3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate

别名: DiO(细胞膜绿色荧光探针);3,3`-双十八烷基氧碳花菁高氯酸盐; 3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并恶唑-2-亚基)-1-丙烯-1-基]苯并恶唑高氯酸盐;3-十八烷基-2-[3-(3-十八烷基-2(3H)-苯并恶唑-2-亚基)-1-丙烯-1-基]苯并恶唑鎓高氯酸盐;3,3'-二-N-十八烷基氧代羰花青高氯酸盐;3,3'-二十八烷基氧杂碳菁高氯酸盐
目录号: V30836 纯度: ≥98%
DiO 是一种长链碳花青染料。
3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate CAS号: 34215-57-1
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
DiO 是一种长链碳花青染料。碳花青染料广泛用作亲脂性示踪剂,用于标记细胞、细胞器、脂质体、病毒和脂蛋白。
生物活性&实验参考方法
体外研究 (In Vitro)
标记细胞、细胞器、调色剂、病毒和脂蛋白是指甲花染料的常见应用。 DiO (DiOC18 (3))、DiI (DiIC18 (3))、DiD (DiIC18 (5) )) 和 DiR 是长链指甲花花青的实例。 DiA (4-Di-16-ASP) 是一种二烷基菲尼克斯染料,也用于标记膜和其他焦点结构。与 DiI (C18) 相比,DiIC16 (3) 具有更短的烷基取代基 (C16)。它们具有依赖于环境的荧光团、非常高的消光因子以及金字塔环境中的短暂激发态损耗。当整合到膜中或附着到亲脂性生物分子上时,它们变得高度荧光且相对光稳定。在水中,它们会形成油并发出弱荧光。由于其光学特性,它们非常适合细胞质膜染色。细胞被识别后,这些染料横向渗透质膜,对整个细胞进行染色 [1 DiO、DiI、DiD 和 DiR 分别显示出明显的绿色、橙色、红色和红色荧光,从而更容易对活细胞成像多种颜色并进行流式细胞术。标准 FITC 和 TRITC 滤光片可分别与 DiO 和 DiI 一起使用。 DiI 及其类似物是其中使用最广泛的,因为它们的细胞毒性通常极低。 DiI 还经常用于测量脂蛋白,包括 HDL 和 LDL。为了进行测定,还经常使用亲脂性自由基染料 DiA。第一个通用协议。准备好第二染色液。在乙醇、二甲基甲酰胺 (DMF) 或 DMSO 中制备储备液:乙醇、二甲基甲酰胺 (DMF) 或 DMSO 中的储备液浓度应为 1–5 mM。 DMF含有大量乙醇,可作为Di的溶剂。建议根据需要等分储备溶液。等分多余的溶液,然后将其冷冻在 -20°C 或以下。请勿反复冷冻和解冻。该溶液的保质期为六个月。要制备工作溶液,请将储备溶液添加到适当的缓冲液中。例如,您可以使用无血清培养基、HBSS 或 PBS 制备 1 至 5 μM 的工作溶液。我们建议不要将存储溶液存放超过一天。注:工作液2的最终浓度。悬浮细胞 A. 4°C、1000g 离心三到五分钟。用PBS洗涤两次,每次五分钟,弃去上清液。细胞密度为1×106/mL。 b.添加 1 mL Di 工作溶液后,查看 C。在 400 g、4°C 下离心 3 至 4 分钟后,除去上清液。 d.用PBS洗两次,每次五分钟。 e.使用 PBS 或无血清细胞重悬细胞,然后使用荧光显微镜观察五到三十分钟。 3. 粘附的细胞在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。 b.清除培养基的盖玻片,并使用微型吸气器提取一些细胞。 C. 为了完全覆盖细胞,添加 100 μL 工作溶液并轻轻摇动 5-30 分钟。 d.应用培养基两次,每次洗涤五分钟。使用流式细胞术或荧光显微镜观察。
- 3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)(简称DiOC18(3)高氯酸盐)是一种亲脂性荧光探针,通过疏水相互作用插入模型生物膜的脂质双层。它具有特征性光物理性质:在极性溶剂中,荧光发射波长较短,量子产率较低;在模型生物膜(如脂质体)中,发射波长红移且荧光强度升高,可反映膜环境极性[3][4]
- 在培养的小鼠比目鱼肌细胞中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)标记细胞膜。收缩诱导损伤后,探针从细胞膜重分布至细胞质,荧光显微镜可检测到该现象,提示细胞膜完整性受损[2]
- 在体外原代神经元培养中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)用于多色“DiOlistic”标记。它能有效染色神经元膜和突起,与其他亲脂性染料组合使用时,可清晰观察神经元形态和分支[1]
体内研究 (In Vivo)
- 在小鼠中,3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)用于神经系统的DiOlistic标记。探针包被在金颗粒上,通过基因枪递送至脑和脊髓组织,特异性标记神经元膜,可三维可视化神经环路和突起投射[1]
- 在小鼠比目鱼肌损伤模型中,收缩诱导损伤后向肌肉局部应用3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)。体内荧光成像显示损伤肌纤维中探针重分布,与膜损伤程度相关[2]
细胞实验
- 模型生物膜光物理实验:制备模型膜(如脂质体)并悬浮于缓冲液中,加入终浓度1-10 μM的3,3'-二硬脂基氧杂碳菁高氯酸盐(3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate),37°C孵育30分钟。使用荧光分光光度计检测荧光激发/发射光谱、量子产率和荧光寿命,分析探针与膜的相互作用[3][4]
- 肌细胞膜标记与损伤实验:小鼠比目鱼肌细胞接种于盖玻片,加入5 μM探针溶液,37°C孵育1小时标记细胞膜。通过电刺激诱导细胞收缩损伤,荧光显微镜观察探针分布(膜 vs 细胞质),评估膜完整性[2]
- 神经元DiOlistic标记实验:原代神经元接种于多聚赖氨酸包被的培养皿,将包被探针的金颗粒通过基因枪递送至细胞内。孵育24-48小时后固定细胞,荧光显微镜观察标记的突起和神经元形态[1]
动物实验
- Nervous system DiOlistic labeling: Mice were anesthetized, and target neural tissues (cerebral cortex or spinal cord) were exposed. Gold particles coated with 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate (and other lipophilic dyes for multicolor labeling) were delivered into the tissues using a gene gun. Incisions were sutured, and mice were allowed to recover for 24-48 hours. Animals were then sacrificed, neural tissues were dissected, fixed, and sectioned. Fluorescence microscopy was used to image labeled neurons and neural circuits [1]
- Muscle injury and membrane labeling: Mice were anesthetized, and unilateral soleus muscles were subjected to electrical stimulation to induce contraction-induced injury. 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate solution (10 μM) was topically applied to the injured muscle and incubated for 1 hour. Muscles were harvested, frozen, and sectioned. Fluorescence microscopy was used to analyze probe redistribution and evaluate membrane damage [2]
参考文献

[1]. Multicolor "DiOlistic" labeling of the nervous system using lipophilic dye combinations. Neuron. 2000 Aug;27(2):219-25.

[2]. Redistribution of cell membrane probes following contraction-induced injury of mouse soleus muscle.

[3]. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.

[4]. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.

其他信息
- 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate is a synthetic lipophilic cationic fluorescent probe, commonly known as DiOC18(3) perchlorate [1][2][3][4]
- Its core mechanism involves inserting into the lipid bilayer of biological membranes via hydrophobic and van der Waals interactions, with fluorescence properties (emission wavelength, intensity, lifetime) sensitive to the membrane microenvironment (polarity, fluidity) [3][4]
- Key applications include: multicolor labeling of neurons and neural circuits in the nervous system (DiOlistic technique) [1]; assessment of plasma membrane integrity in muscle cells and other cell types [2]; photophysical studies of model biological membranes to investigate membrane structure and properties [3][4]
- It is a research tool for biological imaging and membrane biology studies, not a therapeutic drug, and exhibits no pharmacological activities (e.g., anti-proliferative, anti-inflammatory) [1][2][3][4]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C53H85CLN2O6
分子量
881.70500
精确质量
880.61
CAS号
34215-57-1
PubChem CID
9962797
外观&性状
Orange to red solid powder
LogP
16.78
tPSA
109.36
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
36
重原子数目
62
分子复杂度/Complexity
1020
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCCCCCCCCCCCCCCCCN\1C2=CC=CC=C2O/C1=C/C=C/C3=[N+](C4=CC=CC=C4O3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC.[O-]Cl(=O)(=O)=O
InChi Key
GFZPJHFJZGRWMQ-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C53H85N2O2.ClHO4/c1-3-5-7-9-11-13-15-17-19-21-23-25-27-29-31-37-46-54-48-40-33-35-42-50(48)56-52(54)44-39-45-53-55(49-41-34-36-43-51(49)57-53)47-38-32-30-28-26-24-22-20-18-16-14-12-10-8-6-4-2;2-1(3,4)5/h33-36,39-45H,3-32,37-38,46-47H2,1-2H3;(H,2,3,4,5)/q+1;/p-1
化学名
(2E)-3-octadecyl-2-[(E)-3-(3-octadecyl-1,3-benzoxazol-3-ium-2-yl)prop-2-enylidene]-1,3-benzoxazole;perchlorate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMF : 10 mg/mL (~11.34 mM)
DMSO : ~5 mg/mL (~5.67 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.1342 mL 5.6708 mL 11.3416 mL
5 mM 0.2268 mL 1.1342 mL 2.2683 mL
10 mM 0.1134 mL 0.5671 mL 1.1342 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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