(E/Z)-NSAH

别名: SD49-7; J3.555.273A; 2-hydroxy-1-naphthalaldehyde salicyloylhydrazone; ZINC259636; AKOS001601386 2-羟基-1-萘甲醛水杨酰腙
目录号: V55140 纯度: ≥98%
(E/Z)-NSAH 是 NSAH (HY-114503) 的异构体。
(E/Z)-NSAH CAS号: 54009-54-0
产品类别: DNA(RNA) Synthesis
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
(E/Z)-NSAH 是 NSAH (HY-114503) 的异构体。NSAH 是一种竞争性、可逆的非核苷类核糖核苷酸还原酶 (RR) 抑制剂。在无细胞和细胞培养基中,其 IC50 值分别为 32 μM 和约 250 nM。
(E/Z)-NSAH (CAS 54009-54-0) 是 2-羟基-1-萘甲醛水杨酰腙(也称为 SD49-7 或 HNASH)的 E 和 Z 几何异构体的混合物。其分子式为 C18H14N2O3,分子量为 306.32 g/mol。(E/Z)-NSAH 是一种可逆的、竞争性的非核苷类核糖核苷酸还原酶 (RR) 抑制剂,RR 是一种对 DNA 从头合成至关重要的酶。该化合物在无细胞试验和基于细胞的试验中表现出明显不同的抑制效力。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary target of (E/Z)-NSAH is ribonucleotide reductase (RR), the enzyme that catalyzes the conversion of ribonucleoside diphosphates to deoxyribonucleoside diphosphates, which are essential for DNA synthesis and repair. Ribonucleotide reductase is a validated target for anticancer and antiviral therapies. (E/Z)-NSAH functions as a non-nucleoside inhibitor that binds reversibly and competitively to the enzyme. The compound's mixed E/Z geometric isomer form may influence its binding affinity and selectivity for the RR enzyme.
体外研究 (In Vitro)
在无细胞酶活性测定中,(E/Z)-NSAH 对核糖核苷酸还原酶的抑制作用 IC50 为 32 μM。该活性代表了该化合物在无细胞摄取或代谢障碍的情况下对纯化酶的直接抑制作用。无细胞 IC50 值显著高于细胞内 IC50 值,表明该化合物在细胞环境中可能更有效。该化合物是一种竞争性抑制剂,提示其与天然底物竞争结合酶的活性位点。
体内研究 (In Vivo)
在基于细胞的实验中,(E/Z)-NSAH 对核糖核苷酸还原酶活性的抑制作用 IC50 值约为 250 nM,远高于其在无细胞体系中的 IC50 值 32 μM。这种差异表明该化合物可能在细胞内主动积累,或者细胞代谢将其转化为活性更高的形式。通过抑制核糖核苷酸还原酶,(E/Z)-NSAH 可降低细胞内脱氧核糖核苷酸的含量,从而抑制 DNA 合成和细胞增殖。该化合物是研究核苷酸代谢和细胞增殖的有效工具。
酶活实验
无细胞核糖核苷酸还原酶抑制试验通常涉及在抑制剂存在下测量放射性标记的CDP转化为dCDP的转化率。反应混合物包含纯化的核糖核苷酸还原酶、底物(CDP或ADP)、还原剂(二硫苏糖醇)以及不同浓度的抑制剂。反应在37°C下孵育30-60分钟,然后通过离子交换色谱或沉淀法将产物与底物分离。IC50值通过绘制抑制率与抑制剂浓度的关系图,并将数据拟合为S型剂量-反应曲线来确定。
细胞实验
(E/Z)-NSAH 的细胞检测方法包括将哺乳动物细胞培养于合适的培养基中,并用浓度范围为 10 nM 至 100 μM 的化合物处理细胞。细胞通常孵育 24-72 小时,并使用 MTT、CCK-8 或基于 ATP 的发光检测法评估细胞活力。可通过 [3H]-胸苷掺入或 BrdU 标记来测量其对 DNA 合成的影响。IC50 值约为 250 nM,由剂量反应曲线确定。该化合物对细胞周期进程的影响可通过流式细胞术进行分析。
动物实验
目前尚无针对 (E/Z)-NSAH 的成熟动物实验方案。作为一种核糖核苷酸还原酶抑制剂,该化合物有望在癌症动物模型中进行评估。典型的核糖核苷酸还原酶抑制剂实验方案包括:将药物以 10-100 mg/kg 的剂量,每日或隔日给药,持续 2-4 周,通过腹腔注射或口服途径给予荷瘤小鼠。随后测量肿瘤体积,并收集组织样本,用于分析核糖核苷酸还原酶活性、脱氧核苷酸池以及 DNA 损伤和细胞凋亡的生物标志物。
药代性质 (ADME/PK)
文献中关于(E/Z)-NSAH的药代动力学性质报道较少。该化合物分子量为306.32 g/mol,结构为腙类,是一种小分子化合物,预计具有中等的口服生物利用度和良好的组织渗透性。E/Z异构体混合物可能表现出不同的药代动力学特征。该化合物的溶解度和稳定性会影响其吸收和分布。需要进一步的药代动力学研究来确定其血浆半衰期、清除率、分布容积和代谢途径。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
现有文献中关于 (E/Z)-NSAH 的毒性数据记录不完整。作为一种核糖核苷酸还原酶抑制剂,该化合物预计会对快速分裂的细胞产生抗增殖作用,这可能导致骨髓、胃肠道上皮和其他高增殖性组织的毒性。需要进行啮齿动物的标准毒性研究,以确定最大耐受剂量、靶器官毒性和安全性。该化合物仅供研究使用,尚未获准用于人体治疗。
参考文献

[1]. Potent competitive inhibition of human ribonucleotide reductase by a nonnucleoside small molecule. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Aug 1;114(31):8241-8246.

其他信息
第一份文件中给出的结构式
(E/Z)-NSAH 是一种用于研究核糖核苷酸还原酶抑制和核苷酸代谢的研究化合物。它是 NSAH 的一种同工酶,是研究 RR 在细胞增殖和 DNA 合成中作用的重要工具。该化合物在无细胞 (32 μM) 和基于细胞 (~250 nM) 的检测中 IC50 值存在显著差异,这凸显了细胞环境对药物活性的重要性。本产品仅供研究使用,不得用于人类治疗。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C18H14N2O3
分子量
306.32
精确质量
306.1
元素分析
C, 70.58; H, 4.61; N, 9.15; O, 15.67
CAS号
54009-54-0
相关CAS号
54009-54-0
PubChem CID
135458654
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.4g/cm3
沸点
526.2ºC at 760 mmHg
闪点
272.1ºC
折射率
1.734
LogP
3.229
tPSA
81.92
氢键供体(HBD)数目
3
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
23
分子复杂度/Complexity
440
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1=CC=C2C(=C1)C=CC(=C2C=NNC(=O)C3=CC=CC=C3O)O
InChi Key
ZZSJOLDICPVVAV-YBFXNURJSA-N
InChi Code
InChI=1S/C18H14N2O3/c21-16-8-4-3-7-14(16)18(23)20-19-11-15-13-6-2-1-5-12(13)9-10-17(15)22/h1-11,21-22H,(H,20,23)/b19-11+
化学名
2-hydroxy-N-[(E)-(2-hydroxynaphthalen-1-yl)methylideneamino]benzamide
别名
SD49-7; J3.555.273A; 2-hydroxy-1-naphthalaldehyde salicyloylhydrazone; ZINC259636; AKOS001601386
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.2646 mL 16.3228 mL 32.6456 mL
5 mM 0.6529 mL 3.2646 mL 6.5291 mL
10 mM 0.3265 mL 1.6323 mL 3.2646 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • Structural organization of the regulatory subunit hRRM1 and steady-state kinetic studies of NSAH–hRR. Proc Natl Acad Sci U S A . 2017 Aug 1;114(31):8241-8246.
  • NSAH binding and structural studies with hRRM1. Proc Natl Acad Sci U S A . 2017 Aug 1;114(31):8241-8246.
  • Sigmoidal dose–response curve for NSAH inhibition of hRRM1. Proc Natl Acad Sci U S A . 2017 Aug 1;114(31):8241-8246.
  • Ligplot of NSAH (purple in color) interactions with human RR1. Proc Natl Acad Sci U S A . 2017 Aug 1;114(31):8241-8246.
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