| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
HIV-1; Claficapavir (A1752) primarily targets HIV-1 nucleocapsid protein (NC), with a dissociation constant (Kd) of around 20 nM detected by SPR assay, showing high binding affinity
This compound has almost no inhibitory effect on HIV-1 reverse transcriptase (RT) and integrase (IN), and these two enzymes are not its functional targets [1]. Claficapavir targets the HIV-1 nucleocapsid protein (NC). It binds strongly to HIV-1 NC with a dissociation constant (Kd) of 20 nM. The compound inhibits the chaperone properties of NC, which are essential for viral replication. By binding to NC, Claficapavir interferes with correct Gag processing and blocks particular chaperone functions such as Psi RNA dimerization and cTAR DNA destabilization. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
克拉菲卡帕韦直接与 HIV-1 NC 结合，干扰 Gag 的正确加工，并阻断 NC 的特定分子伴侣功能，例如 Psi RNA 二聚化和互补反式激活反应元件 (cTAR) DNA 不稳定化[1]。
1. 抗 HIV 活性测定：在感染 HIV-1 NL4-3/EGFP 株的 MT-4 细胞中，克拉菲卡帕韦 (A1752) 剂量依赖性地抑制病毒复制。通过 p24 ELISA 测定，IC50 值为 1.0–2.0 μM，其抗病毒效力与替诺福韦相当 [1] 2. 细胞毒性试验：该化合物在浓度高达 50 μM 时未显示明显的细胞毒性，其 CC50 值远高于 50 μM，具有良好的治疗指数 [1] 3. 靶标结合试验：SPR 和固有色氨酸荧光猝灭试验证实，该化合物以剂量依赖的方式与 HIV-1 NC 结合，Kd 值约为 20 nM [1] 4. NC 分子伴侣功能抑制：该化合物以剂量依赖的方式抑制 NC 介导的 Psi RNA 二聚化和 NC-Psi RNA 复合物的形成。它还能阻止 NC 诱导的 cTAR DNA 不稳定，而传统抑制剂 DIBA 和 SAMT 对此过程的影响很小 [1] 5. 病毒感染性测定：药物处理后产生的子代病毒显示出感染性显著降低。在 1 μM 浓度下，早期逆转录产物 (-)ssDNA 的合成被抑制 60%，在 5 μM 浓度下抑制率接近 90% [1] 6. Gag 加工实验：该化合物破坏 Gag 多聚蛋白的正常切割，导致异常蛋白（如 30 kD CA-NC 和 CA-SP1）的积累，从而阻碍病毒成熟 [1] 7. 病毒核心稳定性实验：该化合物导致病毒核心过度稳定，并阻断病毒脱壳，从而中断后续的逆转录过程 [1] 8. 加入时间实验：该实验证实，该化合物作用于 HIV 复制的后期阶段，包括病毒组装和成熟，这与洛匹那韦和 SAMT 的作用一致 [1] 体外实验表明，克拉菲卡帕韦对HIV-1具有强效抗病毒活性，IC50值约为1 uM。该化合物能以高亲和力（Kd = 20 nM）直接与HIV-1核衣壳蛋白（NC）结合，抑制其分子伴侣功能。克拉菲卡帕韦干扰Gag蛋白的正确加工，并阻断NC介导的功能，包括Psi RNA二聚化和互补转录激活反应元件（cTAR）DNA的去稳定化。细胞HIV-1复制实验证实了其抗病毒功效。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
克拉菲卡韦的体内活性数据有限。作为一种核衣壳抑制剂，它在HIV-1感染的动物模型中具有潜在的抗病毒功效。然而，HIV-1无法感染普通啮齿动物，因此体内评估仅限于人源化小鼠或非人灵长类动物等特殊模型。该化合物具有很强的结合亲和力（Kd = 20 nM）和抗病毒活性，提示其具有潜在的体内疗效，但已发表的体内数据十分匮乏。
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| 酶活实验 |
1. 表面等离子共振 (SPR) 结合分析：将纯化的 HIV-1 NC 蛋白固定在传感器芯片上。配制含有系列稀释的克拉菲卡韦 (A1752) 的运行缓冲液，并以恒定流速流过芯片。监测实时结合信号，用 1:1 Langmuir 模型拟合动力学数据，以计算结合亲和力和 Kd 值 [1]
2. 色氨酸荧光猝灭分析：配制含有 5 μM NC 蛋白的检测缓冲液，然后加入梯度浓度的待测化合物。将激发波长设置为 280 nm，扫描 310 nm 至 450 nm 的荧光发射波长。根据荧光猝灭程度评估化合物与 NC 之间的结合能力 [1] 3. Psi RNA 二聚化和凝胶迁移分析：通过体外转录合成 Psi RNA。将NC蛋白与系列稀释的克拉菲卡帕韦(A1752)预孵育，然后加入变性的Psi RNA进行反应。通过非变性PAGE分离产物，分别用相应的染料对RNA和蛋白进行染色，观察RNA单体、二聚体和蛋白-核酸复合物的条带[1] 4. cTAR DNA去稳定化实验：使用两端分别标记有荧光团和淬灭剂的cTAR DNA。将NC蛋白与不同浓度的测试化合物预孵育，然后加入标记的DNA。设置激发波长为520 nm，发射波长为560 nm，检测荧光信号以评估对NC分子伴侣活性的抑制作用[1] 5. 逆转录酶活性实验：将逆转录酶、模板和引物加入反应体系，然后与梯度浓度的克拉菲卡帕韦(A1752)孵育。通过荧光检测法测定酶活性的变化[1] 6.整合酶活性测定：将整合酶、底物和系列稀释的测试化合物加入反应体系中。采用比色法检测整合酶活性，以判断抑制效果[1] 克拉菲卡韦的体外酶/受体结合试验包括与纯化的HIV-1核衣壳蛋白直接结合的研究。结合亲和力（Kd）采用表面等离子共振（SPR）、等温滴定量热法（ITC）或荧光法测定。化合物抑制核衣壳蛋白分子伴侣功能的能力通过RNA或DNA底物试验进行评估，例如Psi RNA二聚化试验或cTAR DNA去稳定化试验。IC50值由这些功能试验中的剂量-反应曲线确定。 |
| 细胞实验 |
1. 细胞毒性试验：将MT-4细胞接种于96孔板中，并用梯度浓度的克拉菲卡帕韦(A1752)处理5天。加入发光试剂裂解细胞并继续孵育，然后用酶标仪检测发光信号，计算细胞活力和CC50值[1]
2. 抗病毒活性试验：以0.05的MOI感染MT-4细胞中的HIV-1 NL4-3/EGFP，同时加入不同浓度的待测化合物。培养3天后，用ELISA检测细胞上清液中的HIV-1 p24蛋白，以定量病毒增殖，并观察EGFP荧光作为辅助验证[1] 3. 病毒再感染试验：收集药物处理后的细胞上清液，然后进行离心、过滤和浓缩，以获得纯化的子代病毒。取等量的病毒感染新鲜的MT-4细胞。 48小时后，通过流式细胞术检测EGFP阳性细胞的比例，以评估病毒感染性[1] 4. 逆转录产物qPCR检测：用子代病毒感染靶细胞。孵育6小时后提取细胞总DNA，并通过实时定量PCR检测早期逆转录产物(-)ssDNA的水平[1] 5. 病毒RNA Northern印迹检测：病毒感染3小时后提取细胞总RNA，并通过Northern印迹杂交检测细胞内HIV-1基因组RNA[1] 6. 转染实验：用HIV-1前病毒DNA或慢病毒载体转染293FT细胞。转染6小时后，将培养基更换为含有克拉菲卡帕韦(A1752)的培养基。 48小时后，分别检测细胞荧光、上清液p24含量和子代病毒感染性[1] 7. 克隆形成实验：培养感染慢病毒的HT1080细胞。进行药物筛选和结晶紫染色，然后计数细胞克隆以确定病毒滴度[1] 8. 加药时间（TOA）实验：在HIV感染MT-4细胞后的不同时间点加入测试化合物。连续培养24小时，定期收集上清液检测p24含量，以确定化合物在病毒复制周期中的作用阶段[1] 9. Western blot实验：收集病毒颗粒并进行蛋白质变性。通过SDS-PAGE分离蛋白质并转移到膜上。与针对Gag、CA、NC和RT的特异性抗体孵育进行成像，并分析Gag的裂解和病毒蛋白的表达[1] 克拉菲卡韦的体外细胞活性检测采用HIV-1感染的细胞系，例如MT-4、CEM或外周血单核细胞（PBMC）。将细胞感染HIV-1后，用不同浓度的克拉菲卡韦处理3-7天。通过qPCR定量检测HIV-1 p24抗原的产生、逆转录酶活性或病毒RNA水平来评估抗病毒活性。IC50值根据剂量反应曲线计算得出。同时，采用MTT或CellTiter-Glo法评估细胞毒性。 |
| 动物实验 |
克拉菲卡韦的体内动物研究通常会使用感染HIV-1的人源化小鼠模型或感染SHIV的非人灵长类动物进行疗效评估。该化合物将通过口服、静脉注射或腹腔注射途径以不同剂量给药。病毒载量（血浆HIV-1 RNA）和CD4+ T细胞计数将随时间推移进行监测。药代动力学参数将根据血浆浓度-时间曲线确定。抗逆转录病毒药物评估的标准方案将适用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
克拉菲卡韦的药代动力学特性在已发表的文献中尚未得到充分描述。作为一种小分子（分子量约为393.86 g/mol），预计其口服生物利用度中等，且组织穿透性良好。该化合物的logP值为3.9，表明其具有中等亲脂性。诸如半衰期、清除率、分布容积和生物利用度等详细的药代动力学参数需要在合适的动物模型中进行实验测定。该化合物通常溶解于DMSO中进行体外研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞试验证明，浓度高达 50 μM 的 克拉菲卡帕韦 (A1752) 对 MT-4 细胞无明显毒性，其 CC50 远高于 50 μM。文献中尚无该化合物的体内毒性、LD50、血浆蛋白结合率、长期毒性和遗传毒性的记录 [1]。
克拉菲卡韦的毒性数据有限。作为一种靶向HIV-1 NC的研究化合物，它仅供研究使用，不得用于人体治疗。在进行抗病毒活性研究的同时，还需进行多种细胞系的标准体外细胞毒性试验，以确定其治疗指数。临床前开发需要进行动物模型体内耐受性研究。该化合物应按照研究用化学品的标准实验室安全操作规程进行处理。 |
| 参考文献 |
[1]. Identification and characterization of a new type of inhibitor against the human immunodeficiency virus type-1 nucleocapsid protein. Retrovirology. 2015 Nov 6:12:90. doi: 10.1186/s12977-015-0218-9.
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| 其他信息 |
1. 作用机制：克拉菲卡帕韦 (A1752)与HIV-1核衣壳蛋白(NC)具有高亲和力，抑制其核酸伴侣功能，阻断Psi RNA二聚化和cTAR DNA不稳定化。它破坏Gag多聚蛋白的正常切割，形成结构异常的病毒核心，导致病毒脱壳缺陷和逆转录中断。它作用于HIV复制的后期阶段，这与逆转录酶和整合酶抑制剂的作用机制不同[1]
2. 药物优势：它是一种新型功能性HIV-1 NC抑制剂，不同于传统的锌离子释放型NC抑制剂。它具有更高的靶向特异性，避免了早期类似化合物的细胞毒性和脱靶效应。它可以有效产生非感染性病毒颗粒，并且比DIBA、SAMT和其他类似物更有效[1] 3. 研究背景：耐药HIV毒株的不断出现限制了现有抗HIV药物的应用。 HIV-1 NC 是病毒复制所必需的多功能蛋白，也是一个很有前景的新药靶点。该化合物通过基于细胞的模型筛选出来，为抗 HIV 药物研究提供了新的方向 [1] 4. 对照药物：包括替诺福韦、齐多夫定、拉替拉韦、洛匹那韦、DIBA 和 SAMT 在内的经典抗 HIV 药物在所有实验中均用作活性和相位比较的阳性或阴性对照 [1] 克拉菲卡帕韦 (A1752) 是一种特异性核衣壳蛋白抑制剂，对 HIV-1 的 IC50 值约为 1 μM。它能以 20 nM 的解离常数 (Kd) 与 HIV-1 核衣壳蛋白 (NC) 强力结合，抑制其分子伴侣功能。该化合物干扰 Gag 蛋白的正确加工，并阻断 Psi RNA 二聚化和 cTAR DNA 不稳定等功能。它用于 HIV-1 复制研究，并作为抗逆转录病毒药物开发的先导化合物。本品仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C17H12CLNO4S2
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|---|---|
| 分子量 |
393.86448097229
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| 精确质量 |
392.989
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| 元素分析 |
C, 51.84; H, 3.07; Cl, 9.00; N, 3.56; O, 16.25; S, 16.28
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| CAS号 |
2055732-24-4
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| PubChem CID |
1286537
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| LogP |
3.9
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| tPSA |
128
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
589
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1=CC(=CC=C1C2=CC=C(O2)/C=C\3/C(=O)N(C(=S)S3)CCC(=O)O)Cl
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| InChi Key |
YZLFZFALAZYTCI-ZROIWOOFSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H12ClNO4S2/c18-11-3-1-10(2-4-11)13-6-5-12(23-13)9-14-16(22)19(17(24)25-14)8-7-15(20)21/h1-6,9H,7-8H2,(H,20,21)/b14-9-
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| 化学名 |
3-[(5Z)-5-[[5-(4-chlorophenyl)furan-2-yl]methylidene]-4-oxo-2-sulfanylidene-1,3-thiazolidin-3-yl]propanoic acid
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| 别名 |
Claficapavir; A1752; A-1752; A 1752; 2055732-24-4; Claficapavir [INN]; H8ENW8T6SL;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 200 mg/mL (507.79 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5390 mL | 12.6949 mL | 25.3897 mL | |
| 5 mM | 0.5078 mL | 2.5390 mL | 5.0779 mL | |
| 10 mM | 0.2539 mL | 1.2695 mL | 2.5390 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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