Active metabolite of Dasatinib; Src/Bcr-Abl

达沙替尼（Sprycel）是一种强效的抗肿瘤药物，用于治疗慢性粒细胞白血病（CML）患者。为了在临床试验期间能够可靠地定量人血浆中的达沙替尼及其药理活性代谢物，开发并验证了一种灵敏可靠的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法。在Oasis HLB 96孔板上使用固相萃取制备样品。在Luna苯基己基分析柱上实现了等度色谱分离。通过正离子电喷雾串联质谱法检测分析物和稳定标记的内标物。达沙替尼及其两种活性代谢产物在1.00-1000 ng/mL的浓度范围内进行了验证。在分析验证期间，所有分析物的重复QC对照样品的批内和批间精密度值均在5.3%以内。所有分析物的平均质控控制准确度值在标称值的±9.0%范围内。分析回收率很高（>79%），内标归一化基质效应很小。这三种分析物在室温下在人血浆中稳定至少22小时，在-20°C下稳定至少123天，并经历至少六次冻融循环。在一项人体药代动力学研究中，验证的方法成功应用于达沙替尼和两种活性代谢物的定量[2]。

口服治疗后，达沙替尼 N-氧化物是一种具有药理活性的代谢物[1]。

SPRYCEL（达沙替尼，BMS-354825；百时美施贵宝公司，新泽西州普林斯顿）是一种多激酶抑制剂，目前已被批准用于治疗对甲磺酸伊马替尼（格列卫；诺华公司，瑞士巴塞尔）耐药或不耐受的患者的慢性粒细胞白血病和费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病肿瘤。健康志愿者口服100mg单剂量[（14）C]达沙替尼后，放射性迅速被吸收（T（max）约0.5小时）。达沙替尼和总放射性（TRA）血浆浓度均迅速降低，消除半衰期值<4小时。达沙替尼是人体血浆中与药物有关的主要成分。2小时时，达沙替尼占血浆中TRA的25%，表明代谢物对总药物相关成分有显著贡献。检测到许多循环代谢物，包括羟基化代谢物（M20和M24）、N-脱烷基代谢物（M4）、N-氧化物（M5）、酸性代谢物（M6）、葡萄糖醛酸结合物（M8a，b）以及这些初级代谢物进一步代谢的产物。大部分施用的放射性物质在粪便中被消除（85%）。尿液回收率占剂量的4%以下。达沙替尼在尿液和粪便中分别占剂量的<1%和19%，这表明达沙替尼经口给药后吸收良好，在排出体外之前被广泛代谢。患者体内药理学活性代谢产物M4、M5、M6、M20和M24的暴露，以及他们基于细胞的Src和Bcr-Abl激酶抑制IC（50），表明这些代谢产物预计不会对体内活性产生显著影响。[1]

SPRYCEL (dasatinib, BMS-354825; Bristol-Myers Squibb, Princeton, NJ), a multiple kinase inhibitor, is currently approved to treat chronic myelogenous leukemia and Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia tumors in patients who are resistant or intolerant to imatinib mesylate (Gleevec; Novartis, Basel, Switzerland). After a 100-mg single p.o. dose of [(14)C]dasatinib to healthy volunteers, the radioactivity was rapidly absorbed (T(max) approximately 0.5 h). Both dasatinib and total radioactivity (TRA) plasma concentrations decreased rapidly with elimination half-life values of <4 h. Dasatinib was the major drug-related component in human plasma. At 2 h, dasatinib accounted for 25% of the TRA in plasma, suggesting that metabolites contributed significantly to the total drug-related component. There were many circulating metabolites detected that included hydroxylated metabolites (M20 and M24), an N-dealkylated metabolite (M4), an N-oxide (M5), an acid metabolite (M6), glucuronide conjugates (M8a,b), and products of further metabolism of these primary metabolites. Most of the administered radioactivity was eliminated in the feces (85%). Urine recovery accounted for <4% of the dose. Dasatinib accounted for <1 and 19% of the dose in urine and feces, respectively, suggesting that dasatinib was well absorbed after p.o. administration and extensively metabolized before being eliminated from the body. The exposures of pharmacologically active metabolites M4, M5, M6, M20, and M24 in patients, along with their cell-based IC(50) for Src and Bcr-Abl kinase inhibition, suggested that these metabolites were not expected to contribute significantly toward in vivo activity.[1]

[1]. Metabolism and disposition of dasatinib after oral administration to humans. Drug Metab Dispos. 2008 Jul;36(7):1357-64.

[2]. A validated LC-MS/MS assay for the simultaneous determination of the anti-leukemic agent dasatinib and two pharmacologically active metabolites in human plasma: application to a clinical pharmacokinetic study. J Pharm Biomed Anal. 2012.

Dasatinib n-oxide is an aromatic amide.

C22H26N7O3SCL

504.01

503.151

C, 52.43 H, 5.20 Cl, 7.03 N, 19.45 O, 9.52 S, 6.36

910297-52-8

Dasatinib N-oxide-d8;1189988-36-0; Dasatinib hydrochloride;854001-07-3;Dasatinib monohydrate;863127-77-9;Dasatinib-d8;1132093-70-9; 302962-49-8 (free); 2112837-79-1 (cabaldehyde); 910297-52-8 (N-oxide)

11854535

White to off-white solid powder

3.806

164.43

3

9

7

34

687

0

UEFNEEZCTQCRAW-UHFFFAOYSA-N InChi Code

InChI=1S/C22H26ClN7O3S/c1-14-4-3-5-16(23)20(14)28-21(32)17-13-24-22(34-17)27-18-12-19(26-15(2)25-18)29-6-8-30(33,9-7-29)10-11-31/h3-5,12-13,31H,6-11H2,1-2H3,(H,28,32)(H,24,25,26,27)

N-(2-chloro-6-methylphenyl)-2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)-4-oxido-1-piperazinyl]-2-methyl-4-pyrimidinyl]amino]-5-thiazolecarboxamide

BMS-354825 N-oxide; Dasatinib N-Oxide; 910297-52-8; Dasatinib metabolite M5; B16WQA6880; BMS-606181; 5-Thiazolecarboxamide, N-(2-chloro-6-methylphenyl)-2-((6-(4-(2-hydroxyethyl)-4-oxido-1-piperazinyl)-2-methyl-4-pyrimidinyl)amino)-; N-(2-Chloro-6-methyl-phenyl)-2-((6-(4-(2-hydroxyethyl)-4-oxido-piperazin-4-ium-1-yl)-2-methyl-pyrimidin-4-yl)amino)thiazole-5-carboxamide; N-(2-chloro-6-methylphenyl)-2-[[6-[4-(2-hydroxyethyl)-4-oxido-1-piperazinyl]-2-methyl-4-pyrimidinyl]amino]-5-thiazolecarboxamide;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~8.33 mg/mL (~16.53 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.65 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。