9-CP-Ade Mesylate

别名: 9-CP-Ade Mesylate 9CPAde Mesylate 9 CP Ade Mesylate 9-环戊基氨基嘌呤; 9-环戊基-9H-嘌呤-6-胺甲烷磺酸酯(1:1)
目录号: V5689 纯度: ≥98%
9-Cyclopentyladenine monomethylsulfonate (9-CP-Ade mesylate) 是一种稳定的、非竞争性的、细胞穿透/可渗透的腺苷酸环化酶抑制剂。
9-CP-Ade Mesylate CAS号: 189639-09-6
产品类别: New1
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产品描述
9-Cyclopentyladenine monomethylsulfonate (9-CP-Ade mesylate) 是一种稳定的、非竞争性的、细胞穿透/可渗透的腺苷酸环化酶抑制剂。
生物活性&实验参考方法
靶点
9-Cyclopentyladenine (CPA) is an adenylyl cyclase inhibitor. [1]
体外研究 (In Vitro)
9-环戊基腺嘌呤单甲磺酸盐(200 μM,30 分钟)完全阻止 PC12 细胞中的神经发生并抑制 cAMP 反应元件结合色素 (CREB) 的激活 [1]。在雌性 CD1 Swiss 小鼠的回肠中,9-环戊基腺嘌呤单甲磺酸盐(100 μM,30 分钟)对机械松弛素活性和抑制机械松弛素诱导的超敏反应的影响[2]。在无毛小鼠中,9-环戊基腺嘌呤单甲磺酸盐(100 μM,6 小时)刺激 cAMP 产生,有助于修复导管形成细胞通透性屏障 [3]。
9-Cyclopentyladenine (CPA) 在浓度为 200 μM 时,显著降低了 Militarinone A (MILI A) 在 PC12 细胞中诱导的转录因子 CREB 的活化,该结果通过使用针对 CREB (Ser133) 的磷酸化特异性抗体的 Western blot 分析得到验证。 [1]
9-Cyclopentyladenine (CPA) 在 200 μM 浓度下完全阻断了 MILI A 在 NGF 预处理的 PC12 细胞中诱导的神经突生长,通过相差显微镜观察证实。 [1]
在与分离的 PC12 细胞膜进行的实验中,MILI A 未显示出对腺苷酸环化酶活性的直接激活作用,这与已知的腺苷酸环化酶激活剂 forskolin 形成对比。 [1]
酶活实验
通过检测分离的 PC12 细胞膜中腺苷酸环化酶的活性,评估 MILI A 是否直接激活该酶。细胞膜从 PC12 细胞制备,在 MILI A 或阳性对照 forskolin 存在下测量腺苷酸环化酶活性。实验未显示 MILI A 对腺苷酸环化酶有激活作用,提示 MILI A 对 cAMP 水平的影响可能是间接的,可能通过膜相互作用实现。 [1]
细胞实验
PC12 细胞先用 NGF (50 ng/ml) 在血清饥饿条件(1% 马血清,0.5% 胎牛血清)下预处理 4 天,以增强 TrkA 受体密度和敏感性。然后将预处理的细胞接种在胶原包被的 24 孔板中。培养 2 小时后,细胞先用 9-Cyclopentyladenine (CPA) (200 μM) 预处理 30 分钟,然后加入 MILI A (40 μM) 处理 16–24 小时。通过相差显微镜评估神经突生长。CPA 完全抑制了 MILI A 诱导的神经突形成,而仅用 MILI A 处理的对照细胞显示出显著的神经突生长。 [1]
通过 Western blot 分析评估 CREB 的磷酸化状态。PC12 细胞血清饥饿过夜,用 CPA (200 μM) 预处理 30 分钟,然后暴露于 MILI A (10 或 40 μM) 30 分钟或 24 小时。裂解细胞后,等量蛋白质进行 SDS-PAGE 分离,转印至 PVDF 膜,并用针对 CREB (Ser133) 的磷酸化特异性抗体进行检测。CPA 适度降低了 MILI A 诱导的 CREB 磷酸化。 [1]
动物实验
实验采用8至12周龄的CD1瑞士品系雌性小鼠。小鼠饲养于12小时光照/12小时黑暗循环、恒温21±1℃的环境中,喂以标准实验室饲料。适应环境一周后,通过阴道涂片细胞学检查确定小鼠的动情周期,仅使用处于动情前期或动情期(雌激素优势期)的小鼠。小鼠采用颈椎脱臼法处死。打开腹腔,取出回肠末端(距回盲瓣30 mm以内),并用生理盐水清洗。进行机械实验时,将长度为10 mm的回肠段置于盛有Krebs-Henseleit溶液(通入95% O₂/5% CO₂混合气体,温度维持在37±0.5℃)的器官浴槽中,初始张力为1.5 g。记录等长张力。在电生理实验中,通过分离黏膜和黏膜下层制备回肠条,并将平滑肌层固定在记录室中以便进行微电极穿刺。9-环戊基腺嘌呤甲磺酸盐溶解后,最终浴液浓度为100 µmol/L。[2]
参考文献

[1]. Militarinone A induces differentiation in PC12 cells via MAP and Akt kinase signal transduction pathways. FEBS Lett. 2004 Nov 19;577(3):455-9.

[2]. Relaxin influences ileal muscular activity through a dual signaling pathway in mice. World J Gastroenterol. 2018 Feb 28;24(8):882-893.

[3]. Association of cyclic adenosine monophosphate with permeability barrier homeostasis of murine skin. J Invest Dermatol. 2004 Jan;122(1):140-6.

其他信息
9-环戊基腺嘌呤 (CPA) 是一种药理学工具,用于在细胞研究中抑制腺苷酸环化酶的活性。[1] 在 MILI A 诱导的 PC12 细胞神经突生成过程中,CPA 的抑制作用表明 cAMP 水平升高和腺苷酸环化酶活性可能参与神经突生成信号通路,其机制可能是通过腺苷受体偶联调节或间接的膜效应。[1] 尽管 CPA 仅适度降低了 CREB 磷酸化水平,但它却完全阻断了神经突的生长,这表明 cAMP 依赖性通路对于 MILI A 诱导的分化至关重要,且独立于 ERK 和 PI3K 通路。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C11H17N5O3S
分子量
299.34
精确质量
299.105
CAS号
189639-09-6
PubChem CID
6604076
外观&性状
White to off-white solid powder
沸点
440.5ºC at 760 mmHg
熔点
180-183ºC(lit.)
闪点
220.2ºC
蒸汽压
5.85E-08mmHg at 25°C
LogP
2.689
tPSA
132.37
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
20
分子复杂度/Complexity
320
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
AJMDRSJHCYQPQI-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C10H13N5.CH4O3S/c11-9-8-10(13-5-12-9)15(6-14-8)7-3-1-2-4-7;1-5(2,3)4/h5-7H,1-4H2,(H2,11,12,13);1H3,(H,2,3,4)
化学名
9-cyclopentylpurin-6-amine;methanesulfonic acid
别名
9-CP-Ade Mesylate 9CPAde Mesylate 9 CP Ade Mesylate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~41.67 mg/mL (~139.20 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.3407 mL 16.7034 mL 33.4068 mL
5 mM 0.6681 mL 3.3407 mL 6.6814 mL
10 mM 0.3341 mL 1.6703 mL 3.3407 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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