3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate

别名: DiO(细胞膜绿色荧光探针);3,3`-双十八烷基氧碳花菁高氯酸盐; 3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并恶唑-2-亚基)-1-丙烯-1-基]苯并恶唑高氯酸盐;3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并恶唑-2-亚基)-1-丙烯-1-基]苯并恶唑鎓高氯酸盐;3,3'-二-N-十八烷基氧代羰花青高氯酸盐;3,3'-二十八烷基氧杂碳菁高氯酸盐
目录号: V30836 纯度: ≥98%
DiO 是一种长链碳花青染料。
3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate CAS号: 34215-57-1
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
DiO 是一种长链碳花青染料。碳花青染料广泛用作亲脂性示踪剂,用于标记细胞、细胞器、脂质体、病毒和脂蛋白。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
标记细胞、细胞器、调色剂、病毒和脂蛋白是指甲花染料的常见应用。 DiO (DiOC18 (3))、DiI (DiIC18 (3))、DiD (DiIC18 (5) )) 和 DiR 是长链指甲花花青的实例。 DiA (4-Di-16-ASP) 是一种二烷基菲尼克斯染料,也用于标记膜和其他焦点结构。与 DiI (C18) 相比,DiIC16 (3) 具有更短的烷基取代基 (C16)。它们具有依赖于环境的荧光团、非常高的消光因子以及金字塔环境中的短暂激发态损耗。当整合到膜中或附着到亲脂性生物分子上时,它们变得高度荧光且相对光稳定。在水中,它们会形成油并发出弱荧光。由于其光学特性,它们非常适合细胞质膜染色。细胞被识别后,这些染料横向渗透质膜,对整个细胞进行染色 [1 DiO、DiI、DiD 和 DiR 分别显示出明显的绿色、橙色、红色和红色荧光,从而更容易对活细胞成像多种颜色并进行流式细胞术。标准 FITC 和 TRITC 滤光片可分别与 DiO 和 DiI 一起使用。 DiI 及其类似物是其中使用最广泛的,因为它们的细胞毒性通常极低。 DiI 还经常用于测量脂蛋白,包括 HDL 和 LDL。为了进行测定,还经常使用亲脂性自由基染料 DiA。第一个通用协议。准备好第二染色液。在乙醇、二甲基甲酰胺 (DMF) 或 DMSO 中制备储备液:乙醇、二甲基甲酰胺 (DMF) 或 DMSO 中的储备液浓度应为 1–5 mM。 DMF含有大量乙醇,可作为Di的溶剂。建议根据需要等分储备溶液。等分多余的溶液,然后将其冷冻在 -20°C 或以下。请勿反复冷冻和解冻。该溶液的保质期为六个月。要制备工作溶液,请将储备溶液添加到适当的缓冲液中。例如,您可以使用无血清培养基、HBSS 或 PBS 制备 1 至 5 μM 的工作溶液。我们建议不要将存储溶液存放超过一天。注:工作液2的最终浓度。悬浮细胞 A. 4°C、1000g 离心三到五分钟。用PBS洗涤两次,每次五分钟,弃去上清液。细胞密度为1×106/mL。 b.添加 1 mL Di 工作溶液后,查看 C。在 400 g、4°C 下离心 3 至 4 分钟后,除去上清液。 d.用PBS洗两次,每次五分钟。 e.使用 PBS 或无血清细胞重悬细胞,然后使用荧光显微镜观察五到三十分钟。 3. 粘附的细胞在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 b.清除培养基的盖玻片,并使用微型吸气器提取一些细胞。 C. 为了完全覆盖细胞,添加 100 μL 工作溶液并轻轻摇动 5-30 分钟。 d.应用培养基两次,每次洗涤五分钟。使用流式细胞术或荧光显微镜观察。
- 3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)(简称DiOC18(3)高氯酸盐)是一种亲脂性荧光探针,通过疏水相互作用插入模型生物膜的脂质双层。它具有特征性光物理性质:在极性溶剂中,荧光发射波长较短,量子产率较低;在模型生物膜(如脂质体)中,发射波长红移且荧光强度升高,可反映膜环境极性[3][4]
- 在培养的小鼠比目鱼肌细胞中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)标记细胞膜。收缩诱导损伤后,探针从细胞膜重分布至细胞质,荧光显微镜可检测到该现象,提示细胞膜完整性受损[2]
- 在体外原代神经元培养中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)用于多色“DiOlistic”标记。它能有效染色神经元膜和突起,与其他亲脂性染料组合使用时,可清晰观察神经元形态和分支[1]
体内研究 (In Vivo)
- 在小鼠中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)用于神经系统的DiOlistic标记。探针包被在金颗粒上,通过基因枪递送至脑和脊髓组织,特异性标记神经元膜,可三维可视化神经环路和突起投射[1]
- 在小鼠比目鱼肌损伤模型中,收缩诱导损伤后向肌肉局部应用3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)。体内荧光成像显示损伤肌纤维中探针重分布,与膜损伤程度相关[2]
细胞实验
- 模型生物膜光物理实验:制备模型膜(如脂质体)并悬浮于缓冲液中,加入终浓度1-10 μM的3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate),37°C孵育30分钟。使用荧光分光光度计检测荧光激发/发射光谱、量子产率和荧光寿命,分析探针与膜的相互作用[3][4]
- 肌细胞膜标记与损伤实验:小鼠比目鱼肌细胞接种于盖玻片,加入5 μM探针溶液,37°C孵育1小时标记细胞膜。通过电刺激诱导细胞收缩损伤,荧光显微镜观察探针分布(膜 vs 细胞质),评估膜完整性[2]
- 神经元DiOlistic标记实验:原代神经元接种于多聚赖氨酸包被的培养皿,将包被探针的金颗粒通过基因枪递送至细胞内。孵育24-48小时后固定细胞,荧光显微镜观察标记的突起和神经元形态[1]
动物实验
神经系统双极标记:小鼠麻醉后,暴露目标神经组织(大脑皮层或脊髓)。使用基因枪将包覆有3,3'-二辛基氧杂碳菁高氯酸盐(以及其他用于多色标记的亲脂性染料)的金颗粒注入组织。缝合切口,小鼠恢复24-48小时。随后处死动物,解剖、固定并切片神经组织。使用荧光显微镜对标记的神经元和神经回路进行成像[1]
- 肌肉损伤和膜标记:小鼠麻醉后,对单侧比目鱼肌进行电刺激以诱导收缩性损伤。将 3,3'-二辛基氧杂碳菁高氯酸盐溶液 (10 μM) 局部涂抹于受损肌肉,孵育 1 小时。取出肌肉组织,冷冻后切片。采用荧光显微镜分析探针的重新分布并评估膜损伤 [2]
参考文献

[1]. Multicolor "DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic dye combinations. Neuron. 2000 Aug;27(2):219-25.

[2]. Redistribution of cell membrane probes following contraction-induced injury of mouse soleus muscle.

[3]. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.

[4]. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.

其他信息
3,3'-二辛基氧杂碳菁高氯酸盐是一种合成的亲脂性阳离子荧光探针,通常被称为 DiOC18(3) 高氯酸盐 [1][2][3][4]
- 其核心机制是通过疏水相互作用和范德华力插入生物膜的脂质双层,其荧光特性(发射波长、强度、寿命)对膜微环境(极性、流动性)敏感 [3][4]
- 主要应用包括:神经系统中神经元和神经回路的多色标记(DiOlistic 技术)[1];评估肌肉细胞和其他细胞类型的质膜完整性 [2];利用光物理方法研究模型生物膜,以探究膜的结构和性质[3][4]
- 它是一种用于生物成像和膜生物学研究的研究工具,而不是治疗药物,不具有任何药理活性(例如,抗增殖、抗炎)[1][2][3][4]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C53H85CLN2O6
分子量
881.70500
精确质量
880.61
CAS号
34215-57-1
PubChem CID
9962797
外观&性状
Orange to red solid powder
LogP
16.78
tPSA
109.36
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
36
重原子数目
62
分子复杂度/Complexity
1020
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCCCCCCCCCCCCCCCCN\1C2=CC=CC=C2O/C1=C/C=C/C3=[N+](C4=CC=CC=C4O3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC.[O-]Cl(=O)(=O)=O
InChi Key
GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C53H85N2O2.ClHO4/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-37-46-54-48-40-33-35-42-50(48)56-52(54)44-39-45-53-55(49-41-34-36-43-51(49)57-53)47-38-32-30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-8-6-4-2;2-1(3,4)5/h33-36,39-45H,3-32,37-38,46-47H2,1-2H3;(H,2,3,4,5)/q+1;/p-1
化学名
(2E)-3-octadecyl-2-[(E)-3-(3-octadecyl-1,3-benzoxazol-3-ium-2-yl)prop-2-enylidene]-1,3-benzoxazole;perchlorate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMF : 10 mg/mL (~11.34 mM)
DMSO : ~5 mg/mL (~5.67 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.1342 mL 5.6708 mL 11.3416 mL
5 mM 0.2268 mL 1.1342 mL 2.2683 mL
10 mM 0.1134 mL 0.5671 mL 1.1342 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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