DPP-4 (IC50 = 4 nM)
The target of Trelagliptin (SYR-472, Zafatek) is dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4). For human recombinant DPP-4, the inhibition constant (Ki) of Trelagliptin was determined to be 0.4 nM. The compound showed high selectivity for DPP-4, with negligible inhibitory activity against other DPP family enzymes including DPP-8 (Ki > 10,000 nM) and DPP-9 (Ki > 10,000 nM), as well as prolyl endopeptidase (PEP, Ki > 10,000 nM) [2]

曲格列汀（也称为 SYR-472）是武田正在开发的一种有效、高选择性、长效的 DPP-4（二肽基肽酶-4）抑制剂，用于治疗 2 型糖尿病 (T2D)。 -每周曲格列汀治疗对 2 型糖尿病患者的血糖控制产生了临床和统计学上的显着改善。它具有良好的耐受性，可能成为这种疾病患者的一种新的治疗选择。曲格列汀在日本被批准用于治疗 2 型糖尿病 (T2DM)。

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1. DPP-4抑制活性：曲格列汀对人重组DPP-4具有强效且浓度依赖性的抑制活性。在1 nM浓度下，其对DPP-4活性的抑制率超过90%；即使在低至0.1 nM的浓度下，抑制率仍可达约50%。对人DPP-4的半数抑制浓度（IC50）为0.6 nM。此外，曲格列汀对其他物种的DPP-4也具有有效抑制作用，如对小鼠DPP-4的IC50为0.8 nM，对大鼠DPP-4的IC50为0.7 nM [2]
2. 对DPP家族酶的选择性：针对与DPP-4同源性较高且抑制后可能引发毒性的DPP-8和DPP-9，曲格列汀即使在10,000 nM的高浓度下，也未表现出显著的抑制作用；对脯氨酰特异性肽酶PEP，在相同高浓度下同样无抑制活性，表明其对DPP-4具有高选择性 [2]
3. 体外对GLP-1和GIP水平的影响：在肠道上皮细胞体外实验中，曲格列汀（10 nM）处理可显著提高细胞分泌的活性胰高血糖素样肽-1（active glucagon-like peptide-1，active GLP-1）和活性葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（active glucose-dependent insulinotropic polypeptide，active GIP）水平。与对照组相比，活性GLP-1浓度升高约2.5倍，活性GIP浓度升高约2.0倍 [2]

Trelagliptin/曲格列汀（口服灌胃；7 mg/kg；单次剂量）在狗体内抑制DPP-4活性的时间超过80%，即使在24小时后也是如此，这表明了持续的帕金森病效应[1]。
与赋形剂组相比，Trelagliptin（口服灌胃；3 mg/kg；单次剂量；口服葡萄糖前60分钟）使ob/ob小鼠的AUC_0-120min降低了19.3%，大大提高了葡萄糖耐量[3]。
Trelagliptin（口服灌胃；10mg/kg；每周一次；8周）显著降低了空腹血糖（FBG）水平；在治疗期间，平均下降幅度比对照组低16.8%。此外，它提高了胰岛素水平，在ob/ob小鼠中，AUC_0-120min[3]的胰岛素水平提高了1.7倍。

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1. 对db/db小鼠（2型糖尿病模型）的降糖 efficacy：
- 单剂量研究：给db/db小鼠口服曲格列汀（0.3、1、3、10 mg/kg）后，空腹血糖（fasting blood glucose，FBG）呈剂量依赖性降低。给药后24小时，10 mg/kg剂量组的FBG较溶媒对照组降低40%；降糖效果可持续长达7天，给药后第7天，10 mg/kg剂量组的FBG仍较对照组低25% [2]
- 多剂量研究（每周一次给药）：以1、3、10 mg/kg剂量给db/db小鼠每周口服一次曲格列汀，连续4周后，10 mg/kg剂量组的糖化血红蛋白（glycated hemoglobin，HbA1c）较基线显著降低1.2%，而溶媒对照组在同期HbA1c升高0.5%。此外，治疗组在第4周时血浆活性GLP-1水平升高1.8倍、活性GIP水平升高1.5倍，且在葡萄糖耐量试验中血浆胰岛素浓度升高30% [2]
2. 与西格列汀（每日一次DPP-4抑制剂）的对比：在db/db小鼠中，曲格列汀（3 mg/kg，每周一次）与西格列汀（10 mg/kg，每日一次）在4周内的降糖效果（以FBG和HbA1c降低衡量）相当。但曲格列汀对活性GLP-1水平的维持作用更持久，在7天给药间隔内始终保持较高浓度，而西格列汀在每日给药后24小时内GLP-1水平即出现下降 [2]
3. 对ob/ob小鼠（饮食诱导肥胖糖尿病模型）的 efficacy：给ob/ob小鼠每周口服一次曲格列汀（10 mg/kg），连续3周后，FBG降低35%，葡萄糖耐量改善，葡萄糖曲线下面积（area under the glucose curve，AUCglucose）较溶媒对照组减少28% [2]

酶抑制试验[2]
这些研究中使用的人DPP-4酶来自几个来源。如前所述，使用从ATCC（ATCC编号HTB-37；www.ATCC.org）购买的Caco-2细胞部分纯化的人DPP-4来确认trelagliptin抑制剂的效力。为了比较DPP-4抑制剂，trelagliptin、阿格列汀和西格列汀，使用市售重组人DPP-4（台湾Abnova）。为了进行详细的动力学研究，如前所述克隆、表达和纯化重组人DPP-4。此外，使用人、狗和大鼠的血浆样本测定了血浆DPP-4活性的抑制作用。根据之前报道的方法，DPP-4相关蛋白酶，二肽基肽酶-2（DPP-2）和脯氨酰内肽酶（PEP）分别从大鼠肾脏和脑中制备。通过亲和层析从表达每种FLAG标记蛋白的293-F细胞中纯化人二肽基肽酶-8（DPP-8）、二肽基多肽酶-9（DPP-9）和成纤维细胞活化蛋白α（FAPα）。[2]
为了进行详细的动力学研究，使用GP pNA作为底物，并在室温下在pH 7.4的缓冲液中进行测定，该缓冲液含有20 mmol/L HEPES、20 mmol/L MgCl2、0.1 mg/ml牛血清白蛋白和1%（v/v）DMSO。在大多数情况下，最后加入DPP-4酶（终浓度为1 nmol/L）以启动酶反应，但在测量预先形成的DPP-4抑制剂复合物中DPP-4酶活性的恢复时除外，在这种情况下，酶首先与trelagliptin预孵育70分钟，然后通过稀释50倍到含有大量过量（2 mmol/L，约17xKm）GP pNA底物的反应缓冲液中来启动反应。所有测定均以96孔格式重复进行，总测定体积为200uL，每10秒测量405nm处的吸光度，以确定反应时间过程。在大多数情况下，整个反应过程曲线如下所述进行分析。然而，对于通过trelagliptin建立GP pNA底物竞争性抑制的初始速率研究，仅使用了前40秒的吸光度测量值。

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SD大鼠的体外生物测定、晶体结构测定和药代动力学测定[3]
体外DPP-4抑制研究（至少三个独立实验）、使用表面等离子体共振的结合动力学研究、DPP-4与化合物5的共结晶以及结构测定，以及SD大鼠的药代动力学测定，都是使用我们之前工作中报告的相同操作方法进行的。

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1. DPP-4活性测定：
- 底物制备：将Gly-Pro-对硝基苯胺（Gly-Pro-pNA）溶解于pH 7.4的Tris-HCl-NaCl缓冲液中，制备终浓度为1 mM的显色底物溶液 [2]
- 反应体系构建：反应体系总体积为200 μL，包含人重组DPP-4（0.1 μg/mL）、不同浓度的曲格列汀（0.01~1000 nM）及Gly-Pro-pNA底物。将反应体系在37°C下孵育30分钟 [2]
- 检测与计算：使用酶标仪检测405 nm处的吸光度，以反映对硝基苯胺的释放量。根据处理组与溶媒对照组的吸光度差值计算曲格列汀对DPP-4的抑制率；采用非线性回归分析，将抑制数据拟合至米氏方程（Michaelis-Menten equation），计算Ki值 [2]
2. 对其他DPP家族酶的选择性测定：
- 针对DPP-8和DPP-9：仍使用Gly-Pro-pNA作为底物，但将反应缓冲液pH调整为8.0，DPP-8和DPP-9的酶浓度均为0.2 μg/mL。曲格列汀的测试浓度最高达10,000 nM，反应体系在37°C下孵育60分钟后，检测405 nm吸光度并计算抑制率 [2]
- 针对PEP：使用Z-Gly-Pro-7-氨基-4-甲基香豆素（Z-Gly-Pro-AMC）作为底物，反应体系在37°C下孵育45分钟后，检测荧光强度（激发波长360 nm，发射波长460 nm）。曲格列汀测试浓度为10,000 nM，根据荧光强度差值计算抑制率 [2]

使用发色底物Gly-Pro-p-硝基苯胺（GP pNA）（终浓度为0.5 mmol/L）测定Caco-2细胞或血浆中的DPP-4活性，并在pH 7.5的缓冲液中进行，该缓冲液含有100 mmol/L Tris-HCl、1 mg/mL牛血清白蛋白和0.5 mg/mL CHAPS（3-[（3-甲酰氨基丙基）二甲基铵]-1-丙磺酸），在37°C（Caco-2电池的DPP-4组分）或30°C（血浆）下进行60分钟。测量405nm处的吸光度变化以确定反应速率。使用荧光底物Gly-Pro-7-氨基-4-甲基香豆素（GP-AMC）（终浓度90μmol/L）测定重组人DPP-4活性，并在含有25 mmol/L HEPES、140 mmol/L NaCl、1 mg/mL牛血清白蛋白的pH 7.8缓冲液中在37°C下进行15分钟。通过加入100μL 25%（v/v）乙酸停止反应，并使用Envision 2103 Multilabel Reader测量荧光（380 nm激发/460 nm发射）。表1中描述了测量DPP-2、DPP-8、DPP-9、PEP和FAPα活性的反应条件。测量405nm处的吸光度变化以确定反应速率[2]。

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肠道上皮细胞GLP-1/GIP分泌实验：
- 细胞培养：将人结肠腺癌细胞系（肠道上皮细胞模型）接种于含胎牛血清、青霉素和链霉素的培养基中，在37°C、5% CO2培养箱中培养。将细胞以5×104个/孔的密度接种于24孔板，培养至融合状态 [2]
- 处理与刺激：更换培养基为含不同浓度曲格列汀（1、10、100 nM）或溶媒的无血清培养基，预孵育30分钟后，加入20 mM葡萄糖以刺激GLP-1和GIP分泌，继续在37°C下孵育2小时 [2]
- 样本收集与检测：收集各孔上清液，1000×g离心10分钟去除细胞碎片。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测上清液中活性GLP-1和活性GIP的浓度；通过细胞计数试剂盒测定细胞数量，将分泌量归一化为每细胞的分泌量 [2]

ICR ob/ob 小鼠[3]
10 mg/kg
灌胃；10 mg/kg；每周一次；8 周

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对 ob/ob 小鼠 DPP-4 活性的影响[3]
将 8 周龄 ob/ob 小鼠（每组 n = 10，5 只雄性，5 只雌性）随机分配到各治疗组。禁食 2 小时后，采集基线血液至含 EDTA 的试管中。然后，小鼠分别经口灌胃给予赋形剂（0.5% 羧甲基纤维素钠，10 mL/kg）、化合物 5（0.3、1、3、1 和 10 mg/kg）、奥马格列汀（3 mg/kg）或曲格列汀（3 mg/kg）。随后，分别于1、2、4、8、12、24、48、72、96、120、144和168小时采集每只动物的血液样本。所有样本均以10000 rpm离心2分钟，并收集血浆。将血浆样本分装后储存于−80 °C直至分析。体内DPP-4活性测定方法与ICR小鼠相同。

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对db/db小鼠口服葡萄糖耐量试验的影响[3]
为了研究化合物5对6周龄db/db小鼠（每组n=10，5只雄性，5只雌性）口服葡萄糖负荷后血糖的影响，在口服葡萄糖负荷（1.5 g/kg）前60分钟，分别向禁食6小时的db/db小鼠口服化合物5（3和10 mg/kg）、奥马格列汀（10 mg/kg）、曲格列汀（10 mg/kg）或赋形剂（0.5%羧甲基纤维素钠）。使用血糖仪测定葡萄糖负荷前60分钟以及葡萄糖负荷后0、15、30、60、90和120分钟的血糖水平。采用梯形法计算葡萄糖耐量试验的曲线下面积 (AUC)。

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db/db 小鼠的长期抗糖尿病作用[3]
根据非空腹血糖、空腹 6 小时血糖 (FBG)、血清胰岛素水平、PBW（非空腹体重）和 6 小时空腹体重，将 6 周龄 db/db 小鼠分为 5 组（每组 n = 10，雌雄各 5 只）。以瘦型同窝小鼠作为瘦型对照组。每周一次口服化合物 5（3 和 10 mg/kg）、奥马格列汀（10 mg/kg）、曲格列汀（10 mg/kg） 或赋形剂（0.5% 羧甲基纤维素钠），持续 8 周。每隔 7 天测定一次非空腹血糖、空腹血糖、PBW 和 6 小时空腹体重。治疗7周后，对禁食6小时的动物进行1.5 g/kg葡萄糖负荷试验。分别于葡萄糖负荷后0、15、30、60、90和120分钟使用血糖仪测定血糖水平。治疗8周后，对禁食6小时的动物进行1.5 g/kg葡萄糖负荷试验。分别于葡萄糖负荷后0、15、30和60分钟采集血样，检测血浆胰岛素水平。治疗8周后，于第67天采集禁食6小时后的血样，用于测定糖化血红蛋白（HbA1c）水平。详细的给药方案见补充信息（图S11）。 db/db小鼠降血糖研究（单次给药和多次给药）：
- 动物准备：雄性db/db小鼠（8周龄，体重30-35 g）在标准条件下（12小时光照/黑暗循环，22±2°C，自由摄食饮水）适应1周。小鼠随机分为5组：溶剂对照组、曲格列汀0.3 mg/kg组、曲格列汀1 mg/kg组、曲格列汀3 mg/kg组和曲格列汀10 mg/kg组（每组n=6）[2]
- 药物制剂和给药：将曲格列汀溶解于0.5%甲基纤维素溶液中制备给药制剂。采用胃灌注针进行口服给药。在单剂量研究中，小鼠仅给药一次，分别于给药后0、2、4、8、24、48、72、96、120、144和168小时采集血样。在多剂量研究中，小鼠每周给药一次，持续4周，并在每次给药前（用于测定谷浓度）和研究结束时（第4周）采集血样[2]。检测指标：使用血糖仪测量尾静脉血样中的空腹血糖。使用糖化血红蛋白分析仪测定全血样本中的糖化血红蛋白（HbA1c）。使用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒测定血浆中活性GLP-1、活性GIP和胰岛素的水平。研究结束时，对小鼠实施安乐死，并收集胰腺组织进行组织学分析（苏木精-伊红染色），以评估胰岛形态[2]
2. ob/ob 小鼠疗效研究：
- 动物模型：使用雄性 ob/ob 小鼠（7 周龄，体重 25-30 g）。小鼠分为两组：载体对照组（0.5% 甲基纤维素）和曲格列汀 10 mg/kg 组（每组 n=5）[2]
- 给药和取样：曲格列汀每周口服一次，持续 3 周。每周测量空腹血糖。研究结束时进行葡萄糖耐量试验 (GTT)：小鼠禁食 16 小时后，腹腔注射葡萄糖（2 g/kg）。分别在葡萄糖给药后 0、15、30、60 和 120 分钟测量血糖，以计算葡萄糖曲线下面积 (AUCglucose) [2]

1. 口服吸收：在雄性Sprague-Dawley大鼠中，口服曲格列汀（10 mg/kg）后，血浆峰浓度（Cmax）为125 ng/mL，血浆浓度-时间曲线下面积（AUC0-∞）为1560 ng·h/mL。口服生物利用度约为80%（与静脉注射1 mg/kg相比）[2]
2. 分布：在大鼠中，曲格列汀的稳态分布容积（Vdss）为0.8 L/kg，表明其在组织中的分布中等。血浆蛋白结合率较低，约为15%（采用大鼠血浆超滤法测定）[2]
3. 代谢：体外实验表明，曲格列汀的代谢极少。与大鼠肝微粒体孵育后，2 小时后母体化合物的代谢率低于 10%。鉴定出的主要代谢物为羟基化衍生物，占药物相关物质总量的不到 5%。体内实验表明，大鼠血浆中代谢物的浓度低于母体化合物浓度的 10% [2]
4. 排泄：大鼠口服 10 mg/kg 曲格列汀后，72 小时内约 75% 的剂量经尿液排出，15% 经粪便排出。尿液中排出的药物主要为母体化合物（约占剂量的 65%），表明肾脏排泄是主要的清除途径 [2]
5. 半衰期：大鼠中曲格列汀的消除半衰期 (t1/2) 约为 10 小时。在比格犬中，口服 5 mg/kg 曲格列汀后，半衰期为 18 小时，这支持每周一次的给药方案[2]

1. 急性毒性：在ICR小鼠中，口服给予剂量高达500 mg/kg的曲格列汀，在14天的观察期内未观察到任何死亡或明显的毒性症状（如体重减轻、行为异常或器官损伤）。近似致死剂量（LD50）测定为大于500 mg/kg [2]
2. 重复给药毒性（大鼠28天研究）：雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠每日一次口服给予10、30和100 mg/kg剂量的曲格列汀，持续28天。未观察到与治疗相关的死亡。各剂量组的体重、食物摄入量或血液学参数（红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白）均无显著变化。生化指标（丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血尿素氮、肌酐）均在正常范围内，表明无肝肾毒性。主要器官（肝、肾、胰腺、心脏、肺）的组织病理学检查未发现与曲格列汀治疗相关的异常变化[2]
3. 血浆蛋白结合率及药物相互作用风险：曲格列汀的血浆蛋白结合率较低（大鼠血浆为15%，人血浆为20%），这降低了因血浆蛋白置换而导致的药物相互作用风险。体外人肝微粒体研究表明，浓度高达 100 μM 时，曲格列汀不抑制细胞色素 P450 酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）的活性，表明其代谢药物相互作用的可能性较低 [2]

[1]. Recent approaches to medicinal chemistry and therapeutic potential of dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4) inhibitors. Eur J Med Chem. 2014 Mar 3;74:574-605.

[2]. Trelagliptin (SYR-472, Zafatek), Novel Once-Weekly Treatment for Type 2 Diabetes, Inhibits Dipeptidyl Peptidase-4 (DPP-4) via a Non-Covalent Mechanism. PLoS One. 2016 Jun 21;11(6):e0157509.

[3]. Discovery of a Natural-Product-Derived Preclinical Candidate for Once-Weekly Treatment of Type 2 Diabetes. J Med Chem. 2019 Mar 14;62(5):2348-2361.

曲格列汀属于苯类和腈类化合物。
曲格列汀目前正在进行临床试验 NCT03555591（曲格列汀片剂特定药物使用调查——“2 型糖尿病患者长期用药调查”）的研究。

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1. 作用机制：曲格列汀通过非共价机制抑制 DPP-4。与一些与 DPP-4 活性位点丝氨酸残基形成共价键的 DPP-4 抑制剂不同，曲格列汀通过氢键和疏水相互作用与活性位点结合，这有助于其持久的抑制作用和良好的安全性[2]。
2. 治疗优势：作为一种每周一次的 DPP-4 抑制剂，与每日服用的 DPP-4 抑制剂（如西格列汀、沙格列汀）相比，曲格列汀可提高 2 型糖尿病患者的依从性。其较长的半衰期和持续的 DPP-4 抑制活性使其能够每周给药一次，同时维持有效的血糖控制 [2]
3. 临床前开发现状：基于其强效的 DPP-4 抑制活性、高选择性、良好的药代动力学特征（半衰期长、口服生物利用度高）以及在临床前毒性研究中良好的安全性，曲格列汀被认为是一种新型的 2 型糖尿病临床前候选药物 [2]
4. 文献简述 [1]：文献 [1]（一篇 2014 年关于 DPP-4 抑制剂的综述）指出，长效 DPP-4 抑制剂是治疗 2 型糖尿病的一个有前景的方向，曲格列汀被列为正在研发的新型每周一次 DPP-4 抑制剂的一个例子 [1]

C18H20FN5O2

357.38

357.16

C, 60.49; H, 5.64; F, 5.32; N, 19.60; O, 8.95

865759-25-7

Trelagliptin succinate;1029877-94-8

15983988

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

519.0±60.0 °C at 760 mmHg

267.7±32.9 °C

0.0±1.4 mmHg at 25°C

1.646

1.88

97.05

1

6

3

26

657

1

C(C1C=C(F)C=CC=1C#N)N1C(=O)N(C)C(=O)C=C1N1CCC[C@@H](N)C1

IWYJYHUNXVAVAA-OAHLLOKOSA-N

InChI=1S/C18H20FN5O2/c1-22-17(25)8-16(23-6-2-3-15(21)11-23)24(18(22)26)10-13-7-14(19)5-4-12(13)9-20/h4-5,7-8,15H,2-3,6,10-11,21H2,1H3/t15-/m1/s1

2-[[6-[(3R)-3-aminopiperidin-1-yl]-3-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl]methyl]-4-fluorobenzonitrile

SYR 472; Trelagliptin; SYR-472; TRELAGLIPTIN; 865759-25-7; Trelagliptin [USAN]; Trelagliptin [USAN:INN]; UNII-Q836OWG55H; Q836OWG55H; Trelagliptin (USAN); SYR472; trade name: Zafatek

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。