5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate

别名: 5[6]-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯;5(6)-羧基-2,7-二氯荧光素二乙酸盐;5(6)-羧基-2’,7’-二氯荧光素3’,6’-二乙酸酯;5[6]-羧基-2'',7''-二氯荧光素二乙酸酯;5[6]-羧基-2,7-二氯荧光素二乙酸酯; 5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯;5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯, 混合物;5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素3',6'-二乙酸酯
目录号: V45634 纯度: ≥98%
5(6)-Carboxy-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯是一种细胞穿透/可穿透指示剂。
5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate CAS号: 127770-45-0
产品类别: New3
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯是一种细胞穿透性指示剂。5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯可用于测量人神经元胶质细胞 (HNG) 原代培养物中活性氧 (ROS) 的生成。
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(也称为 5(6)-CDFDA)是一种细胞渗透性荧光探针,用于检测细胞酯酶活性并作为细胞活力指示剂。该化合物是一种非荧光、可透过细胞膜的酯,可被细胞内酯酶水解为荧光产物羧基-2',7'-二氯荧光素 (CDF)。CDF 的荧光强度对 pH 值敏感,可用于测量细胞内 pH 值。 5(6)-CDFDA 广泛用于流式细胞术和荧光显微镜中,以评估细胞活力、酯酶活性和吞噬作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate does not have a specific biological target in the traditional pharmacological sense. Its mechanism of action is chemical and relates to its use as a fluorogenic probe. The compound is a non-fluorescent, membrane-permeable diacetate ester that is hydrolyzed by intracellular esterases to release the fluorescent carboxy-2',7'-dichlorofluorescein (CDF) product. The fluorescence of CDF is dependent on intracellular esterase activity and can also be used to measure intracellular pH due to the pH-sensitivity of CDF fluorescence.
体外研究 (In Vitro)
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯在完整状态下不发荧光。经细胞内酯酶水解后,可转化为具有荧光性的羧基-2',7'-二氯荧光素 (CDF),其激发波长和发射波长分别约为 495 nm 和 520 nm。荧光强度与细胞内酯酶活性成正比,也可用于指示细胞活力。该化合物不具有药理活性,其用途是作为细胞生物学研究中的荧光探针。
体内研究 (In Vivo)
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯不具有体内药理活性。它是一种荧光探针,主要用于体外和离体研究,以评估细胞活力、酯酶活性和吞噬作用。该化合物可用于流式细胞术或荧光显微镜分析从动物模型中分离的细胞,但这仅用于研究目的,不可用于治疗评估。
酶活实验
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯可用作非细胞检测中的荧光探针,用于测定酯酶活性。在典型的检测中,将该化合物溶解于合适的缓冲液中,并加入酯酶(例如,猪肝来源的酯酶)。使用荧光分光光度计或荧光微孔板读数仪,在激发波长495 nm和发射波长520 nm下,通过测量荧光强度随时间的变化来监测化合物的水解情况。
细胞实验
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯的体外细胞检测通常包括用探针加载细胞,以评估酯酶活性、细胞活力或吞噬作用。细胞与浓度为1-10 μM的化合物孵育15-60分钟。非荧光性的二乙酸酯进入细胞后,被细胞内酯酶水解为荧光产物CDF。荧光强度可通过流式细胞术或荧光显微镜进行测量。在吞噬作用检测中,荧光标记的颗粒与CDFDA联用,以区分吞噬细胞和非吞噬细胞。
动物实验
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯不用于体内动物实验中的治疗或药理学用途。其应用仅限于对从动物体内采集的细胞进行离体分析。例如,可对从血液、组织或肿瘤中分离的细胞进行CDFDA染色,并通过流式细胞术分析细胞活力、酯酶活性或吞噬功能。
药代性质 (ADME/PK)
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯并非药物,也不具有药代动力学性质。其物理化学性质更为重要:它是一种荧光探针,分子量为529.28,分子式为C₂₅H₁₄Cl₂O₉。该化合物可溶于DMSO,通常配制成DMSO储备液,用于添加到水性缓冲液或细胞培养基中。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯的具体毒理学数据在标准产品信息中并未详尽列出。作为一种研究用化学品,应按照标准实验室防护措施进行操作,避免吸入、摄入和皮肤接触。该化合物不适用于人体。在用于细胞染色的浓度范围内(通常为1-10 μM),CDFDA通常被认为毒性较低。
参考文献

[1]. Metal-sulfate induced generation of ROS in human brain cells: detection using an isomeric mixture of 5- and 6-carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate (carboxy-DCFDA) as a cell permeant tracer. Int J Mol Sci. 2012;13(8):9615-26.

其他信息
5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯是一种研究级荧光探针,仅供实验室使用,未获准用于临床。其CAS号为127770-45-0。5(6)-CDFDA的主要应用包括:在流式细胞术和荧光显微镜中评估细胞活力和酯酶活性、测量细胞内pH值以及检测吞噬作用。该化合物是细胞生物学、免疫学和药物研发领域的重要工具。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H14CL2O9
分子量
529.27900
精确质量
528.001
CAS号
127770-45-0
PubChem CID
16211578
外观&性状
Off-white to light yellow solid powder
密度
1.7±0.1 g/cm3
沸点
743.3±60.0 °C at 760 mmHg
熔点
210ºC (dec.)(lit.)
闪点
403.3±32.9 °C
蒸汽压
0.0±2.6 mmHg at 25°C
折射率
1.712
LogP
3.66
tPSA
125.43
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
18
可旋转键数目(RBC)
10
重原子数目
72
分子复杂度/Complexity
1790
定义原子立体中心数目
0
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.8894 mL 9.4468 mL 18.8936 mL
5 mM 0.3779 mL 1.8894 mL 3.7787 mL
10 mM 0.1889 mL 0.9447 mL 1.8894 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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