4-Chloro-3-(2,4-dihydroxyphenylazo)-2-hydroxybenzene-1-sulfonic acid

别名: Lumogallion IREALumogallion NSC-102798 NSC102798NSC 102798 荧光镓;荧光镓试剂[用于铝,镓及其他金属类的荧光试剂];荧光镓试剂;Lumogallion [Fluorimetric reagent for Al, Ga and other metals] 荧光镓试剂[用于铝,镓及其他金属类的荧光试剂];2,2',4'-三羟基-5-氯偶氮-3-磺酸; 4-氯-6-(2,4-二羟基苯基偶氮)-1-苯酚-2-磺酸
目录号: V9568 纯度: ≥98%
Lumogallion 是一种高灵敏度荧光试剂,用于检测铝、镓和其他金属。
4-Chloro-3-(2,4-dihydroxyphenylazo)-2-hydroxybenzene-1-sulfonic acid CAS号: 4386-25-8
产品类别: New1
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产品描述
Lumogallion 是一种高灵敏度的荧光试剂,用于检测铝、镓和其他金属。Lumogallion 的激发波长为 490 nm,发射光谱范围为 520 nm 至 650 nm,峰值接近 580 nm。
生物活性&实验参考方法
靶点
Aluminum ions (Al3+) bound to aluminum adjuvant particles/aggregates [2]
体外研究 (In Vitro)
Lumogallion(1 mM,45 分钟)可检测阿尔茨海默病患者脑组织中的铝含量[1]。Lumogallion 可用作探针,利用细胞内铝佐剂对活细胞进行染色[2]。Lumogallion(10 μM,60 分钟)可检测植物根尖细胞中的铝含量[3]。操作指南(这是我们推荐的方案。此步骤仅供参考,应根据您的具体需求进行调整。)1. 将 Lumogalion 溶解于 0.1 M 醋酸盐缓冲液(pH 5.2)中。2. 将样品与 10 μM Lumogalion 在黑暗中孵育 60 分钟。3. 用醋酸盐缓冲液洗涤混合样品两次,每次 15 分钟,然后使用共聚焦激光显微镜进行观察。4. 激发波长为 488 nm,发射波长为 520 nm。
该化合物与活细胞吞噬的细胞内铝佐剂结合后,表现出强烈的荧光。荧光在细胞质中呈现为斑点。用 Lumogalion 对活细胞进行染色显示,悬浮细胞和贴壁细胞系(THP-1 和 GL261)均能内化铝佐剂颗粒。[2]
铝佐剂(氢氧化铝凝胶 AlO(OH) 和将 Lumogallion 与 Adjub-Phos AlPO4 混合,可形成明亮的荧光颗粒聚集体,这些聚集体可保持数周的荧光,即使经过多次洗涤,荧光强度也仅有轻微下降。在第二次至第十次重悬/洗涤步骤中,颗粒相关荧光的损失不到 20%。[2]
Lumogallion 的发射光谱非常宽,在 490 nm 激发后,其发射波长范围为 520 至 650 nm,峰值位于 580 nm 附近。这种宽发射光谱使其难以与其他发射波长在 520-620 nm 范围内的荧光染料混合使用,但在远红外区域未观察到干扰。[2]
在与铝佐剂共培养的 GL261 细胞中,Lumogallion 和 LysoTracker Deep Red 的共定位清晰可见,表明铝佐剂定位于酸性囊泡(溶酶体)中。并非所有 Lumogallion 染色与溶菌酶追踪剂(LysoTracker)共定位,后者存在于pH值尚未下降的早期吞噬体中。[2]
与荧光素钠(lumogallion)相比,莫林(morin,另一种铝染料)在检测活细胞内的铝佐剂时,其荧光信号强度要弱几个数量级。[2]
细胞实验
将 THP-1 细胞(0.5×10⁶ 个细胞/ml)与 Alhydrogel AlO(OH) 佐剂(铝含量 0.8 至 50 μg/ml)在 R10 培养基中于 37°C 下共培养 4 至 16 小时。然后加入 Lumogallion 至终浓度为 1.6 至 20 μM,并将细胞在 37°C 下继续孵育不同时间(30 分钟至过夜)。染色后,用 1% (w/v) 多聚甲醛固定细胞,并通过流式细胞术进行分析。[2] 将 THP-1 细胞与预先用 Lumogallion 染色的 Alhydrogel AlO(OH)(铝浓度 0.8 至 50 μg/ml)在 37°C 下共培养 4 至 24 小时。然后固定细胞,并通过流式细胞术进行分析。 [2] 将GL261细胞接种于培养室(1×10⁵个细胞/ml),并使其过夜贴壁。加入铝佐剂(0.3至10 μg/ml),细胞孵育4至16小时。加入终浓度为5 μM的荧光素,并过夜孵育。洗涤细胞,用1%多聚甲醛固定,用含DAPI的封片剂封片,并通过共聚焦显微镜或荧光显微镜进行分析。[2] 对于FITC标记抗体的双重染色:将THP-1细胞与氢氧化铝凝胶(12.5 μg Al/ml)共培养4小时,然后用5 μM荧光素染色过夜。随后,细胞用FITC标记的抗CD45抗体或同型对照抗体染色(冰上孵育30分钟),洗涤、固定,并通过流式细胞术分析,并对荧光染料LumoGallion溢出到绿色通道的量进行70%的补偿。[2]
对于MitoTracker Deep Red双重染色:THP-1细胞与预先用LumoGallion染色的氢氧化铝凝胶(12.5 μg Al/ml)共培养过夜。然后加入5 nM MitoTracker Deep Red,于37°C孵育30分钟。细胞洗涤、固定后,通过流式细胞术分析,无需进行量补偿。[2]
对于LysoTracker Deep Red双重染色:GL261细胞与2.5 μg/ml AlO(OH)₂共培养6小时,然后加入10 μM LumoGallion,过夜孵育。随后,将细胞用 200 nM LysoTracker Deep Red 在 37°C 下染色 1 小时,洗涤、固定、封片,并用共聚焦显微镜进行分析。[2]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
在含有 50 μM lumogallion 的培养基中孵育 24 小时后,未观察到对 THP-1 细胞活力的影响。细胞计数:在 R10 培养基中,细胞密度为 0.91×10⁶±0.03×10⁶ 个/ml;与 50 μM lumogallion 共培养后,细胞密度为 0.86×10⁶±0.03×10⁶ 个/ml。MTT 检测:在 R10 培养基中,600 nm 处的吸光度为 1.07±0.04;在含有 lumogallion 的培养基中,吸光度为 1.14±0.04。未研究更高浓度或更长孵育时间的影响。 [2]
与未染色的氢氧化铝凝胶相比,用荧光素钠预染色的氢氧化铝凝胶在与THP-1细胞共培养后,经细胞计数,并未显示出细胞毒性增加。[2]
参考文献

[1]. The Identification of Aluminum in Human Brain Tissue Using Lumogallion and Fluorescence Microscopy. J Alzheimers Dis. 2016 Oct 18;54(4):1333-1338.

[2]. Al adjuvants can be tracked in viable cells by lumogallion staining. J Immunol Methods. 2015 Jul;422:87-94.

[3]. Highly sensitive analytical method for aluminum movement in soybean root through lumogallion staining. J. Plant Res. 110, 305–309 (1997).

其他信息
Lumogallion 是一种用于检测植物和哺乳动物组织中铝的组织学染色剂。它已被用于证实单核细胞系中存在明确的铝佐剂。该化合物能与铝佐剂颗粒牢固结合。预染色 Alhydrogel 后,铝聚集体的 z 电位从 +13±4 mV 降至 +3±2 mV,并可能导致聚集体尺寸略微增大。预染色后,4.6±0.8% 的聚集体尺寸大于 3 μm,而未染色的 Alhydrogel 中该比例为 3.8±0.2%。[2] Lumogallion 可以直接添加到细胞中,用于染色扩散后的细胞内铝佐剂;也可以在与细胞孵育前对铝佐剂进行预染色,以制备可追踪的铝制剂。建议用 Lumogallion 孵育过夜以达到染色平衡,但不到一小时即可观察到清晰的信号。 [2]并非所有铝制剂都能被荧光染料荧光染色;用铝酯包覆的Al₂O₃纳米颗粒在预染色后几乎没有荧光,而AlO(OH)纳米颗粒则呈现明显的黄色。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C12H9CLN2O6S
分子量
344.722
精确质量
343.987
CAS号
4386-25-8
PubChem CID
97167
外观&性状
Brown to reddish brown solid powder
密度
1.75g/cm3
折射率
1.706
LogP
4.199
tPSA
148.16
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
8
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
22
分子复杂度/Complexity
510
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
OTKYOGBGHUUFPC-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C12H9ClN2O6S/c13-6-3-9(12(18)11(4-6)22(19,20)21)15-14-8-2-1-7(16)5-10(8)17/h1-5,16-18H,(H,19,20,21)
化学名
4-Chloro-3-(2,4-dihydroxyphenylazo)-2-hydroxybenzene-1-sulfonic acid
别名
Lumogallion IREALumogallion NSC-102798 NSC102798NSC 102798
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~290.08 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9009 mL 14.5045 mL 29.0091 mL
5 mM 0.5802 mL 2.9009 mL 5.8018 mL
10 mM 0.2901 mL 1.4505 mL 2.9009 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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