| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
3F8 targets glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3β). It is an ATP-competitive inhibitor of GSK3β. In the presence of 10 μM ATP, the IC₅₀ of 3F8 is 34 nM; in the presence of 100 μM ATP, the IC₅₀ increases to 304 nM. In a panel of 22 representative kinases, 5 μM 3F8 inhibited GSK3β activity by 91%, demonstrating selectivity. [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在利用 293T 细胞进行的 β-catenin-TCF 报告基因检测中，4 μM 的 3F8 处理使荧光素酶活性较对照组提高了约 15 倍，表明 3F8 上调了 Wnt 信号通路。[1] 计算机对接分析显示，3F8 能与人 GSK3β 的 ATP 结合口袋结合，预测结合自由能为 -9.9 kcal/mol，提示其为 ATP 竞争性抑制剂。[1] 在体外 GSK3β 活性检测中，3F8 以 ATP 竞争性方式抑制人 GSK3β。在 10 μM ATP 条件下，3F8 的 IC₅₀ 为 34 nM；在 100 μM ATP 条件下，IC₅₀ 为 304 nM。在相同条件下，3F8 的 IC₅₀ 低于常用的 GSK3 抑制剂 SB216763。 [1]
在针对 22 种代表性哺乳动物激酶的选择性筛选中，5 μM 的 3F8 对 GSK3β 活性的抑制率达 91%，而对其他激酶的抑制率则低得多，证实了其对 GSK3 的选择性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在斑马鱼胚胎中，3F8 处理可诱导剂量依赖性的“无眼”表型（眼睛和前脑缺失），类似于典型的 Wnt 过表达。引起无眼表型的有效浓度 (Cₑ) 为 7.5 μM。3F8 的 Cₑ/IC₅₀ 比值为 221，低于其他测试的 GSK3 抑制剂（SB216763、GSK-3β 抑制剂 IX、GSK-3β 抑制剂 XII 和 GSK-3 抑制剂 XV、TWS119），表明 3F8 在体内更有效，可能是由于其更好的吸收和/或稳定性。[1]
使用 3F8 研究了前脑决定的时间：在 2 细胞期用 3.75 μM 3F8 处理的胚胎均表现出无眼表型；所需浓度逐渐增加至 11.25 μM，直至盾状期；原肠胚形成（2 体节期）后，即使浓度高达 75 μM，3F8 也不再影响脑发育。[1] 受精后 2 天，用鱼水冲洗去除 3F8 后，22% 的“无眼”胚胎在受精后 5 天（dpf）发育出前脑和眼睛，表明已分化的前脑祖细胞仍然存在并可以再生。[1] 全胚原位杂交显示，前脑标记物 pax2a 和 dlx2a 的表达对 3F8 处理敏感；在能够同时抑制这两个基因的剂量下，未观察到前脑再生。[1] |
| 酶活实验 |
GSK3β活性测定（基于ELISA）： 将重组人GSK3β加入到有或无抑制剂（3F8、其类似物或SB216763）的反应体系中。反应缓冲液包含40 mM HEPES（pH 7.2）、5 mM MgCl₂、5 mM EDTA、50 μg/mL肝素和浓度分别为10、30或100 μM的ATP。底物为重组人TAU-441。对照反应分别不添加ATP、TAU-441或GSK3β。反应混合物在30°C孵育1小时。使用人Tau [pS396] ELISA试剂盒测定磷酸化TAU-441的量。读取450 nm处的吸光度。使用四参数算法拟合活性曲线。 [1]
激酶选择性分析： 使用商业激酶分析服务，在 1% DMSO 溶液中，以 5 μM 的浓度测试了 22 种具有代表性的哺乳动物激酶对 3F8 的抑制作用。[1] |
| 细胞实验 |
β-catenin-TCF 报告基因检测（superTOPflash）： 将 293T 细胞接种于 24 孔板中，并用 200 ng superTOPflash 报告基因质粒和 20 ng RLTK（Renilla 荧光素酶对照）质粒进行转染。转染 24 小时后，向细胞中加入指定浓度的 3F8，孵育 18 小时。然后制备细胞提取物，并使用双荧光素酶报告基因检测系统依次检测萤火虫荧光素酶和 Renilla 荧光素酶活性。萤火虫荧光素酶读数以 Renilla 荧光素酶读数进行标准化。[1]
|
| 动物实验 |
斑马鱼胚胎化学筛选： 将野生型AB品系斑马鱼胚胎排列于96孔板中（每孔6个胚胎），孔内盛有200 μL含有1×抗生素-抗真菌溶液的新鲜鱼水。在盾状期之前，使用自动化机器人向胚胎中加入浓度约为10 μM的3F8。胚胎在化合物溶液中培养至多7天。在解剖显微镜下观察“无眼”表型。3F8的储备液用DMSO配制，工作液由DMSO储备液稀释到鱼水中配制。[1]
前脑发育时间研究： 在不同的发育阶段（2细胞期、盾状期、2体节期），用不同浓度的3F8（例如，3.75 μM、11.25 μM，最高75 μM）处理斑马鱼胚胎。对处理过的胚胎进行观察，以了解其脑和眼的形成情况。[1] 再生实验： 在诱导无眼表型的浓度下，用 3F8 处理胚胎 2 天后，用鱼缸水冲洗以去除化合物，然后让胚胎发育至受精后 5 天。量化再生出前脑和眼睛的胚胎百分比。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在斑马鱼胚胎中，浓度足以诱导无眼表型的3F8处理会导致轻微的心脏水肿和肥大，但与DMSO处理的对照组相比，其他方面体型和外观均正常。用GFP标记的内脏器官（血管、肝脏、胰腺）处理转基因斑马鱼后，未观察到明显的坏死或异常，表明3F8对斑马鱼没有明显的非特异性发育毒性。[1]
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
3F8（5-乙基-7,8-二甲氧基-1H-吡咯并[3,4-c]异喹啉-1,3-(2H)-二酮）是一种新型小分子GSK3抑制剂，它是通过对包含4000种化合物的化合物库（DIVERSet™）进行筛选而发现的，筛选过程中使用了斑马鱼“无眼”表型作为检测方法。该表型反映了Wnt信号通路的异位激活。在相同的体外检测条件下，3F8的活性高于常用的GSK3抑制剂SB216763。其衍生物3F8.1（7,8-二甲氧基-5-丙基-1H-吡咯并[3,4-c]异喹啉-1,3-(2H)-二酮）也表现出类似的活性。基于3F8的结构，合成了新的类似物（6a和6b）。它们对 GSK3β 的抑制作用 IC₅₀ 值分别为 270 nM 和 92 nM。3F8 的 Cₑ/IC₅₀ 比值为 221，表明其具有良好的体内活性。该化合物可作为研究 GSK3 活性和 Wnt 信号通路的工具，并可作为靶向 GSK3 相关疾病（包括 II 型糖尿病、阿尔茨海默病和癌症）的药物研发的潜在先导化合物。[1]
|
| 分子式 |
C15H14N2O4
|
|---|---|
| 分子量 |
286.29
|
| 精确质量 |
286.095
|
| CAS号 |
159109-11-2
|
| PubChem CID |
23829003
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| LogP |
1.708
|
| tPSA |
81.01
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
21
|
| 分子复杂度/Complexity |
441
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C(C1C2=C(C=C(OC)C(OC)=C2)C2C(=O)NC(=O)C=2N=1)C
|
| InChi Key |
ULVWJFBHQIXEPE-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H14N2O4/c1-4-9-7-5-10(20-2)11(21-3)6-8(7)12-13(16-9)15(19)17-14(12)18/h5-6H,4H2,1-3H3,(H,17,18,19)
|
| 化学名 |
5-Ethyl-7,8-dimethoxy-pyrrolo[3,4-c]isoquinoline-1,3-dione
|
| 别名 |
3F 8 3F83F-8
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4930 mL | 17.4648 mL | 34.9296 mL | |
| 5 mM | 0.6986 mL | 3.4930 mL | 6.9859 mL | |
| 10 mM | 0.3493 mL | 1.7465 mL | 3.4930 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01183416 | COMPLETEDWITH RESULTS | Drug: 3F8 monoclonal antibody and 13-cis-Retinoic Acid | Neuroblastoma | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | 2010-08 | Phase 2 |
| NCT01183429 | COMPLETEDWITH RESULTS | Drug: 3F8 and 13-cis-retinoic acid | Neuroblastoma | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | 2010-08-12 | Phase 2 |
| NCT01183884 | TERMINATEDWITH RESULTS | Biological: 3F8/GM-CSF Immunotherapy Plus 13-Cis-Retinoic Acid |
Neuroblastoma | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | 2010-08 | Phase 2 |
| NCT01183897 | COMPLETEDWITH RESULTS | Biological: 3F8/GM-CSF Immunotherapy Plus 13-Cis-Retinoic |
Neuroblastoma | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | 2010-08-12 | Phase 2 |
| NCT00450307 | COMPLETED | Biological: monoclonal antibody 3F8 Biological: sargramostim |
Neuroblastoma | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | 2005-06 | Phase 1 |
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
