| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
| 靶点 |
MTX/methotrexate metabolite; DHFR/dihydrofolate reductase; anticancer
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
与对二氢叶酸还原酶 (DHFR) 亲和力高 100 倍以上的甲氨蝶呤 (MTX) 相比，7-羟基甲氨蝶呤 (7-OHMTX) 的亲和力要低得多 [1]。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
7-羟基甲氨蝶呤（4 mg/kg；静脉注射）的总清除率为 9.6 mL/min·mg，末端半衰期为 97.2 分钟 [1]。在戊巴比妥麻醉的大鼠中，分别静脉注射 4 mg/kg 甲氨蝶呤 (MTX) 或 7-羟基甲氨蝶呤 (7-OH-MTX)，两种药物的药代动力学相似。两种药物的血浆浓度均呈双指数下降，MTX 的末端半衰期为 90.6 分钟，7-OH-MTX 的末端半衰期为 97.2 分钟。总清除率分别为 9.2 和 9.6 ml·kg⁻¹·min⁻¹。MTX 给药后，48.2% 的剂量在 200 分钟内经尿液排出，另有 31.6% 从胆汁中排出； 5.8% 的甲氨蝶呤代谢为 7-羟基甲氨蝶呤 (7-OH-MTX) 并出现在胆汁中。甲氨蝶呤给药后，血浆中代谢物 7-OH-MTX 的浓度低于检测限。注射的 7-OH-MTX 主要经胆汁排泄（占剂量的 72.8%）；仅有 11.2% 可从尿液中回收。甲氨蝶呤和 7-OH-MTX 的理化性质差异或对主动转运系统的亲和力不同，可能是造成这两种化合物排泄途径重要性不同的原因[1]。药代动力学研究设计：本研究采用脑内植入 B-16 黑色素瘤的 C57BL/6 小鼠。研究开始前，在小鼠脑内植入两根微透析导管：一根位于脑肿瘤内，另一根位于侧脑室。在研究当日，将微透析探针插入小鼠体内，并以 1 μL/min 的流速灌注人工脑脊液 (aCSF)。使用已知浓度的甲氨蝶呤 (MTX) 和 7-羟基甲氨蝶呤（均为 20 ng/mL）进行逆向透析技术校准探针，以确定相对回收率。随后，小鼠接受 10 mg/kg 的静脉注射 MTX。在给药后 2 至 360 分钟内，连续采集血样（20 μL）。每隔 15 分钟从每个探针采集微透析样品（15 μL）。血浆和微透析样品均储存在 -80°C 直至分析。[2]
样品分析：使用含有内标物（氨基蝶呤）的甲醇进行蛋白质沉淀，制备血浆样品（10 μL）。将微透析样品（15 μL）与内标溶液混合。两种样品类型均采用经验证的LC/MS/MS方法进行分析。对于微透析样品，在导入质谱仪之前，采用柱切换技术进行在线脱盐和净化。使用m/z 471.0 → 324.2的质谱跃迁监测7-羟基甲氨蝶呤。[2] |
| 酶活实验 |
甲氨蝶呤 (MTX) 是一种广泛用于治疗多种人类癌症（包括原发性中枢神经系统淋巴瘤 (PCNSL)）的抗癌药物。MTX 在 PCNSL 治疗中直接相关的重要药理学特性，例如其在脑肿瘤中的摄取机制，目前尚不明确，但可通过小鼠模型进行研究。为了开展此类临床前药理学研究，需要一种快速灵敏的液相色谱-串联质谱 (LC/MS/MS) 方法来测定血浆、脑肿瘤微透析液和脑脊液 (CSF) 样本中的 MTX 及其代谢物 7-羟基甲氨蝶呤 (7-OH MTX)。血浆检测基于 10 μL 样本，经蛋白质沉淀处理后，可直接注入采用正离子电喷雾电离的 LC/MS/MS 系统进行分析。采用柱切换技术对脑组织微透析液样品进行脱盐和净化。该方法已在脑肿瘤和脑脊液的血浆和微透析液样品中对甲氨蝶呤（MTX）和7-羟基甲氨蝶呤（7-OH MTX）进行了验证，在血浆中MTX和7-OH MTX的定量下限（LLOQ）分别为3.7 ng/ml和7.4 ng/ml，在微透析液样品中MTX和7-OH MTX的定量下限均为0.7 ng/ml。通过评估清醒小鼠体内MTX和7-OH MTX的药代动力学（PK）和脑分布特性，验证了该方法的实用性。该方法具有样品用量少、净化速度快、可同时测定血浆和脑组织中MTX和7-OH MTX的优点，从而可以对单个小鼠进行详细的PK研究[2]。
|
| 动物实验 |
动物/疾病模型：雄性Wistar大鼠（270-440 g）[1]
剂量：4 mg/kg（药代动力学/PK/PK分析） 给药途径：静脉注射 (iv) 实验结果：末端半衰期为97.2分钟，总清除率为9.6 mL/min·mg·hr。药代动力学研究设计：**本研究使用脑内植入B-16黑色素瘤的C57BL/6小鼠。研究前植入两根微透析引导套管：一根位于脑肿瘤内，另一根位于侧脑室。研究当天，插入微透析探针，并以1 μL/min的流速灌注人工脑脊液 (aCSF)。使用已知浓度的甲氨蝶呤 (MTX) 和 7-羟基甲氨蝶呤（均为 20 ng/mL）通过逆向透析技术校准探针，以确定相对回收率。随后，小鼠接受 10 mg/kg 的 MTX 静脉推注剂量。在给药后 2 至 360 分钟内，连续采集血样（20 μL）。每隔 15 分钟从每个探针采集微透析样品（15 μL）。血浆和微透析样品均储存在 -80°C 直至分析。[2] * **样品分析：** 血浆样品（10 μL）通过含内标（氨基蝶呤）的甲醇进行蛋白质沉淀制备。微透析样品（15 μL）与内标溶液混合。两种样品均采用经验证的 LC/MS/MS 方法进行分析。对于微透析样品，在导入质谱仪之前，采用柱切换技术进行在线脱盐和净化。使用质谱跃迁 m/z 471.0 → 324.2 监测 7-羟基甲氨蝶呤。[2] 药代动力学研究设计：使用脑内植入 B-16 黑色素瘤的 C57BL/6 小鼠。研究前植入两根微透析引导套管：一根位于脑肿瘤内，另一根位于侧脑室。研究当天，插入微透析探针，并以 1 μL/min 的流速用人工脑脊液 (aCSF) 灌注。使用已知浓度的甲氨蝶呤 (MTX) 和 7-羟基甲氨蝶呤（均为 20 ng/mL）进行逆向透析技术校准探针，以确定相对回收率。随后，小鼠接受10 mg/kg的甲氨蝶呤（MTX）静脉推注。给药后2至360分钟采集系列血样（20 μL）。每隔15分钟从每个探针采集微透析样品（15 μL）。血浆和微透析样品均储存于-80°C直至分析。[2] 样品分析：血浆样品（10 μL）采用含内标（氨基蝶呤）的甲醇进行蛋白质沉淀制备。微透析样品（15 μL）与内标溶液混合。两种样品均采用经验证的LC/MS/MS方法进行分析。对于微透析样品，在导入质谱仪之前，采用柱切换技术进行在线脱盐和净化。使用m/z 471.0 → 324.2的质谱跃迁监测7-羟基甲氨蝶呤。[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
7-羟基甲氨蝶呤是甲氨蝶呤 (MTX) 的主要代谢产物。[2]
小鼠静脉注射 MTX (10 mg/kg) 后，对血浆、脑肿瘤间质液和脑脊液中的 7-羟基甲氨蝶呤进行定量分析。通过测量其浓度随时间的变化，揭示了其生成和分布情况。[2] 脑肿瘤和脑脊液中 7-羟基甲氨蝶呤的浓度均低于母体药物 MTX。[2] 采用液相色谱-串联质谱法 (LC/MS/MS) 定量分析小鼠血浆中的 7-羟基甲氨蝶呤，浓度范围为 2.6 - 2055 ng/mL，定量下限 (LLOQ) 为 7.4 ng/mL。在微透析样本（人工脑脊液）中，该方法的验证范围为 0.26 - 402 ng/mL，定量下限为 0.7 ng/mL。[2] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
甲氨蝶呤 (MTX) 是一种广泛用于治疗多种人类癌症（包括原发性中枢神经系统淋巴瘤 (PCNSL)）的抗癌药物。MTX 与 PCNSL 治疗直接相关的重要药理特性，例如其在脑肿瘤中的摄取机制，目前尚不清楚，但可利用小鼠模型进行研究。为了开展此类临床前药理学研究，需要一种快速灵敏的液相色谱-串联质谱 (LC/MS/MS) 方法来测定血浆、脑肿瘤微透析液和脑脊液 (CSF) 样本中的 MTX 及其代谢物 7-羟基甲蝶呤 (7-OH MTX)。血浆检测基于 10 μL 样本，经蛋白质沉淀后，可直接注入 LC/MS/MS 系统，采用正离子电喷雾电离进行分析。脑组织微透析液样本则采用柱切换技术进行脱盐和纯化。本方法已验证可用于测定血浆、脑肿瘤微透析液和脑脊液样本中的甲氨蝶呤 (MTX) 和 7-羟基甲氨蝶呤 (7-OH MTX)。血浆中 MTX 和 7-OH MTX 的定量限 (LLOQ) 分别为 3.7 ng/ml 和 7.4 ng/ml，微透析液样本中 MTX 和 7-OH MTX 的定量限均为 0.7 ng/ml。通过评估清醒小鼠体内 MTX 和 7-OH MTX 的药代动力学 (PK) 和脑组织分布特征，验证了本方法的实用性。本方法具有样本量小、纯化速度快、可同时测定血浆和脑组织中 MTX 和 7-OH MTX 等优点，因此能够在一只小鼠体内进行详细的药代动力学研究。 [2] 7-羟基甲氨蝶呤是抗叶酸药物甲氨蝶呤的7-羟基代谢物。其化学结构如图1B所示。在药代动力学研究中，监测7-羟基甲氨蝶呤有助于了解甲氨蝶呤的体内分布和代谢。[2] 我们开发并验证了一种灵敏且特异的液相色谱-串联质谱（LC/MS/MS）方法，用于同时测定小体积小鼠血浆和脑微透析样品中的甲氨蝶呤和7-羟基甲氨蝶呤。该方法能够对单个小鼠进行详细的药代动力学研究，从而表征母体药物及其代谢物在中枢神经系统中的分布。[2] 微透析样品中7-羟基甲氨蝶呤的分析方法采用了柱切换技术，以去除人工脑脊液（aCSF）中的非挥发性盐，否则这些盐会干扰LC/MS/MS分析。评估了矩阵效应，发现其影响极小，证实了该方法的可靠性。[2]
|
| 分子式 |
C20H22N8O6
|
|---|---|
| 分子量 |
470.43868303299
|
| 精确质量 |
470.166
|
| 元素分析 |
C, 51.06; H, 4.71; N, 23.82; O, 20.40
|
| CAS号 |
5939-37-7
|
| 相关CAS号 |
7-Hydroxymethotrexate-d3 sodium;7-Hydroxymethotrexate-d3;432545-62-5;7-Hydroxymethotrexate-d3 ammonium
|
| PubChem CID |
5484402
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| 密度 |
1.68g/cm3
|
| 熔点 |
230ºC dec.
|
| 折射率 |
1.76
|
| LogP |
1.527
|
| tPSA |
230.77
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
830
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
OC([C@H](CCC(=O)O)NC(C1C=CC(=CC=1)N(C)CC1C(NC2=C(C(N)=NC(N)=N2)N=1)=O)=O)=O
|
| InChi Key |
HODZDDDNGRLGSI-NSHDSACASA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C20H22N8O6/c1-28(8-12-18(32)26-16-14(23-12)15(21)25-20(22)27-16)10-4-2-9(3-5-10)17(31)24-11(19(33)34)6-7-13(29)30/h2-5,11H,6-8H2,1H3,(H,24,31)(H,29,30)(H,33,34)(H5,21,22,25,26,27,32)/t11-/m0/s1
|
| 化学名 |
(2S)-2-[[4-[(2,4-diamino-7-oxo-8H-pteridin-6-yl)methyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid
|
| 别名 |
NSC-380963; 7-Hydroxymethotrexate; NSC380963; 7-Hydroxymethotrexate; 5939-37-7; 7-Hydroxy Methotrexate; 7-Hydroxymethotrexat; X019Z9S1DL; (S)-2-(4-(((2,4-Diamino-7-oxo-7,8-dihydropteridin-6-yl)methyl)(methyl)amino)benzamido)pentanedioic acid; NSC 380962; Glutamic acid, N-(p-(((2,4-diamino-7-hydroxy-6-pteridinyl)methyl)methylamino)benzoyl)-; NSC 380963
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1257 mL | 10.6283 mL | 21.2567 mL | |
| 5 mM | 0.4251 mL | 2.1257 mL | 4.2513 mL | |
| 10 mM | 0.2126 mL | 1.0628 mL | 2.1257 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT03852888 | COMPLETED | Biological: Urine samples taken to measure methotrexate and its major metabolite 7-OH-methotrexate level |
Rheumatoid ArthritisRheumatoid Arthritis | CHU de Reims | 2018-11-14 | Not Applicable |
| NCT01884636 | COMPLETED | Drug: isavuconazole Drug: methotrexate |
Healthy Subjects Pharmacokinetics of 7-hydroxymethotrexate Pharmacokinetics of Isavuconazole Pharmacokinetics of Methotrexate |
Astellas Pharma Global Development, Inc. | 2013-02 | Phase 1 |
| NCT02867306 | COMPLETED | Drug: ASP1707 Drug: methotrexate (MTX) |
Rheumatoid Arthritis | Astellas Pharma Global Development, Inc. | 2016-07-25 | Phase 1 |
| NCT00847886 | COMPLETEDWITH RESULTS | Drug: LX3305 Drug: LX3305 Placebo Drug: Methotrexate |
Rheumatoid Arthritis | Lexicon Pharmaceuticals | 2009-02 | Phase 1 |
| NCT00920608 | WITHDRAWN | Drug: AZD9056 Drug: Methotrexate |
Rheumatoid Arthritis | AstraZeneca | 2009-05 | Phase 1 |
|
|
|
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
