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Competence-Stimulating Peptide-2 (CSP-2)

别名: 能力刺激肽-2（CSP-2）
目录号: V53518 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Competence-Stimulated Peptide-2 (CSP-2) 是肺炎链球菌产生的群体感应信号肽。
Competence-Stimulating Peptide-2 (CSP-2) CAS号: 1174553-84-4
产品类别: Bacterial
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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10mg
50mg
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产品描述
感受态刺激肽-2 (CSP-2) 是肺炎链球菌产生的一种群体感应信号肽。ComD2 是感受态刺激肽-2 (CSP-2) 的相容性受体，EC50 为 50.7 nM。
感受态刺激肽-2 (CSP-2) 是由肺炎链球菌产生的一种由17个氨基酸组成的信号肽。它是一种群体感应信号分子，通过与其同源受体ComD2相互作用，调控细菌的多种表型，例如感受态发育、毒力和生物膜形成。CSP-2是研究细菌通讯和种间相互作用的重要工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
ComD2 (histidine kinase receptor of the ComD family). CSP-2 is a quorum-sensing signal peptide that binds to and activates its cognate receptor, ComD2, a membrane-bound histidine kinase. Activation of ComD2 leads to autophosphorylation and subsequent phosphotransfer to the response regulator ComE, which regulates transcription of competence genes (e.g., comX, comW, comCDE operon) and virulence factors. This signaling cascade induces competence development for natural transformation, biofilm formation, and virulence gene expression. CSP-2 is a 17-amino acid peptide: EMRISRIILDFLFLRKK.
体外研究 (In Vitro)
CSP-2 是一种群体感应信号肽，可激活 ComD2 受体。体外实验表明，纳摩尔浓度的 CSP-2 可诱导肺炎链球菌产生感受态，这可通过感受态基因（例如 comX）的表达和转化效率来检测。CSP-2 与其相容性受体 ComD2 的 EC50 值为 50.7 nM。此外，该肽还调控生物膜的形成、对宿主细胞的黏附以及肺炎溶素等毒力因子的产生。
体内研究 (In Vivo)
在体内，CSP-2 是一种关键的信号分子，它使肺炎链球菌能够协调其种群密度依赖性行为，包括定植、生物膜形成和毒力。它参与了从定植到侵袭性疾病的转变过程。在动物模型中，感受态系统促进了鼻腔定植和肺部感染。CSP-2 可用于研究群体感应破坏作为一种抗毒力策略的作用。
酶活实验
CSP-2 可激活 ComD2。对于无细胞受体结合实验，制备表达 ComD2 的肺炎链球菌或 HEK293 细胞的膜组分。将浓度为 0.1-10 nM 的放射性标记 CSP-2（例如，125I 标记或 3H 标记）与膜制备物（50-200 ug 蛋白）在结合缓冲液（25 mM Tris-HCl，pH 7.5，100 mM NaCl，5 mM MgCl2，1 mg/mL BSA）中于 25℃ 孵育 60 分钟。在 10 uM 未标记 CSP-2 存在下测定非特异性结合。通过 GF/B 滤膜快速过滤分离结合的放射性，并用液体闪烁计数器或 γ 计数器计数。根据饱和结合曲线计算解离常数 (Kd) 和最大结合量 (Bmax)。激活的 EC50 (50.7 nM) 通常是在基于细胞的检测中确定的，而不是在无细胞结合检测中确定的。
细胞实验
功能激活实验中，使用含有受comX启动子控制的lux报告基因的肺炎链球菌菌株。将细菌在感受态培养基（CAT培养基）中于37℃培养至对数生长期中期（OD600约为0.2-0.3）。将CSP-2进行系列稀释（0.1 nM-10 uM），并加入细菌培养物中。在37℃孵育30-60分钟后，使用酶标仪测量发光值。通过非线性回归计算ComD2激活的EC50值（EC50 = 50.7 nM）。或者，也可以测定转化效率：将肺炎链球菌用CSP-2（10-100 ng/mL）处理15-20分钟，然后加入1 ug/mL的供体DNA（例如，链霉素抗性标记）。细胞在37℃孵育30-60分钟后，接种于选择性和非选择性培养基上。感受态以转化子数与总活细胞数的比值表示。为研究生物膜形成，将肺炎链球菌接种于聚苯乙烯96孔板中，分别在有或无CSP-2（10-100 nM）的条件下培养。厌氧培养24小时后，用结晶紫染色生物膜，并通过测量590 nm处的吸光度进行定量。
动物实验
在小鼠鼻咽定植模型中，将6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠经鼻内接种10⁷-10⁸ CFU的肺炎链球菌（例如D39或TIGR4菌株），接种液为20-30 μL PBS。在一些实验中，同时或单独给予CSP-2（10-100 μg）以评估其对定植的影响。接种后不同时间点（1、3、5、7天），处死小鼠并收集鼻咽冲洗液。通过系列稀释和血琼脂平板计数法测定细菌载量。为了研究体内感受态的诱导，用肺炎链球菌感染小鼠，并通过RT-qPCR分析鼻咽样本中感受态基因的表达。CSP-2被用作激活感受态的工具，并用于研究其在肺炎链球菌致病机制中的作用。
药代性质 (ADME/PK)
目前尚无药代动力学数据报道。CSP-2 是一种由 17 个氨基酸组成的肽（分子量 2178.69 g/mol），是肺炎链球菌响应菌群密度变化而内源性产生的信号分子。外源性给药的 CSP-2 肽很可能在体内被蛋白酶降解，且半衰期极短（仅几分钟）。它不作为全身用药，而是作为细菌培养或局部感染模型中的研究工具。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
目前尚未有具体的毒性数据报告。CSP-2 是一种由肺炎链球菌产生的肽信号分子，在用于细菌研究的浓度下对哺乳动物细胞无毒性。除研究用途外，不建议将其用于动物或人类。应遵循标准的肽类处理注意事项。
参考文献
[1]. Yifang Yang, et al. Structural Characterization of Competence-Stimulating Peptide Analogues Reveals Key Features for ComD1 and ComD2 Receptor Binding in Streptococcus pneumonia. Biochemistry. 2018 Sep 11;57(36):5359-5369.
其他信息
CSP-2 是一种由 17 个氨基酸组成的肽，序列（单字母）：EMRISRIILDFLFLRKK。分子式为 C101H172N28O23S，分子量为 2178.69。它是肺炎链球菌（肺炎球菌）产生的一种群体感应信号肽。它被用作研究细菌群体感应、感受态发育和毒力调控的科研工具。目前尚未获准用于临床。应以粉末形式在氮气保护下于 -80℃ 保存。纯度：≥98%。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C101H172N28O23S
分子量
2178.6852016449
精确质量
2178.29
CAS号
1174553-84-4
PubChem CID
155514280
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
LogP
-5.2
tPSA
887
氢键供体(HBD)数目
32
氢键受体(HBA)数目
30
可旋转键数目(RBC)
81
重原子数目
153
分子复杂度/Complexity
4420
定义原子立体中心数目
20
SMILES
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N
InChi Key
AQHPEKJLEFLYAT-IPQDWWCBSA-N
InChi Code
InChI=1S/C101H172N28O23S/c1-14-58(10)79(127-86(139)66(37-28-45-112-100(107)108)116-85(138)68(41-47-153-13)114-82(135)63(104)39-40-77(131)132)96(149)126-76(54-130)94(147)118-67(38-29-46-113-101(109)110)87(140)128-81(60(12)16-3)97(150)129-80(59(11)15-2)95(148)125-72(50-57(8)9)90(143)124-75(53-78(133)134)93(146)123-74(52-62-32-21-18-22-33-62)92(145)121-71(49-56(6)7)89(142)122-73(51-61-30-19-17-20-31-61)91(144)120-70(48-55(4)5)88(141)117-65(36-27-44-111-99(105)106)83(136)115-64(34-23-25-42-102)84(137)119-69(98(151)152)35-24-26-43-103/h17-22,30-33,55-60,63-76,79-81,130H,14-16,23-29,34-54,102-104H2,1-13H3,(H,114,135)(H,115,136)(H,116,138)(H,117,141)(H,118,147)(H,119,137)(H,120,144)(H,121,145)(H,122,142)(H,123,146)(H,124,143)(H,125,148)(H,126,149)(H,127,139)(H,128,140)(H,129,150)(H,131,132)(H,133,134)(H,151,152)(H4,105,106,111)(H4,107,108,112)(H4,109,110,113)/t58-,59-,60-,63-,64-,65-,66-,67-,68-,69-,70-,71-,72-,73-,74-,75-,76-,79-,80-,81-/m0/s1
化学名
(2S)-6-amino-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-carboxybutanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.4590 mL 2.2950 mL 4.5899 mL
5 mM 0.0918 mL 0.4590 mL 0.9180 mL
10 mM 0.0459 mL 0.2295 mL 0.4590 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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