| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
SphK1
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：PF543是一种细胞渗透性羟甲基吡咯烷化合物，以可逆和鞘氨醇竞争性的方式抑制SphK-1/SphK1催化的鞘氨醇磷酸化，对S1P受体没有亲和力，并且对SphK2的抑制活性大大降低（抑制6.8%） 10 μM) 或 46 个其他脂质和蛋白激酶 (IC50 >10 μM)。在 SphK1 过表达的 1483 头颈癌细胞中，PF-543 使内源性 S1P 水平降低 10 倍，同时鞘氨醇水平成比例增加。 PF-543 以高亲和力可逆地结合 SphK1（k off t1/2=8.5 分钟），结合常数 (Kd) 为 5 nM。尽管细胞S1P/鞘氨醇比率发生显着变化，PF543对1483、A549、LN229、Jurkat、U937和MCF-7细胞的增殖和存活没有影响。 PF-543 是全血中 S1P 形成的有效抑制剂，表明鞘氨醇激酶的 SphK1 亚型是人类血液中 S1P 的主要来源。激酶测定：开发了一种 384 孔形式的 SphK 酶测定，其基于使用微流体毛细管电泳迁移率变动系统将 FITC-S1P 与未反应的 FITC-鞘氨醇底物分离。简而言之，将 3 nM SphK1–His6 与 1 μM FITC-鞘氨醇、20 μM ATP 和 10 μM 化合物（DMSO 终浓度为 2%）在含有 100 mM Hepes (pH 7.4)、1 mM MgCl2、0.01 的缓冲液中一起孵育。在 384 孔 Matrical MP-101-1-PP 板中加入 % Triton X-100、10% 甘油、100 μM 原钒酸钠和 1 mM DTT 1 小时。通过在 100 mM Hepes 中添加 20 μL 30 mM EDTA 和 0.15% Coating Reagent-3 来淬灭反应混合物 (10 μL)，并在 Caliper LabChip 3000 仪器中分析每个反应的一小部分（几纳升）在 -1.5 psi (psi=6.9 kPa) 压力下，下游电压为 -1900 V，吸气时间为 0.2 s。磷酸化荧光产物和未磷酸化荧光底物显示为独特的峰，并使用卡尺数据进行定量。细胞测定：在表达高水平 SphK1 且 S1P 产生率异常高的 1483 头颈癌细胞培养物中，PF-543 预处理 1 小时，使内源性 S1P 水平降低 10 倍，同时 S1P 水平成比例增加。鞘氨醇水平。这表明pf-543对SphK1具有显着抑制作用。然而，尽管细胞 S1P/鞘氨醇比率发生了巨大变化，但特异性抑制 SphK1 对 1483 细胞培养物的增殖和存活没有影响。
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| 体内研究 (In Vivo) |
还在人全血中离体检测了 PF-543 的抑制活性。制备了具有高SphK1活性的人全血，能够快速将C17-鞘氨醇转化为C17-S1P。 PF-543 处理表明 PF-543 是 SphK1 的有效抑制剂，能够阻断 >90% 的 C17-S1P 形成
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| 酶活实验 |
SphK 酶测定采用 384 孔格式开发，使用微流体毛细管电泳迁移率变换系统将未反应的 FITC-鞘氨醇底物与 FITC-S1P 分离。总之，将 1 μM FITC-鞘氨醇、20 μM ATP 和 10 μM 化合物（DMSO 最终浓度为 2%）以及 3 nM SphK1–His6 在 384 孔 Matrical MP-101 中孵育 1 小时-1-PP 板，其缓冲液含有 100 mM Hepes (pH 7.4)、1 mM MgCl2、0.01% Triton X-100、10% 甘油、100 μM 原钒酸钠和 1 mM DTT。通过添加 20 μL 30 mM EDTA 和 100 mM Hepes 中的 0.15% Coating Reagent-3 淬灭反应混合物 (10 μL)。然后在 Caliper LabChip 3000 仪器中以 -1900 V 的下游电压、0.2 s 的吸液时间和 -1.5 psi (psi=6.9 kPa) 的压力对每个反应的一小部分（几纳升）进行分析。卡尺数据用于量化作为磷酸化荧光产物和未磷酸化荧光底物出现的不同峰。
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| 细胞实验 |
在 1483 个表达高水平 SphK1 并以极高速率产生 S1P 的头颈癌细胞培养物中，用 PF-543 预处理一小时，可将内源性 S1P 水平降低十倍，同时按比例增加鞘氨醇水平。观察到 pf-543 对 SphK1 的显着抑制。然而，SphK1 的特异性抑制并不影响 1483 细胞培养物的存活和增殖，尽管细胞 S1P/鞘氨醇比率发生了巨大变化。
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C27H31NO4S
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|---|---|---|
| 分子量 |
465.6
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| 精确质量 |
465.2
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| 元素分析 |
C, 69.65; H, 6.71; N, 3.01; O, 13.74; S, 6.89
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| CAS号 |
1415562-82-1
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| 相关CAS号 |
PF-543 Citrate; 1415562-83-2; PF-543 hydrochloride; 1706522-79-3
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| 外观&性状 |
Waxy semisolid
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| SMILES |
CC1=CC(=CC(=C1)OCC2=CC=C(C=C2)CN3CCC[C@@H]3CO)CS(=O)(=O)C4=CC=CC=C4
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| InChi Key |
NPUXORBZRBIOMQ-RUZDIDTESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H31NO4S/c1-21-14-24(20-33(30,31)27-7-3-2-4-8-27)16-26(15-21)32-19-23-11-9-22(10-12-23)17-28-13-5-6-25(28)18-29/h2-4,7-12,14-16,25,29H,5-6,13,17-20H2,1H3/t25-/m1/s1
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| 化学名 |
[(2R)-1-[[4-[[3-(benzenesulfonylmethyl)-5-methylphenoxy]methyl]phenyl]methyl]pyrrolidin-2-yl]methanol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
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| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1478 mL | 10.7388 mL | 21.4777 mL | |
| 5 mM | 0.4296 mL | 2.1478 mL | 4.2955 mL | |
| 10 mM | 0.2148 mL | 1.0739 mL | 2.1478 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
SKI II
JTE-013 HCl
Siponimod (BAF312)
Siponimod fumarate (BAF312)
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