7-Hydroxycoumarinyl-γ-linolenate

目录号: V43160 纯度: ≥98%
7-Hydroxycoumarinyl-γ-linolenate 是胞质磷脂酶 A2 (cPLA2) 的荧光底物。
7-Hydroxycoumarinyl-γ-linolenate CAS号: 161180-12-7
产品类别: New3
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5mg
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产品描述
7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯是胞质磷脂酶A2 (cPLA2) 的荧光底物。7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯可用于检测cPLA2的酶活性。
7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯是一种合成的荧光底物,属于香豆素酯类,具体而言是7-羟基香豆素(伞形酮)与ω-6脂肪酸γ-亚麻酸(GLA)的酯。其分子式为C27H34O4,分子量为422.56 g/mol。该化合物可用于检测cPLA2的酶活性。7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯仅供研究使用。
生物活性&实验参考方法
靶点
7-Hydroxycoumarinyl-γ-linolenate targets cytosolic phospholipase A2 (cPLA2), an enzyme that hydrolyzes phospholipids at the sn-2 position to release arachidonic acid and other fatty acids. As a fluorogenic substrate, the compound is cleaved by cPLA2, releasing the fluorescent 7-hydroxycoumarin (umbelliferone) moiety. The increase in fluorescence is proportional to cPLA2 activity. This allows for the detection and quantification of cPLA2 enzymatic activity in vitro.
体外研究 (In Vitro)
建议(以下是我们建议的方案,仅供参考,请根据您的具体情况进行调整)。计算 cPLA2α 的活性:1. 将 200 μL 高亲和力混合胶束缓冲液(pH=7.2)超声处理,该缓冲液包含 1,2-O-十四烷基-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DTPC)、Triton X-100、0.3 mM EDTA、1 μM CaCl2 和 300 mM KCl。2. 使用 360 nm 激发波长和 460 nm 发射波长连续监测 7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯的水解。3. 通过荧光光谱法观察 7-羟基香豆素的合成。
在体外,7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯用作荧光底物来监测 cPLA2 的酶活性。该化合物可被cPLA2裂解,释放出荧光性的7-羟基香豆素(伞形酮)部分。通过测量荧光强度的增加来量化cPLA2的活性。该底物可用于酶活性测定,以研究cPLA2的动力学、抑制和调控。该化合物的荧光特性使其适用于cPLA2抑制剂的高通量筛选。
体内研究 (In Vivo)
现有文献中未详细列出7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯的具体体内活性数据。该化合物主要用作体外酶活性测定的研究工具,用于研究cPLA2活性。其潜在的体内应用仅限于离体分析组织样本中的cPLA2活性。该化合物不用作治疗药物。
酶活实验
7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯的体外酶活性测定通常包括将底物与cPLA2酶在合适的缓冲液中孵育。该化合物溶解于DMSO中,并用测定缓冲液稀释至工作浓度。加入酶启动反应,并使用荧光酶标仪测量荧光强度随时间的变化,激发波长约为320-360 nm,发射波长约为450-460 nm(伞形酮的典型值)。荧光强度的增加与cPLA2活性成正比。该测定方法可用于测定酶动力学或筛选抑制剂。
细胞实验
利用7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯进行体外细胞检测,可测定细胞裂解液或完整细胞中的cPLA2活性。细胞裂解后,将裂解液与荧光底物孵育。通过测量荧光强度来量化cPLA2活性。该化合物也可用于研究药物或基因操作对细胞内cPLA2活性的影响。底物通常溶解于DMSO中,并用检测缓冲液或细胞培养基稀释。应评估细胞活力,以确保该化合物在所用浓度下无毒性。
动物实验
现有文献中并未详细描述7-羟基香豆素-γ-亚麻酸酯的具体体内动物实验方案。该化合物主要用作体外酶活性测定的研究工具。虽然该化合物可用于潜在的体内研究,例如给动物注射以研究组织中cPLA2的活性,但此类应用尚未标准化。该化合物的体内应用需要配制给药制剂并验证其在组织样本中的荧光信号。
药代性质 (ADME/PK)
7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯的分子量为422.56 g/mol,分子式为C27H34O4。该化合物是一种合成的荧光底物,属于香豆素酯类。它是7-羟基香豆素(伞形酮)与γ-亚麻酸(GLA)形成的酯。储存时,该化合物应置于-20°C避光保存。它可溶于DMSO和其他有机溶剂。该化合物仅供研究使用。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
现有资料中未提供7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯的具体毒理学数据。作为一种研究用化学品,它仅供实验室使用,不得用于人体。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全预防措施,包括佩戴手套和护目镜。该化合物接触皮肤、眼睛和呼吸道后可能引起刺激。
参考文献

[1]. Bufexamac ameliorates LPS-induced acute lung injury in mice by targeting LTA4H. Sci Rep. 2016 Apr 29;6:25298.

[2]. A continuous fluorescence-based assay for the human high-molecular-weight cytosolic phospholipase A2. Anal Biochem. 1994 Oct;222(1):110-5.

其他信息
7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯是一种香豆素化合物,也是一种十八烷化合物。
7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯(CAS 161180-12-7)是胞质磷脂酶A2 (cPLA2) 的荧光底物。其分子式为C27H34O4,分子量为422.56 g/mol。该化合物是一种合成的荧光底物,属于香豆素酯类,具体而言是7-羟基香豆素(伞形酮)与ω-6脂肪酸γ-亚麻酸 (GLA) 的酯。7-羟基香豆素基-γ-亚麻酸酯可用于检测cPLA2的酶活性。本品仅供研究使用。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C27H34O4
分子量
422.556
精确质量
422.245
CAS号
161180-12-7
PubChem CID
91746434
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
563.5±50.0 °C at 760 mmHg
闪点
279.3±28.5 °C
蒸汽压
0.0±1.5 mmHg at 25°C
折射率
1.540
LogP
7.58
tPSA
56.51
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
15
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
644
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCCC/C=C\C/C=C\C/C=C\CCCCC(=O)OC1=CC2=C(C=C1)C=CC(=O)O2
InChi Key
LPIXSKJJCANUQD-QNEBEIHSSA-N
InChi Code
InChI=1S/C27H34O4/c1-2-3-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-26(28)30-24-20-18-23-19-21-27(29)31-25(23)22-24/h6-7,9-10,12-13,18-22H,2-5,8,11,14-17H2,1H3/b7-6-,10-9-,13-12-
化学名
(2-oxochromen-7-yl) (6Z,9Z,12Z)-octadeca-6,9,12-trienoate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3665 mL 11.8326 mL 23.6653 mL
5 mM 0.4733 mL 2.3665 mL 4.7331 mL
10 mM 0.2367 mL 1.1833 mL 2.3665 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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