系统。该化合物主要以原形经尿液排出，消除半衰期约为3-4小时。其盐酸盐水合物形式的药代动力学性质与母体化合物相似。

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
母亲们连续7天每日接受400 mg/kg efflunitine静脉输注，母乳喂养的婴儿未出现任何严重不良反应。局部用药efflunitine吸收不良，因此不太可能进入婴儿血液，也不太可能对母乳喂养的婴儿造成任何不良影响。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
在刚果民主共和国，一项针对33名婴儿的队列研究追踪了住院服用尼福鲁莫司且正在哺乳的母亲（未具体说明哺乳情况）。 30位母亲完成了30剂口服尼福鲁莫司（15 mg/kg/天），所有母亲均接受了14次静脉输注依氟尼汀（400 mg/kg/天），疗程7天，用于治疗人类非洲锥虫病（昏睡病）。平均而言，哺乳期母亲同时服用四种其他药物，包括阿莫西林、环丙沙星、甲硝唑、复方磺胺甲噁唑、阿司匹林和双氯芬酸（各1例）；氢化可的松、异丙嗪和奎宁（各2例）；左旋咪唑（6例）；磺胺多辛-乙胺嘧啶（8例）；氨基比林（13例）；对乙酰氨基酚（16例）；以及甲苯咪唑（17例）。所有母乳喂养的婴儿均未报告严重不良事件。
◉ 对哺乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
盐酸依氟鸟氨酸水合物最显著的毒性是骨髓抑制，包括贫血、白细胞减少症和血小板减少症。其他不良反应包括胃肠道紊乱、听力丧失和脱发。该化合物的毒性与其作用机制相关——多胺耗竭会影响快速分裂的细胞。尽管存在这些毒性，盐酸依氟鸟氨酸水合物通常耐受性良好，并且仍然是治疗非洲锥虫病的重要药物。

[1]. Eflornithine for the treatment of human African trypanosomiasis. Parasitol Res. 2003 Jun;90 Supp 1:S49-52.

[2]. Topical eflornithine. Am J Clin Dermatol. 2001;2(3):197-201; discussion 202.

[3]. A method to improve the efficacy of topical eflornithine hydrochloride cream. Drug Deliv. 2016 Jun;23(5):1495-501.

[4]. Eflornithine alters changes in vascular responsiveness associated with coarctation hypertension. Clin Exp Hypertens. 1997 Apr;19(3):297-312.

盐酸依氟诺明一水合物是锥虫溶解药物依福鸟氨酸的盐酸盐和水合物。它是一种含有依福鸟氨酸的盐酸盐和水合物。盐酸依氟诺明是依福鸟氨酸的盐酸盐形式，依福鸟氨酸是一种具有抗肿瘤活性的二氟甲基化鸟氨酸化合物。依氟诺明不可逆地抑制鸟氨酸脱羧酶（一种多胺生物合成所需的酶），从而抑制肿瘤细胞的形成和增殖。多胺参与核小体寡聚化和DNA构象，从而创造一种刺激细胞肿瘤转化的染色质环境。(NCI04) 鸟氨酸脱羧酶抑制剂，鸟氨酸脱羧酶是多胺生物合成途径中的限速酶。另见：依氟诺明（含活性部分）。药物适应症：治疗女性面部多毛症。依氟诺明是过去50年来唯一获批用于治疗人类锥虫病的新型分子药物。它主要用作对美拉松耐药的冈比亚锥虫病病例的备用药物。治疗冈比亚锥虫病（昏睡病）最常用的剂量方案是每6小时静脉注射100毫克/公斤体重，疗程14天（儿童为150毫克/公斤体重）。由于罗得西亚锥虫（Trypanosoma brucei rhodesiense）的鸟氨酸脱羧酶周转率高，依氟诺明的疗效有限。依氟诺明治疗期间常见不良反应，其特征与其他用于治疗癌症的细胞毒性药物类似。不良反应的发生率和严重程度会随着治疗时间和患者一般状况的恶化而增加。通常，依氟诺明的不良反应在治疗后是可逆的。这些不良反应包括癫痫发作（7%）、恶心、呕吐和腹泻等胃肠道症状（10%-39%）、导致贫血、白细胞减少和血小板减少的骨髓毒性（25%-50%）、听力障碍（癌症患者中为5%）以及脱发（5%-10%）。该药物可抑制小鼠、大鼠和兔的胚胎发育，但其在母乳中的分泌情况尚不清楚。平均半衰期约为3-4小时，分布容积约为0.35 L/kg。肾清除率约为2 mL/min/kg（静脉注射），占药物清除率的80%以上。口服10 mg/kg剂量的生物利用度估计为54%。治疗成功的关键决定因素之一似乎是治疗期间达到的脑脊液药物浓度。研究表明，浓度高于 50 μmol/L 是持续清除寄生虫所必需的。由于其作用机制是抑制而非杀死锥虫，因此起效相对较慢。[1] 依氟诺明是一种特异性、不可逆的鸟氨酸脱羧酶抑制剂，它通过抑制毛囊中的这种酶来减缓毛发生长。在患有面部多毛症（毛发过多症）的女性中，当每天两次将 15% 的依氟诺明乳膏涂抹于下巴下方 50 cm² 的剃毛皮肤上时，经皮吸收率低于 1%。在针对面部多毛症女性的临床研究中，采用客观和主观方法均证实，15% 的依氟诺明乳膏在减少毛发生长方面优于安慰剂，且在治疗 2 至 8 周后即可观察到疗效。经过24周的治疗，依福鸟氨酸组58%的患者和安慰剂组34%的患者面部多毛症症状至少有所改善（为便于分析，所有未在第24周接受评估的患者均被视为病情恶化或无改善）。此外，依福鸟氨酸组32%的患者被认为治疗成功（至少有显著改善），而安慰剂组仅为8%。停药后8周内，毛发生长恢复至治疗前水平。该研究采用自评问卷评估了治疗对患者健康六个方面的影响。结果显示，依福鸟氨酸组患者的平均总体不适和痛苦程度较安慰剂组降低了33%（安慰剂组降低了15%）。不良事件主要影响皮肤。依福鸟氨酸组仅灼烧感/刺痛感/麻木感的发生率显著高于安慰剂组。 [2]

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背景：面部多毛症是女性的美容问题，可能导致严重的焦虑和自卑。依氟鸟氨酸乳膏适用于治疗面部多毛症。然而，即使长期、高频率使用，其疗效和患者总体满意度仍然有限，仍有改进空间。目的：本研究旨在测试微针疗法对依氟鸟氨酸乳膏体外皮肤渗透性和体内疗效的影响（小鼠模型）。材料与方法：使用弗朗兹扩散池研究依氟鸟氨酸的体外渗透性。通过监测小鼠背部皮肤在微针预处理区域涂抹依氟鸟氨酸乳膏后的毛发再生情况来研究其体内疗效。同时对治疗区域的皮肤和毛囊进行组织学检查。结果与讨论：当将依氟鸟氨酸乳膏涂抹于经微针预处理的小鼠皮肤区域时，其抑制毛发生长的活性显著增强。这可能是因为微针形成的微孔促进了依福鸟氨酸渗入皮肤，体外渗透实验也证实了这一点。免疫组织化学数据显示，当在预先用微针处理的皮肤区域涂抹依福鸟氨酸乳膏时，皮肤和毛囊中的细胞增殖也显著受到抑制。结论：微针疗法联合局部依福鸟氨酸疗法是一种潜在可行的增强依福鸟氨酸抑制毛发生长能力的方法。关键词：细胞增殖；抑制毛发生长；微针；皮肤渗透；毛发过度生长。[3] 本研究探讨了多胺合成抑制剂依福鸟氨酸（α-二氟甲基鸟氨酸）对主动脉缩窄的高血压大鼠主动脉环血管对氯化钾、去甲肾上腺素、硝普钠和乙酰胆碱反应的时间效应。主动脉缩窄引起的高血压降低了主动脉环对氯化钾和去甲肾上腺素的收缩反应，增加了对去甲肾上腺素的敏感性（EC50值降低），并在高血压14天后减弱了对乙酰胆碱的舒张反应。在用依福鸟氨酸治疗的主动脉缩窄高血压大鼠中，对氯化钾和去甲肾上腺素的收缩强度以及对乙酰胆碱的舒张反应在高血压14天后恢复正常。所有组在所有时间点对硝普钠的反应均相似。依福鸟氨酸对主动脉缩窄引起的对去甲肾上腺素的过度反应没有影响。这些研究表明，长期服用依福鸟氨酸可以使血压显著升高的患者的血管功能恢复正常。这种功能的恢复与依福鸟氨酸介导的结构异常的消退有关，这些结构异常通常与压力负荷过重引起的高血压有关。 [4]
盐酸依氟鸟氨酸水合物 (DFMO) 是一种不可逆的鸟氨酸脱羧酶 (ODC) 抑制剂，用于治疗由冈比亚锥虫 (Trypanosoma brucei gambiense) 引起的非洲锥虫病（昏睡病）。它也可外用于治疗多毛症（Vaniqa）。该化合物已被研究用于多种其他适应症，包括卡氏肺囊虫肺炎 (PCP)、癌症化学预防和神经母细胞瘤治疗。盐酸依氟鸟氨酸水合物是药物制剂中使用的药用盐形式。

C6H15CLF2N2O3

236.6447

236.074

C, 30.45; H, 6.39; Cl, 14.98; F, 16.06; N, 11.84; O, 20.28

96020-91-6

Eflornithine;70052-12-9;L-Eflornithine monohydrochloride;69955-42-6;Eflornithine hydrochloride;68278-23-9;L-Eflornithine;66640-93-5; 96020-91-6 (HCl hydrate) 68278-23-9 (HCl); 70050-55-4 (R-isomer); 69955-42-6 (S-isomer); 66640-93-5 (L-isomer)

441361

White to off-white solid powder

1.293g/cm3

347ºC at 760mmHg

>210ºC (dec.)

163.7ºC

1.91

98.57

5

7

5

14

166

0

Cl.O=C(C(C(F)F)(CCCN)N)O.O

FJPAMFNRCFEGSD-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C6H12F2N2O2.ClH.H2O/c7-4(8)6(10,5(11)12)2-1-3-9/h4H,1-3,9-10H2,(H,11,12)1H1H2

2,5-diamino-2-(difluoromethyl)pentanoic acid hydrochloride hydrate

Ornidyl; CPP-1X; RMI71782; Eflornithine hydrochloride hydrate; Eflornithine hydrochloride monohydrate; Vaniqa; Eflornithine HCl; dfmo; MDL 71,782 A; Eflornithine HCl hydrate; RMI-71782; RMI 71782; DL-Ornithine hydrochloride;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~83.33 mg/mL (~352.14 mM)

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (422.58 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。