| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AgrA (response regulator of the accessory gene regulator system). [5-(2-Thienyl)-3-isoxazolyl]methanol binds to a hydrophobic cleft in the LytTR domain of AgrA, the DNA-binding domain of the response regulator. This binding inhibits AgrA from binding to its DNA target sequences, thereby blocking the expression of agr-regulated virulence factors, including alpha-hemolysin (Hla), phenol-soluble modulins (PSMs), and various proteases.
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| 体外研究 (In Vitro) |
[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇（化合物D）是一种AgrA-DNA结合抑制剂。它能阻断AgrA与DNA的结合，从而抑制agr调控的毒力因子的表达。体外实验表明，它能降低金黄色葡萄球菌培养物的溶血活性（α-溶血素产生的指标）和酚溶性调节蛋白的产生。研究表明，它能在不影响细菌生长的情况下减弱金黄色葡萄球菌的毒力（MIC > 100 uM）。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇有望降低金黄色葡萄球菌的毒力，并在动物模型中起到保护作用，防止感染。该化合物将在小鼠皮肤脓肿、肺炎或败血症模型中进行评估。由于该化合物不抑制细菌生长，因此有望在不诱导耐药性的情况下，减少组织损伤、细菌扩散和死亡率。
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| 酶活实验 |
对于无细胞 AgrA-DNA 结合实验，首先表达并纯化重组 AgrA 蛋白（LytTR 结构域）。将化合物 [5-(2-噻吩基)-3-异恶唑基]甲醇溶解于 DMSO 中，并稀释至 0.1-100 uM。进行荧光偏振 (FP) 或电泳迁移率变动分析 (EMSA)。将含有 AgrA 结合共有序列（例如，来自 P2 或 P3 启动子区域）的荧光素标记 DNA 探针与纯化的 AgrA (50-200 nM) 在结合缓冲液（20 mM Tris-HCl，pH 8.0，100 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mg/mL BSA）中于室温孵育 30 分钟。然后，加入不同浓度的化合物，继续孵育 30 分钟。测量荧光偏振值，或在非变性聚丙烯酰胺凝胶上分离复合物，并通过荧光显色。采用非线性回归确定AgrA-DNA结合抑制的IC50值。
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| 细胞实验 |
对于体外细胞实验，金黄色葡萄球菌菌株（例如 USA300 LAC、RN6390）在胰蛋白胨大豆肉汤 (TSB) 或 CASO 肉汤中于 37℃ 摇床培养。将培养物稀释至 OD600 约为 0.05，并用浓度为 1-100 uM 的 [5-(2-噻吩基)-3-异恶唑基]甲醇处理。培养 4-6 小时后，收集培养上清液。溶血活性测定方法为：将 1% 兔红细胞与培养上清液于 37℃ 孵育 30 分钟，然后通过分光光度计在 540 nm 处测定血红蛋白释放量。酚溶性调节蛋白 (PSM) 的产生量通过高效液相色谱法 (HPLC) 或表面活性剂活性测定进行定量。AgrA 调控基因（例如 hla、psmalpha、rnaIII）的表达通过 qPCR 进行测定。通过 OD600 监测细菌生长情况，以确认该化合物不会抑制细菌生长。
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| 动物实验 |
对于小鼠皮肤脓肿模型，将6-8周龄的雌性BALB/c小鼠侧腹部剃毛。皮下注射100 μL PBS，其中包含5×10⁷ CFU的金黄色葡萄球菌（例如USA300 LAC）。在感染当天及之后连续2-3天，腹腔注射[5-(2-噻吩基)-3-异恶唑基]甲醇（5-50 mg/kg）或溶剂（含5% DMSO的PBS）。第4天处死小鼠。切除皮肤病变组织，测量脓肿大小。通过匀浆和平板计数法测定脓肿中的细菌数量（CFU）。或者，在肺炎模型中，经鼻内接种10⁷-10⁸ CFU的金黄色葡萄球菌。该化合物在感染前1小时和感染后6小时腹腔注射给药。感染后24-48小时采集肺组织，用于组织病理学检查（苏木精-伊红染色）、髓过氧化物酶（MPO）活性测定和细菌计数。观察存活情况7-14天。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
尚未报道药代动力学数据。[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇是一种小分子化合物（分子量 181.21 g/mol），具有中等亲脂性。其口服生物利用度和组织分布可能中等。该化合物可溶于二甲基亚砜 (DMSO) 和其他有机溶剂。尚未对其详细的 ADME 性质进行表征。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚未有具体的毒性数据报道。作为一种小分子AgrA抑制剂，[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇不抑制细菌生长，表明其直接细胞毒性较低。在基于细胞的实验中，浓度高达100 μM时，未对哺乳动物细胞造成显著毒性。尚未进行正式的毒理学评估。操作时应采取标准的化学品安全防护措施。
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| 参考文献 |
[1]. Leonard PG, et al. Identification of a hydrophobic cleft in the LytTR domain of AgrA as a locus for small molecule interactions that inhibit DNA binding. Biochemistry. 2012 Dec 18;51(50):10035-43.
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| 其他信息 |
[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇是异噁唑类化合物的一员。
[5-(2-噻吩基)-3-异噁唑基]甲醇（化合物D）的分子式为C8H7NO2S，分子量为181.21。它是一种杂环化合物，其结构包含一个与异噁唑甲醇部分相连的噻吩环。其IUPAC名称为[5-(噻吩-2-基)-1,2-噁唑-3-基]甲醇。该化合物是一种用于金黄色葡萄球菌毒力和感染研究的科研化学品，尚未获准用于临床。纯度：99%。为浅黄色至棕色油状物。储存温度为-20℃。 |
| 分子式 |
C8H7NO2S
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|---|---|
| 分子量 |
181.21
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| 精确质量 |
181.02
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| CAS号 |
194491-44-6
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| PubChem CID |
2776547
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.351g/cm3
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| 沸点 |
366ºC at 760mmHg
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| 熔点 |
54-55ºC
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| 蒸汽压 |
5.3E-06mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.603
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| LogP |
1.895
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| tPSA |
74.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
156
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CSC(=C1)C2=CC(=NO2)CO
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| InChi Key |
HUAGDHXVPCSWLD-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C8H7NO2S/c10-5-6-4-7(11-9-6)8-2-1-3-12-8/h1-4,10H,5H2
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| 化学名 |
(5-thiophen-2-yl-1,2-oxazol-3-yl)methanol
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
|---|
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.5185 mL | 27.5923 mL | 55.1846 mL | |
| 5 mM | 1.1037 mL | 5.5185 mL | 11.0369 mL | |
| 10 mM | 0.5518 mL | 2.7592 mL | 5.5185 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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