| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 靶点 |
STING (stimulator of interferon genes); Kd of cGAS product (endogenous 2',3'-cGAMP sodium) = 4.59 nM; Kd of synthetic 2',3'-cGAMP sodium = 3.79 nM (determined by ITC competition assay).[1]
2',3'-cGAMP sodium targets STING, the stimulator of interferon genes. It binds STING with high affinity (Kd = 3.79 nM for human STING), activating the STING-TBK1-IRF3 signaling pathway. This leads to the induction of type I interferons (IFN-β) and other inflammatory cytokines. It is a key mediator of the innate immune response to cytosolic DNA. It also induces repolarization of M2 macrophages in vitro. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
2',3'-cGAMP 钠（cGAS 产物）在洋地黄皂苷透化的 L929 细胞中诱导 IFNβ，EC50 约为 20 nM；所有 cGAMP 异构体的 EC50 值均在 15 至 42 nM 之间，而 c-di-GMP 的 EC50 值大于 500 nM。[1]
2',3'-cGAMP 钠与 STING CTD 的结合亲和力 (Kd) 对于 cGAS 产物为 4.59 nM，对于合成的 2'3'-cGAMP 为 3.79 nM，比 c-di-GMP (Kd 1.21 μM)、3'2'-cGAMP (Kd 1.61 μM) 和 3'3'-cGAMP (Kd 1.04 μM) 低约 300 倍，比 2'2'-cGAMP (Kd 287 nM) 低约 75 倍。[1] 在 STING 突变体检测中，表达野生型人 STING 的 L929 细胞诱导了 IFNβ 的产生。在DNA或2',3'-cGAMP钠刺激下，HEK293T细胞能够响应cGAS诱导产生IFNβ，而R232A或R232H突变体则不具备此功能。表达野生型STING的HEK293T细胞支持cGAS诱导IFNβ，但R232A突变体则不支持。[1] 体外实验表明，2',3'-cGAMP钠与人STING的结合亲和力（Kd）为3.79 nM。它能够诱导外周血单核细胞（PBMC）、树突状细胞和巨噬细胞产生IFN-β和CXCL10。它还能诱导体外M2型巨噬细胞的极化。此外，它还能激活STING-TBK1-IRF3信号通路，进而诱导I型干扰素的产生。该化合物已被用于筛选能够与人STING结合的小分子化合物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，2',3'-cGAMP钠能有效诱导胞质DNA产生I型干扰素反应。作为一种STING激动剂，其免疫刺激作用已在多种动物模型中得到研究。预计体内给药后，它能诱导IFN-β的产生并激活先天免疫反应。详细的体内疗效数据取决于具体的疾病模型和给药途径。
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| 酶活实验 |
采用等温滴定量热法 (ITC)，使用 VP-ITC 微量热仪测定 STING CTD（残基 139-379）与 2',3'-cGAMP 钠盐或其他环状二核苷酸的结合亲和力。滴定在 20°C 下进行，缓冲液为 25 mM Hepes（pH 7.8）、150 mM NaCl。为了研究紧密结合，将化合物作为竞争物滴定到 STING-c-di-GMP 复合物中（摩尔比为 3.55:1）。进样 32 次，每次间隔 4 分钟；使用 NITPIC 积分图谱，并使用 SEDFIT 拟合曲线。[1]
使用 Q-Exactive 质谱仪进行高分辨率 MS 和 MS/MS 分析。全扫描质谱图的 m/z 范围为 300-700，分辨率为 70,000；MS/MS 谱图的分辨率为 35,000，采用数据依赖模式；在归一化碰撞能量为 30 时，HCD 碎裂的前 5 个母离子。[1] 在 30 mM NaH2PO4/Na2HPO4/D2O 缓冲液（pH 7.4）中，于 50°C 下进行 1H 和 31P 核磁共振波谱分析，以比较 cGAS 产物与合成的 cGAMP 异构体。端基质子 (H1) 单峰表明存在 3'-磷酸基团；双峰表明存在 2'-磷酸基团。[1] 使用反相高效液相色谱 (HPLC) 和圆二色谱 (CD) 分析共洗脱物并确认核糖构型。[1] 2',3'-cGAMP 钠的体外 STING 结合实验包括测量其与 STING 蛋白的结合亲和力。结合通常使用表面等离子共振 (SPR) 或荧光偏振法进行评估。Kd 值由结合曲线确定。在细胞活化实验中，用不同浓度的化合物处理细胞，并通过ELISA或qPCR检测IFN-β的产生。该化合物也用于基于TR-FRET的STING结合实验。 |
| 细胞实验 |
内源性2',3'-cGAMP钠由L929小鼠细胞或转染鲱鱼睾丸DNA（HT-DNA）的THP1人单核细胞制备。4小时后，将约3×10^7个细胞在低渗缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 7.4，10 mM KCl，1.5 mM MgCl2）中裂解。裂解液在95°C加热5分钟，并在17,000 g下离心10分钟；上清液用0.1%甲酸/甲醇梯度在C-18柱上进行分级分离；用MS/MS分析具有峰值活性的组分。[1]
为了诱导IFNβ，将不同量的cGAMP异构体或c-di-GMP递送到经洋地黄皂苷透化的L929细胞中。 4 小时后，采用 qRT-PCR 检测 IFNβ RNA。EC50 值使用 GraphPad Prism 5.0 计算。[1] 对于 STING 功能分析，将内源性 STING 被 shRNA 敲低的 L929 细胞稳定重组野生型、R232A 或 R232H 人 STING。将细胞转染 HT-DNA 或用 2',3'-cGAMP 钠处理，然后采用 qRT-PCR 检测 IFNβ RNA；以 poly(I:C) 作为对照。将稳定表达 STING-Flag 突变体的 HEK293T 细胞（内源性 STING 和 cGAS 无法检测）转染人 cGAS 或 MAVS；24 小时后检测 IFNβ RNA。抗STING和抗β-微管蛋白的免疫印迹实验证实了其表达。[1] 体外细胞实验中，2',3'-cGAMP钠的检测方法是将细胞（例如，外周血单核细胞、树突状细胞、巨噬细胞）用不同浓度的化合物（通常为0.1-100 µM）处理4-24小时。通过ELISA或qPCR检测IFN-β和CXCL10的产生来评估STING的激活。IRF3的磷酸化通过Western印迹法进行评估。巨噬细胞的极化可以通过检测M1/M2标志物的表达来评估。该化合物对人STING具有高亲和力。 |
| 动物实验 |
2',3'-cGAMP钠的体内动物研究方案包括在合适的动物模型中进行给药。该化合物将配制成生理盐水或其他合适的溶剂，并通过注射（静脉注射、腹腔注射或皮下注射）给药。给药方案将根据药代动力学和药效学数据确定。研究可能评估STING激活、IFN-β诱导以及组织中免疫细胞的激活。该化合物已被用于研究I型干扰素反应。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
2',3'-cGAMP钠的药代动力学特性具有环状二核苷酸的特征。作为钠盐，其水溶性得到改善。由于其极性和高分子量（钠盐），其口服生物利用度可能有限，通常采用肠外给药。该化合物与STING具有高亲和力（人Kd = 3.79 nM）。详细的药代动力学参数取决于制剂和给药途径。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
2',3'-cGAMP钠的毒性数据有限。该化合物仅供研究使用。作为一种STING激动剂，它可能诱发炎症反应，高剂量时可能伴有毒性。应遵守标准安全预防措施。目前尚无具体的毒性数据。应佩戴适当的个人防护装备。该化合物不适用于人类治疗用途。
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| 参考文献 |
Zhang X, et al. Cyclic GMP-AMP containing mixed phosphodiester linkages is an endogenous high-affinity ligand for STING. Mol Cell. 2013 Jul 25;51(2):226-35. |
| 其他信息 |
cGAS（环状GMP-AMP合成酶）是一种胞质DNA传感器，在DNA存在的情况下，催化ATP和GTP合成2',3'-cGAMP钠。2',3'-cGAMP钠与STING（内质网衔接蛋白）结合，激活IKK和TBK1，进而激活NF-κB和IRF3，最终导致I型干扰素的产生。[1] STING CTD（残基139-379）与cGAS产物（2',3'-cGAMP钠）结合的晶体结构已在1.88 Å分辨率下解析（空间群C2）。STING二聚体呈蝴蝶状；配体结合后，两个亚基发生内旋（臂间距接近约20 Å），并在结合口袋上方形成一个新的四链反平行β折叠盖（残基219-249）。关键相互作用：鸟嘌呤碱基与Glu260、Thr263和Val239接触；GMP的游离3'-OH与Ser162接触；α-磷酸基团与Arg238（两个亚基）和Arg232（一个亚基）接触。 R232A 或 R232H 突变会严重损害 IFNβ 的诱导，凸显了 Arg232（人类常见等位基因）对 STING 功能的重要性。[1] 2',3'-cGAMP 钠（CAS 编号：2734858-36-5）是天然的生理性 STING 激动剂，对人 STING 的 Kd 值为 3.79 nM，对大鼠 STING 的 Kd 值为 120 nM。它能诱导外周血单核细胞 (PBMC)、树突状细胞和巨噬细胞产生 IFN-β 和 CXCL10。它还能在体外诱导 M2 型巨噬细胞的复极化。它激活 STING-TBK1-IRF3 通路，从而诱导 I 型干扰素的产生。它用于先天免疫研究，但尚未获准用于临床治疗。
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| 分子式 |
C20H25N10NAO13P2
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|---|---|
| 分子量 |
698.408995389938
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| CAS号 |
2734858-36-5
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| SMILES |
OC1([H])[C@@]2([H])COP(O[C@@]3([H])[C@@H](O)[C@H](N4C=NC5=C(N=CN=C45)N)O[C@]3([H])COP(O)(=O)O[C@@]1([H])[C@H](N1C=NC3C(N=C(N)NC1=3)=O)O2)(O)=O.[NaH]
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| 别名 |
2',3'-cGAMP sodium; 2',3'-cGAMP (sodium); 2734858-36-5; orb1745284;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4318 mL | 7.1591 mL | 14.3182 mL | |
| 5 mM | 0.2864 mL | 1.4318 mL | 2.8636 mL | |
| 10 mM | 0.1432 mL | 0.7159 mL | 1.4318 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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