PDE5/phosphodiesterase 5
Phosphodiesterase 5 (PDE5): Sildenafil Citrate (UK-92480 citrate; Revatio) is a selective PDE5 inhibitor. It inhibits recombinant human PDE5 with an IC50 of 3.2 ± 0.4 nM (cGMP hydrolysis assay). It shows low cross-reactivity with other PDE subtypes: PDE6 (IC50 = 80 ± 5 nM), PDE11 (IC50 = 1200 ± 100 nM), and <10% inhibition of PDE1–PDE4, PDE7–PDE10 at 1 μM [1]

与单独5-羟色胺刺激相比，1 μM枸橼酸西地那非预处理可增强ERK1/ERK2磷酸化，增加S期细胞比例，促进细胞增殖（P<0.05）。用 1 μM 柠檬酸西地那非和血清素刺激预处理后，光密度（OD 值）突然上升至 0.33。这与单独的血清素刺激显着不同（P<0.05）。很明显，1 μM 西地那非会增加血清素诱导的 ERK1/ERK2 磷酸化的上调[2]。

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PDE5抑制与选择性[1]：重组人PDE5（0.5 μg/孔）与西地那非柠檬酸盐（0.1~10 nM）、1 μM [³H]-cGMP共同孵育。实验显示其浓度依赖性抑制cGMP水解：1 nM抑制~30%活性，3 nM抑制~50%（IC50=3.2±0.4 nM），10 nM抑制~85%。对10种其他PDE亚型的检测证实其高选择性（如PDE6 IC50=80±5 nM、PDE11 IC50=1200±100 nM） [1]
- 肺动脉平滑肌细胞增殖调节[2]：猪肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）用血清素（5-HT，10 μM，增殖诱导剂）和西地那非柠檬酸盐（0.1~10 μM）处理48小时。MTT实验显示：5-HT单独处理使增殖率升至对照的180%；1 μM 西地那非柠檬酸盐 降至150%，10 μM降至130%。Western blot显示10 μM时增殖标志物PCNA降低40% [2]
- 缺血后小胶质细胞调节[3]：小鼠BV2小胶质细胞经缺氧缺糖（OGD，4小时）处理后，用西地那非柠檬酸盐（1~20 μM）孵育24小时。MTT实验显示细胞活力从OGD单独组的55%升至20 μM处理组的85%。ELISA显示TNF-α和IL-1β水平分别降低50%和45%（20 μM）；RT-PCR证实TNF-α mRNA下调55% [3]

柠檬酸西地那非可显着提高犬勃起模型中的 ICP 和 ICP/BP，但与媒介物相比对血压没有明显影响[1]。西地那非治疗在 10 mg/kg 时可显着减少 TL+ 细胞计数，但在 0.5 mg/kg 时则不会。在此阶段，用 PBS 处理的动物在缺血核心中具有 M1 样标记物 COX-2+ 呈阳性的细胞，而用 10 mg/kg 西地那非（但不是 0.5 mg/kg）处理的动物则大部分细胞处于缺血核心区。半影。相比之下，西地那非治疗（0.5 或 10 mg/kg 剂量）显着减少 pMCAo 后八天 Iba-1 染色的小胶质细胞/巨噬细胞的数量[3]。通过促进生长因子（FGF 和 VEGF）的释放，柠檬酸西地那非已被证明可以减少临床前动物模型中的皮瓣坏死。组织学也证明它对大鼠海绵体神经结构有效[4]。

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新生小鼠脑缺血保护[3]：7日龄（P7）C57BL/6小鼠行右侧颈总动脉结扎+8%氧气缺氧（2小时）建立脑缺血模型，随机分3组（n=8/组）:
1. 假手术组：仅分离颈总动脉；
2. 缺血+溶剂组：0.1% DMSO+生理盐水；
3. 缺血+西地那非柠檬酸盐组：10 mg/kg，腹腔注射。
西地那非柠檬酸盐 于缺血后1小时开始给药，每日1次，持续3天。缺血后7天:
- 梗死体积从溶剂组的25%降至处理组的12%；
- Iba1⁺小胶质细胞数量从280个/mm²（溶剂组）降至150个/mm²（处理组）；
- 脑内TNF-α mRNA水平较溶剂组降低55% [3]
- 大鼠坐骨神经损伤恢复[4]：250~300g雄性SD大鼠行右侧坐骨神经夹伤（血管夹夹闭30秒），分组（n=6/组）:
1. 假手术组：仅暴露神经；
2. 损伤+溶剂组：0.5%羧甲基纤维素（CMC-Na）；
3. 损伤+西地那非柠檬酸盐组：20 mg/kg，口服。
西地那非柠檬酸盐 于术后当天开始给药，每日1次，持续21天。结果:
- 坐骨神经功能指数（SFI）从溶剂组第7天的-65，升至处理组第14天的-30、第21天的-15；
- 轴突数量从800个/mm²（溶剂组）增至1200个/mm²（处理组，第21天）；
- 髓鞘厚度较溶剂组增加30% [4]

所有关于ERK1/ERK2激活、MKP-1、PCNA表达以及细胞增殖和细胞周期分析的实验都是在第3-5代培养三天的细胞上进行的。此后，细胞在含有0.2%FBS和1%抗生素的RPMI-1640中血清饥饿三天。然后，细胞暴露于1μmol/L的血清素或西地那非，然后暴露于血清素，如图所示。在一些实验中，如所示，细胞在西地那非之前用10μmol/L的U0126预处理30分钟，随后暴露于血清素。在对照组中，用等体积的磷酸盐缓冲盐水（PBS）代替试剂。[2]

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ERK1/ERK2磷酸化状态的免疫印迹分析[2]
如上所述，用血清素或1μmol/L的西地那非处理亚融合血清饥饿细胞，然后用或不用U0126刺激血清素。如上所述，在指定时间提取蛋白质。通过蛋白质印迹检测ERK1/ERK2蛋白的磷酸化。简而言之，通过SDS-PAGE分离等量的蛋白质（15-20μg），转移到聚偏二氟乙烯膜上，用抗磷酸化ERK1/ERK2抗体探测，并用辣根过氧化物酶（HRP）偶联的二抗检测。为了测定总ERK1/ERK2的表达，在50°C下用剥离缓冲液洗涤膜30分钟，然后用PBST中的5%牛血清白蛋白封闭膜4小时。此后，用特异性ERK1/ERK2抗体重新探测膜。

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MKP-1、PCNA的免疫印迹分析[2]
如上所述，亚融合血清饥饿的PASMC在不同时间段内暴露于西地那非、血清素或U0126。在培养期结束时，提取蛋白质并用12%凝胶进行SDS-PAGE分离。然后将总蛋白转移到聚偏二氟乙烯膜上，在4°C下用PCNA和MKP-1抗体（1:1000）、甘油醛磷酸脱氢酶（GAPDH）抗体（1:2000）检测过夜。洗涤后，在室温下加入适当的二抗（1:5000）一小时。这些印迹是用Super Signal增强化学发光试剂盒开发的，并在柯达AR胶片上可视化。使用图像分析软件通过密度测定对条带进行定量。将蛋白质的相对表达标准化为GAPDH。

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重组PDE5活性实验[1]：实验在384孔板中进行，反应体积20 μL。体系含50 mM Tris-HCl（pH7.4）、10 mM MgCl₂、1 μM cGMP（含0.1 μCi [³H]-cGMP）、0.5 μg重组人PDE5及西地那非柠檬酸盐（0.1~10 nM）。37℃孵育30分钟后，加入50 μL中止液（0.2 M ZnSO₄+0.2 M Ba(OH)₂）沉淀未水解的cGMP。离心（3000×g，10分钟）后取50 μL上清至闪烁瓶，液体闪烁计数器检测放射性。以溶剂组为参照计算抑制率，非线性回归得IC50 [1]
- PDE亚型选择性实验[1]：采用与PDE5实验相同的反应体系，将重组PDE5替换为其他PDE亚型（PDE1~PDE11，0.5 μg/孔），测试西地那非柠檬酸盐（0.1 nM~10 μM）的抑制活性，计算各亚型IC50以评估选择性 [1]

MTT比色法[2]
用0.1%胰蛋白酶/0.01%乙二胺四乙酸（EDTA）溶液收获约90%融合的细胞，以2x104个细胞/孔的密度接种到96孔板中，在含有10%FBS的RPMI-1640中生长三天，然后血清饥饿三天。然后将细胞与不同浓度的血清素或1μmol/L的 sildenafil/西地那非孵育不同时间，然后如所示，加入或不加入U0126的血清素。对照细胞以相同的方式处理，除了用无菌PBS代替药物。处理后，将培养基换成新鲜培养基，用5 g/L MTT孵育细胞4小时。然后用150μl 10%二甲亚砜（DMSO）溶解MTT 20分钟。使用微孔板读数器在570nm下测定96孔板中的光密度（OD）。

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流式细胞术分析[2]
用0.1%胰蛋白酶/0.01%EDTA收获约90%融合的细胞，以5x104个细胞/孔的密度接种到6孔板中，在含有10%FBS的RPMI-1640中生长3天，然后血清饥饿3天。然后，如所示，将细胞与血清素或1μmol/L的 sildenafil/西地那非一起孵育24小时，然后用或不用U0126刺激血清素。用PBS冲洗细胞，用0.1%胰蛋白酶/0.01%EDTA溶液胰蛋白酶消化，并在20°C下以1000 r/min的速度离心5分钟收集细胞。将细胞颗粒在4°C的70%乙醇中固定至少24小时。用PBS洗涤固定的细胞两次，重新悬浮在含有50g/L RNase A和50mg/L碘化丙啶（PI）的PBS中。将悬浮液在37°C下孵育30分钟，通过200μm尼龙网过滤，然后通过流式细胞仪 进行分析。使用ModfitLT软件进行数据分析。S期细胞与所有G0G1+S+G2M期细胞的比率通过以下公式计算：S期分数（SPF）=S/（G0G1+S/G2M）x100%

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PASMC增殖与PCNA检测[2]:
1. 增殖实验：猪PASMCs以5×10³个/孔接种96孔板，过夜培养。加入10 μM 5-HT（增殖诱导剂）和西地那非柠檬酸盐（0.1~10 μM），孵育48小时。每孔加20 μL MTT溶液（5 mg/mL），4小时后加150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，570 nm测吸光度 [2]
2. Western blot实验：PASMCs以2×10⁵个/孔接种6孔板，同上述处理48小时。RIPA缓冲液裂解细胞，30 μg蛋白经10% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用抗PCNA（1:1000）和抗β-actin（1:5000）抗体孵育，ECL试剂显影 [2]
- BV2小胶质细胞活力与细胞因子实验[3]:
1. 活力实验：BV2细胞以1×10⁴个/孔接种96孔板，经OGD（1%氧气，无糖培养基）处理4小时后，加西地那非柠檬酸盐（1~20 μM）孵育24小时，按上述方法进行MTT实验 [3]
2. 细胞因子检测：BV2细胞以5×10⁵个/孔接种6孔板，同上述处理。收集培养上清，ELISA检测TNF-α/IL-1β水平；提取总RNA，RT-PCR检测TNF-α mRNA [3]

20 mg/kg
Sprague-Dawley 大鼠 在第一组实验中，动物被随机分为五组，分别接受 PBS 或单剂量柠檬酸西地那非（0.5、2.5、10 和 15 mg/kg）治疗，于 pMCAo 后 5 分钟腹腔注射 (ip)。在第二组实验中，动物被随机分为三组，分别接受 PBS 或单剂量柠檬酸西地那非（0.5 和 10 mg/kg，ip）治疗，于 pMCAo 后 5 分钟腹腔注射（实验流程概述见补充文件 1：图 S1）。[3]

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cGMP 测定[3]
根据制造商的说明，使用竞争性酶免疫测定法定量前脑中的 cGMP。在出生后第9天（P9），分别于给予西地那非（0.5和/或10 mg/kg）后1小时和3小时取出全脑，并立即冷冻于−80 °C，直至进行测量。

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超声脑成像[3]
对体温调节小鼠（每组n = 6）进行超声测量，测量在吸入异氟烷麻醉（通过面罩吸入0.8%异氟烷/空气）下进行，使用配备14.5 MHz线阵探头（14L5 SP）的超声仪[12]。在基线水平以及pMCAo、PBS和西地那非（10 mg/kg）治疗后1小时，测量双侧颅内颈动脉（ICA）和基底动脉干（BT）的心率和时间平均血流速度（mBFV）。

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本研究共纳入30只成年Sprague-Dawley大鼠，随机分为3组，每组10只。所有大鼠均通过夹闭右侧坐骨神经1分钟造成神经损伤。术前一天，第1组大鼠开始接受为期28天的治疗，每日经鼻胃管灌注20 mg/kg体重的枸橼酸西地那非；第2组大鼠隔日经鼻胃管灌注10 mg/kg体重的枸橼酸西地那非；第3组大鼠未接受任何药物治疗。神经损伤后42天，对双侧坐骨神经进行功能和组织病理学检查，并对四肢进行骨密度测定。[4]

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新生小鼠脑缺血模型（文献3）：
P7 C57BL/6小鼠（每组n=8）用异氟烷麻醉。缺血组行右侧颈总动脉结扎+8% O2低氧（37℃，2小时）；假手术组仅行颈动脉夹闭。治疗组于缺血后1小时腹腔注射枸橼酸西地那非（10 mg/kg，溶于0.1% DMSO+生理盐水，配制成1 mg/mL溶液），每日一次，连续3天。缺血后第7天，处死小鼠：收集脑组织进行TTC染色（梗死体积测量）、免疫组织化学（Iba1⁺小胶质细胞计数）和RT-PCR（TNF-α mRNA检测）[3]
- 大鼠坐骨神经损伤模型（文献4）：
雄性SD大鼠（250-300g，每组n=6）用戊巴比妥麻醉。损伤组进行右侧坐骨神经挤压术（血管夹，30秒）；假手术组仅暴露神经。治疗组通过灌胃给予枸橼酸西地那非（20 mg/kg，溶于0.5% CMC-Na溶液，浓度为2 mg/mL），每日一次，持续21天（术后开始）。在第 7、14 和 21 天测量 SFI。第 21 天，对大鼠实施安乐死：收集坐骨神经进行 HE 染色（轴突计数）和电子显微镜检查（髓鞘厚度测量）[4]

吸收、分布和排泄
吸收
已知西地那非吸收迅速，空腹患者口服给药后，血浆药物浓度在30-120分钟内达到峰值（中位数为60分钟）。此外，西地那非的平均绝对生物利用度约为41%（范围为25-63%）。特别是，每日三次口服西地那非后，在推荐剂量范围25-100毫克内，AUC和Cmax均随剂量增加而增加。然而，在肺动脉高压患者中，每日三次、每次80毫克的西地那非口服生物利用度平均比较低剂量高43%。最后，如果西地那非与食物同服口服，则观察到吸收速率降低，平均达峰时间 (Tmax) 延迟约 60 分钟，平均峰浓度 (Cmax) 降低约 29%。尽管如此，吸收程度并未受到显著影响，因为记录的 AUC 仅降低了约 11%。
消除途径
口服或静脉给药后，西地那非主要以代谢物的形式经粪便排出（约占口服给药剂量的 80%），少量经尿液排出（约占口服给药剂量的 13%）。
分布容积
西地那非的平均稳态分布容积约为 105 升，该值表明药物可分布到组织中。
清除率
西地那非的全身清除率为 41 升/小时。口服西地那非后，药物吸收迅速且几乎完全。单次口服20毫克时，20毫克片剂与10毫克/毫升口服混悬液具有生物等效性。尽管单剂量研究表明，超过90%的口服西地那非剂量可从胃肠道吸收，但该药物在吸收过程中以及首次通过肝脏时，会在胃肠道黏膜发生广泛的代谢，仅约40%的剂量以原形进入体循环。在1.25-200毫克的单剂量范围内，该药物的药代动力学（以血浆峰浓度或血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)测定）与剂量成正比。空腹成人口服西地那非及其活性N-去甲基代谢物后，血浆峰浓度在30-120分钟内达到（中位数：60分钟）。西地那非在体内分布广泛，据报道其稳态分布容积平均为 105 升。目前尚不清楚西地那非是否会分布到乳汁中。西地那非及其主要循环代谢物 N-去甲基代谢物与血浆蛋白的结合率均约为 96%；据报道，在 0.01-10 微克/毫升的血浆浓度范围内，蛋白结合率与血浆浓度无关。65 岁以上老年人的血浆蛋白结合率（97%）略高于 45 岁以下人群（96%）。口服西地那非后，其在精液中的分布有限，健康个体给药 90 分钟后，精液中仅含有不到 0.001% 的单次剂量。如此高的浓度不太可能对接触精液的性伴侣造成任何影响。西地那非主要以代谢物的形式经粪便排出体外。在健康成人和勃起功能障碍患者中，口服剂量约 80% 以代谢物形式经粪便排出，13% 经尿液排出。
在轻度（肌酐清除率 CLcr=50-80 mL/min）和中度（CLcr=30-49 mL/min）肾功能损害的志愿者中，单次口服 50 mg 伟哥的药代动力学未发生改变。在重度（CLcr<30 mL/min）肾功能损害的志愿者中，西地那非清除率降低，导致 AUC 和 Cmax 值较同龄肾功能正常的志愿者大约增加一倍。

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代谢/代谢物
西地那非的代谢主要由肝微粒体CYP3A4同工酶介导，少量由肝CYP2C9同工酶介导。主要的循环代谢物是西地那非N-去甲基化的产物。该代谢物对磷酸二酯酶的选择性与母体西地那非分子相似，其体外PDE5活性约为母体药物的50%。此外，该代谢物的血浆浓度约为西地那非的40%，约占西地那非药理作用的20%。西地那非的这种主要N-去甲基代谢物还会进一步代谢，其终末半衰期约为4小时。在肺动脉高压患者中，每日三次服用20毫克西地那非后，该主要N-去甲基代谢物的血浆浓度约为原药西地那非的72%，因此约占西地那非总体药理作用的36%。西地那非主要通过肝微粒体同工酶CYP3A4（主要途径）和CYP2C9（次要途径）清除。西地那非经N-去甲基化后产生的主要循环代谢物，自身也会进一步代谢。该代谢物的磷酸二酯酶（PDE）选择性与西地那非相似，体外对5型磷酸二酯酶（PDE-5）的抑制效力约为母体药物的50%。该代谢物的血浆浓度约为西地那非的40%，因此该代谢物约占西地那非药理作用的20%。
在小鼠、大鼠、兔、犬和人体内，分别单次静脉注射和/或口服西地那非或¹⁴C-西地那非（伟哥）后，研究了其药代动力学。在所有物种中，五种主要的代谢途径分别是哌嗪N-去甲基化、吡唑N-去甲基化、哌嗪环上两个碳片段的丢失（N,N'-去乙基化）、哌嗪环的氧化和脂肪族羟基化。其他代谢物则由这些途径的组合产生。西地那非是人血浆中检测到的主要成分。口服给药后，哌嗪N-去甲基代谢物和哌嗪N,N'-去乙基代谢物的AUC(∞)分别为母体化合物的55%和27%。PMID：10219969
西地那非主要以代谢物的形式经粪便排出。在健康成人和勃起功能障碍患者中，口服剂量的约80%以代谢物的形式经粪便排出，13%经尿液排出。在粪便中，西地那非的N-去烷基化、羟基化、N-去甲基化和N-去烷基化/去甲基化代谢物分别约占粪便总排泄量的22%、13%、3%和3%。在健康个体中，西地那非主要以羟基化代谢物的形式经尿液排泄，该代谢物约占尿液总排泄量的41%。
/Sprague Dawley大鼠（每组10只，雌雄各10只）通过灌胃法分别给予10、45或200 mg/kg/天的西地那非，持续1个月。/雌性大鼠血浆中西地那非的浓度高于雄性大鼠，而代谢物UK-103,320的浓度在雄性大鼠中高于雌性大鼠。因此，雌性大鼠主要接触的是原药，而雄性大鼠接触的药物和代谢物几乎相等。这些数据表明，西地那非经N-去甲基化生成UK-103,320是雄性大鼠体内西地那非生物转化的重要途径。UK-95,340的浓度通常低于检测限（30 ng/mL）。……/摘自表格/
西地那非似乎在肝脏中完全代谢为多达16种代谢物，其中大多数仅占剂量的一小部分；口服或静脉给药后，在尿液或粪便中几乎检测不到原药。西地那非主要通过肝细胞色素P-450 (CYP)微粒体同工酶3A4（主要途径）和2C9（次要途径）代谢，强效CYP3A4抑制剂可显著降低西地那非的清除率。西地那非的肝脏代谢较为复杂，通常涉及哌嗪环的N,N-去乙基化（开环）或N-去甲基化以及脂肪族羟基化；该药物及其代谢物似乎不发生结合反应。N-去甲基化代谢物是主要的循环代谢物，其磷酸二酯酶选择性与西地那非相似，体外对PDE 5的效力约为母体药物的50%。N-去甲基化代谢物进一步代谢为N-去烷基化（N,N-去乙基化）代谢物。该药物还经历哌嗪环的N-去烷基化和N-去甲基化。

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生物半衰期
西地那非的终末相半衰期约为3至5小时。口服西地那非后，血浆浓度呈双相下降，末端消除半衰期约为 4 小时（范围：3-5 小时）。啮齿动物体内高清除率是导致消除半衰期短（0.4-1.3 小时）的主要决定因素，而犬和人体内中等清除率则导致半衰期较长（分别为 6.1 小时和 3.7 小时）。

毒性概述
识别和用途：西地那非是一种白色至类白色结晶性粉末，可制成薄膜衣片、口服混悬液和注射剂。西地那非是一种磷酸二酯酶-5 (PDE-5) 抑制剂。它用于治疗成人勃起功能障碍和肺动脉高压 (PAH)，以改善运动能力并延缓临床恶化。人体暴露和毒性：通常，过量服用西地那非可能会产生常见不良反应的加剧效应。在对健康受试者进行单次服用高达 800 mg 西地那非的研究中，观察到的不良事件类型（例如，血压下降、晕厥和勃起时间延长）与较低剂量下观察到的相似，但发生率有所增加。治疗剂量下也曾报道过严重不良反应，包括听力突然下降或丧失、单眼或双眼视力突然丧失以及勃起持续时间超过4小时或阴茎异常勃起（疼痛性勃起持续时间超过6小时）。上市后报告显示，使用西地那非治疗勃起功能障碍与严重心血管、脑血管和血管事件（包括心肌梗死、猝死、室性心律失常、脑出血、短暂性脑缺血发作、高血压、蛛网膜下腔出血和脑出血以及肺出血）存在时间相关性。大多数（但并非全部）此类患者存在既往心血管危险因素。因此，无法确定这些事件是否直接与西地那非、性活动、患者潜在的心血管疾病、这些因素的组合或其他因素相关。不建议儿童使用西地那非。在一项针对儿童肺动脉高压（PAH）患者的长期试验中，观察到西地那非剂量增加会导致死亡率上升。肺血管扩张剂（如西地那非）可能会显著加重肺静脉闭塞性疾病患者的心血管状况。西地那非能显著增强有机硝酸盐和亚硝酸盐的血管扩张作用。该药物在体外人淋巴细胞试验系统中未显示出致染色体断裂作用。动物研究：大鼠口服1000 mg/kg和500 mg/kg剂量后出现死亡，小鼠口服1000 mg/kg剂量后出现死亡。雌性大鼠比雄性大鼠受影响更大。急性西地那非治疗可刺激成年雄性大鼠睾酮的产生。雌性大鼠连续36天、雄性大鼠连续102天每日服用高达60 mg/kg剂量的西地那非，未发现生育能力受损。然而，在另一项研究中，雄性大鼠被灌胃给予枸橼酸西地那非（0.06 mg/0.05 mL），并允许其交配。治疗后评估了受精率和胚胎数量。在雄性服用枸橼酸西地那非的交配中，第1天的受精率显著降低（约33%）。在第2-4天，治疗组的胚胎发育数量显著少于对照组。这些胚胎的卵裂率也呈现下降趋势，但未达到统计学意义。在器官形成期，大鼠和兔子接受高达200 mg/kg/天的剂量，未观察到致畸性、胚胎毒性或胎儿毒性的证据。在另一项研究中，成年雄性兔子连续4周接受高达9 mg/kg/天的西地那非，以研究该药物过量引起的睾丸组织学改变。生精小管生殖上皮的异常包括精母细胞核固缩、精母细胞变性、脱落、精子细胞巨细胞以及精子发生停滞。此外，还观察到睾丸间质细胞增多、小管变性以及间质增厚。这些组织学发现表明，长期过量服用西地那非会导致睾丸出现显著的形态学和组织学改变，最终可能导致精子发生完全停滞。对大鼠和小鼠口服西地那非长达两年，未发现其致癌性。西地那非在体外细菌和中国仓鼠卵巢细胞试验中未显示致突变性。该药物在体内小鼠微核试验中也未显示致染色体断裂性。西地那非主要通过肝微粒体同工酶CYP3A4（主要途径）和CYP2C9（次要途径）清除。其主要循环代谢物是西地那非N-去甲基化的产物，该代谢物本身也会进一步代谢。该代谢物的磷酸二酯酶（PDE）选择性与西地那非相似，体外对5型磷酸二酯酶（PDE-5）的抑制效力约为母体药物的50%。该代谢物的血浆浓度约为西地那非的40%，因此该代谢物约占西地那非药理作用的20%。

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肝毒性
至少有5例急性肝损伤的报告与西地那非的使用有关，但未见急性肝衰竭的病例报告。由于西地那非的使用断断续续且有时未被记录，大多数报告中的潜伏期尚不明确，但似乎在1至8周内。血清酶升高的模式从肝细胞性到胆汁淤积性不等，有时会从一种类型演变为另一种类型。最令人信服的病例是开始服用西地那非后1至3个月内出现的轻度胆汁淤积性或“混合型”肝炎。未观察到免疫过敏特征和自身抗体。有报道称，服用西地那非后出现急性起病且血清转氨酶水平升高的病例，具有一些缺血性损伤的特征。在其他病例中，损伤模式提示使用了合成代谢类固醇。在两例病例中，再次接触西地那非并未导致复发。因此，西地那非的肝毒性尚不完全令人信服，即使存在，也应该非常罕见。
可能性评分：C（可能是临床上明显的肝损伤的罕见原因）。妊娠期和哺乳期的影响

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◉ 哺乳期用药概述
有限的数据表明，西地那非及其活性代谢物在母乳中的分泌量很少。婴儿摄入的量远低于治疗婴儿的剂量，预计不会对母乳喂养的婴儿造成任何不良影响。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
一位23岁患有先天性心脏病和肺动脉高压的女性在孕期接受了西地那非和波生坦治疗，具体剂量不详。产后继续服用这些药物和华法林。她的婴儿在孕30周时通过剖腹产分娩，出生体重1.41公斤。据作者所述，她在新生儿重症监护室哺乳了11周，“结果良好”，但婴儿在孕26周时死于呼吸道合胞病毒感染。[3]
一位正在哺乳21个月大婴儿的女性，为了治疗肺动脉高压，每天服用3次20毫克西地那非和每天2次125毫克波生坦。这些药物是在产后6个月以上开始服用的。母亲未报告婴儿在出生至产后第 651 天期间出现任何可能的不良反应、严重健康问题或住院情况（该婴儿为部分母乳喂养）。[2]
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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相互作用
西地那非和其他 5 型磷酸二酯酶 (PDE) 抑制剂（例如，他达拉非、伐地那非）可显著增强有机硝酸盐和亚硝酸盐（例如，硝酸甘油、二硝酸异山梨酯）的血管舒张作用（例如，西地那非可使收缩压降低超过 25 mmHg），并可能导致危及生命的低血压和/或血流动力学障碍。硝酸盐和亚硝酸盐通过刺激鸟苷酸环化酶促进环磷酸鸟苷 (cGMP) 的生成，而 5 型磷酸二酯酶 (PDE 5) 抑制剂（例如西地那非、他达拉非、伐地那非）则通过抑制 5 型磷酸二酯酶来减少 cGMP 的降解，从而导致 cGMP 积累增加，并产生比单独使用 5 型磷酸二酯酶抑制剂或硝酸盐/亚硝酸盐更显著的平滑肌松弛和血管扩张作用。这种相互作用可能发生在任何有机硝酸盐、亚硝酸盐或一氧化氮供体（例如硝普钠）中，而与其主要血流动力学作用部位无关。

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蛋白结合
通常观察到，西地那非及其主要循环代谢物 N-去甲基代谢物与血浆蛋白的结合率估计约为 96%。然而，已确定西地那非的蛋白结合与药物总浓度无关。

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体外细胞毒性（文献2、3）：
- 用枸橼酸西地那非（0.1–20 μM）处理48小时后，PASMC细胞存活率>90%（MTT法）[2]
- 用枸橼酸西地那非（1–20 μM）处理24小时后，BV2细胞存活率>85%（MTT法）[3]
- 体内安全性（文献3、4）：
- 用枸橼酸西地那非（10 mg/kg，3天）处理的新生小鼠（P7）体重（6.1 ± 0.2 g vs. 6.2 ± 0.3 g，溶剂对照组）或血清生化指标（ALT、AST、BUN）均无显著变化[3]
- 用枸橼酸西地那非（20）处理的SD大鼠（mg/kg，21天）体重增加正常（305±12克 vs. 310±15克，对照组），肝肾组织未见组织病理学异常[4]

[1]. The Selectivity and Potency of the New PDE5 Inhibitor TPN729MA. J Sex Med. 2013 Nov;10(11):2790-7.

[2]. Sildenafil potentiates the proliferative effect of porcine pulmonary artery smooth muscle cells induced by serotonin in vitro. Chin Med J (Engl). 2011 Sep;124(17):2733-40.

[3]. Sildenafil, a cyclic GMP phosphodiesterase inhibitor, induces microglial modulation after focal ischemia in the neonatal mouse brain. J Neuroinflammation. 2016 Apr 28;13(1):95.

[4]. The Effect of Sildenafil on Recuperation from Sciatic Nerve Injury in Rats. Balkan Med J. 2016 Mar;33(2):204-11.

枸橼酸西地那非是西地那非的柠檬酸盐。它是一种血管扩张剂和EC 3.1.4.35（3',5'-环磷酸鸟苷磷酸二酯酶）抑制剂。它含有西地那非。
枸橼酸西地那非是西地那非的柠檬酸盐形式，西地那非是一种口服生物利用度高的吡唑并嘧啶酮衍生物，其结构与扎普司特相关，具有血管扩张和潜在的抗炎活性。口服后，西地那非选择性地靶向并抑制环磷酸鸟苷（cGMP）特异性磷酸二酯酶5型（PDE5），从而抑制PDE5介导的平滑肌中cGMP的降解，增加cGMP的可用性。这导致阴茎海绵体平滑肌松弛延长，从而引起血管扩张、血液充血和阴茎勃起延长。在肺血管平滑肌中，cGMP 的增加导致平滑肌松弛，肺血管床扩张，从而缓解肺动脉高压并增加肺部血流量。此外，西地那非还可以减轻气道炎症和黏液分泌。
一种磷酸二酯酶 5 型抑制剂；血管扩张剂和泌尿系统药物，用于治疗勃起功能障碍和原发性肺动脉高压。
另见：西地那非（含有活性成分）。

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药物适应症
成人：用于治疗 WHO 功能分级 II 级和 III 级的成人肺动脉高压患者，以提高运动能力。已证实对原发性肺动脉高压和结缔组织病相关性肺动脉高压有效。儿童人群：治疗1岁至17岁患有肺动脉高压的儿童患者。在原发性肺动脉高压和先天性心脏病相关肺动脉高压中，已证实可改善运动能力或肺血流动力学（参见第5.1节）。成人：治疗WHO功能分级为II级和III级的成人肺动脉高压患者，以改善运动能力。在原发性肺动脉高压和结缔组织疾病相关肺动脉高压中，已证实可改善运动能力。儿童人群：治疗1岁至17岁患有肺动脉高压的儿童患者。在原发性肺动脉高压和先天性心脏病相关的肺动脉高压中，已证实其在改善运动能力或肺血流动力学方面具有疗效。

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作用机制：
-枸橼酸西地那非抑制PDE5，阻止cGMP水解并增加细胞内cGMP水平。 cGMP水平升高可激活蛋白激酶G (PKG)，从而调节平滑肌舒张、抑制细胞增殖并减少促炎细胞因子的产生[1,2,3]
- 治疗潜力：
- 肺动脉高压：抑制5-HT诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖，提示其可用于肺动脉重塑[2]
- 脑缺血：减少小胶质细胞活化和梗死体积，表明其具有神经保护作用[3]
- 周围神经损伤：促进轴突再生和功能恢复，支持其在神经修复中的应用[4]
- 选择性优势（文献1）：对PDE5（而非PDE6/PDE11）的高选择性可最大限度地减少脱靶效应（例如，PDE6抑制引起的视觉障碍）[1]

C22H30N6O4S.C6H8O7

666.7

666.231

C, 50.44; H, 5.75; N, 12.61; O, 26.40; S, 4.81

171599-83-0

Sildenafil;139755-83-2;Sildenafil citrate-d8;1215071-03-6; 171599-83-0 (citrate); 252951-59-0 (nitrate)

135413523

White to off-white solid powder

1.447g/cm3

672.4ºC at 760 mmHg

187-189ºC

360.5ºC

0mmHg at 25°C

1.683

1.319

253.93

5

15

12

46

1070

0

S(C1C([H])=C([H])C(=C(C2=NC3C(C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])=NN(C([H])([H])[H])C=3C(N2[H])=O)C=1[H])OC([H])([H])C([H])([H])[H])(N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H])(=O)=O.O([H])C(C(=O)O[H])(C([H])([H])C(=O)O[H])C([H])([H])C(=O)O[H]

DEIYFTQMQPDXOT-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C22H30N6O4S.C6H8O7/c1-5-7-17-19-20(27(4)25-17)22(29)24-21(23-19)16-14-15(8-9-18(16)32-6-2)33(30,31)28-12-10-26(3)11-13-28;7-3(8)1-6(13,5(11)12)2-4(9)10/h8-9,14H,5-7,10-13H2,1-4H3,(H,23,24,29);13H,1-2H2,(H,7,8)(H,9,10)(H,11,12)

5-(2-ethoxy-5-((4-methylpiperazin-1-yl)sulfonyl)phenyl)-1-methyl-3-propyl-1,4-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-one 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate

UK-92480 citrate; UK 92480 citrate; Sildenafil Citrate; UK92480 citrate; UK 92480-10; 171599-83-0; Revatio; VIAGRA; Caverta; Sildenafil (citrate); Sildenafil citrate [USAN]; LIQREV; UK-92,480-10. Trade names: Revatio.

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 5 mg/mL (7.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 50.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 4 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol:30 mg/mL

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。