Butyzamide

别名: Butyzamide; 1110767-45-7; (E)-3-(2,6-Dichloro-4-((4-(3-(2,2-dimethyl-1-propoxypropyl)-2-methoxyphenyl)thiazol-2-yl)carbamoyl)phenyl)-2-methylacrylic acid; SCHEMBL3059522; SCHEMBL3059524; (2E)-3-[2,6-二氯-4-[[4-[3-(2,2-二甲基-1-丙氧基丙基)-2-甲氧基苯基]-2-噻唑基]氨基]苯基]-2-甲基-2-丙烯酸;激活血小板生成素 (TPO) 受体Mpl,刺激造血干细胞增殖
目录号: V51526 纯度: =100%
Butyzamide是一种新型Mpl激活剂。
Butyzamide CAS号: 1110767-45-7
产品类别: JAK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
500μg
1mg
5mg
10mg
25mg
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纯度/质量控制文件

纯度: =100%

产品描述
Butyzamide是一种新型Mpl激活剂,可升高 JAK2、STAT3、STAT5 和 MAPK 的磷酸化水平。 Mpl是一种血小板生成素 (TPO) 受体。
生物活性&实验参考方法
靶点
JAK2; STAT3/5
体外研究 (In Vitro)
在 Ba/F3-hMpl 细胞中,Butyzamide(3 μM;15 分钟)磷酸化 JAK2、STAT3、STAT5 和 MAPK [1]。Butyzamide(3 μM;48 小时)刺激人 CD34+ 造血祖细胞产生多倍体巨核细胞和形成集落形成单位的巨核细胞 [1]。
体内研究 (In Vivo)
Butyzamide(10 mg/kg、50 mg/kg;侧向;每日一次,持续 20 天)可提高植入人胎肝源性 CD34+ 细胞的 NOG 的人类预期水平 [1]。
Butyzamide增加FL-CD34+移植NOG小鼠血小板[1]
为了评估Butyzamide在体内产生人血小板的能力,我们将FL-CD34细胞移植到没有淋巴细胞或自然杀伤细胞、补体活性低的免疫缺陷NOG小鼠体内一些研究者已经使用NOG小鼠来分析干细胞、肥大细胞和巨核细胞的造血功能,因为人类细胞在NOG小鼠中的植入率高于NOD/SCID小鼠。26,29当Butyzamide胺以10或50 mg/kg的剂量给予移植了flcd34细胞的NOG小鼠,每天一次,持续20天,它增加了人血小板的数量,但不影响小鼠血小板的数量(图4A, B)。在人血小板增加之前,经噻唑橙染色的网状人CD41血小板也被Butyzamide增加了(图4C)。Butyzamide治疗21 d后处死小鼠,冲洗股骨收集骨髓细胞。Butyzamide能增加骨髓中人CD41巨核细胞的数量(图4D)。另一侧股骨用抗人CD42b抗体染色,石蜡切片可见人巨核细胞(图4E)。与对照组相比,Butyzamide处理增加了人CD42b细胞,这表明Butyzamide刺激了人巨核细胞在体内的增殖和成熟。这些数据表明,口服Butyzamide可有效增加体内人类血小板的数量。[1]
酶活实验
为了建立Ba/F3-hMpl、Ba/F3-mMpl和Ba/F3-h Mpl(H499L)细胞,通过电穿孔用每个构建的质粒转染Ba/F3细胞。在2mg/mL遗传素存在下,通过限制性稀释法克隆细胞。为了建立Ba/F3 mMpl(L490H)细胞,根据制造商的方案,通过Fugene 6用pQCXIP mMpl和pVSV-G载体(Invitrogen)转染293GP2包装细胞。收集培养上清液并用于感染Ba/F3细胞。这些建立的稳定细胞系对rmIL-3以及亲代Ba/F3细胞产生反应而增殖,并似乎保持了亲代Ba/F3细胞的特性[1]。
细胞实验
细胞在96孔板中以7.5×10个细胞/200μL的密度培养,并加入不同浓度的Butyzamide或重组细胞因子。将平板在37°C、含5%CO2的加湿室中孵育48小时,并在培养的最后4小时向每个孔中添加10μL WST-8试剂。使用680 型96孔微孔板读取器在450nm的波长下测量吸光度。[1]
人骨髓源性CD34+细胞的液体培养[1]
人骨髓来源的CD34细胞在24孔板中以5.0×10细胞/mL的密度培养。作为无血清培养基,我们使用Iscove改良的Dulbecco培养基,添加20% BIT9500。细胞分别用1 nM rhTPO或3 μMButyzamide处理3次,37°C, 5% CO2加湿室处理10天。
动物实验
将8-10周龄的免疫缺陷型NOD/Shi-scid,IL-2Rγ (NOG)小鼠用MBR-1520R-3(日本日立医疗株式会社,东京)进行2.4 Gy(125 kV,10 mA,0.45 Gy/min)的照射,次日静脉注射6.7×10⁶个人胎肝(FL)来源的CD34⁺细胞。移植两个月后,根据人血小板计数和体重,将NOG小鼠随机分为三组。分别口服给予赋形剂或丁酰酰胺(剂量分别为10 mg/kg和50 mg/kg),持续21天。人血小板和巨核细胞计数按以下方法计算[1]。
参考文献

[1]. The effect of a novel, small non-peptidyl molecule butyzamide on human thrombopoietin receptor and megakaryopoiesis. Haematologica. 2008 Oct;93(10):1495-504.

其他信息
背景:血小板减少症是癌症及其他造血细胞疾病患者治疗中常见的并发症。既往临床试验表明,聚乙二醇(PEG)偶联的重组人巨核细胞生长发育因子(rHMGF)可提高特发性血小板减少性紫癜和接受化疗的实体瘤患者的血小板计数。然而,健康志愿者和接受化疗的患者体内会产生针对PEG偶联的rHMGF的抗体,这些抗体与内源性血小板生成素发生交叉反应。因此,聚乙二醇偶联重组人巨核细胞生长发育因子的临床开发于1998年终止。本研究旨在寻找一种口服生物利用度高且不会产生针对内源性血小板生成素自身抗体的Mpl激活剂。[1]
设计和方法:我们筛选了化合物库,并合成了一种新型非肽类血小板生成素受体Mpl激活剂,命名为butyzamide。我们使用表达Mpl的Ba/F3细胞和人造血干细胞,在体外评估了butyzamide对巨核细胞生成的影响。为了评估其体内效应,我们向移植了人胎肝来源的CD34(+)细胞的免疫缺陷型NOD/Shi-scid,IL-2R γ(null) (NOG)小鼠口服给予丁酰胺,并研究了人血小板的生成。[1]
结果:丁酰胺特异性地与人Mpl反应,并激活与血小板生成素相同的信号转导通路。然而,与血小板生成素不同,丁酰胺不与鼠Mpl反应,并且其激动活性需要Mpl跨膜结构域中的组氨酸残基。丁酰胺可诱导人CD34(+)造血祖细胞分化为集落形成单位-巨核细胞和多倍体巨核细胞,其作用与血小板生成素相当。当以 10 和 50 mg/kg 的剂量口服丁酰胺,连续 20 天给予移植了人胎肝来源 CD34(+) 细胞的 NOG 小鼠时,人血小板计数分别增加了 6.2 倍和 22.9 倍。[1]
结论:丁酰胺是一种口服生物利用度高的 Mpl 激活剂,具有作为血小板减少症治疗药物的临床开发潜力。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C29H32CL2N2O5S
精确质量
590.14
CAS号
1110767-45-7
PubChem CID
44602781
外观&性状
White to off-white solid
LogP
7.6
tPSA
126Ų
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
11
重原子数目
39
分子复杂度/Complexity
857
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CCCOC(C1=CC=CC(=C1OC)C2=CSC(=N2)NC(=O)C3=CC(=C(C(=C3)Cl)/C=C(\C)/C(=O)O)Cl)C(C)(C)C
InChi Key
BBEZGQPYGPBSLA-FOWTUZBSSA-N
InChi Code
InChI=1S/C29H32Cl2N2O5S/c1-7-11-38-25(29(3,4)5)19-10-8-9-18(24(19)37-6)23-15-39-28(32-23)33-26(34)17-13-21(30)20(22(31)14-17)12-16(2)27(35)36/h8-10,12-15,25H,7,11H2,1-6H3,(H,35,36)(H,32,33,34)/b16-12+
化学名
(E)-3-[2,6-dichloro-4-[[4-[3-(2,2-dimethyl-1-propoxypropyl)-2-methoxyphenyl]-1,3-thiazol-2-yl]carbamoyl]phenyl]-2-methylprop-2-enoic acid
别名
Butyzamide; 1110767-45-7; (E)-3-(2,6-Dichloro-4-((4-(3-(2,2-dimethyl-1-propoxypropyl)-2-methoxyphenyl)thiazol-2-yl)carbamoyl)phenyl)-2-methylacrylic acid; SCHEMBL3059522; SCHEMBL3059524;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~100 mg/mL (~169.05 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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