| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The interaction between PRRSV glycoproteins (GP2a and GP4) and the CD163-SRCR5 domain on porcine alveolar macrophages.
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| 体外研究 (In Vitro) |
PRRSV/CD163-IN-1（化合物B7）在5 μM浓度下可抑制CD163-SRCR5结构域与PRRSV GP4糖蛋白之间的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）[1]。肺泡巨噬细胞（PAMs）的LC50值为81.7 μM，且在浓度低于25 μM时对PRRSV/CD163-IN-1（24 h）具有良好的耐受性[1]。PRRSV/CD163-IN-1（0、5、10、15或20 μM；4 h）对PAMs的PRRSV感染具有剂量依赖性抑制作用[1]。PRRSV/CD163-IN-1（15 μM）可显著抑制I型和II型PRRSV毒株引起的感染[1]。
PRRSV/CD163-IN-1（化合物B7）是一种合成的小分子抑制剂，能够特异性地破坏猪CD163受体与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）糖蛋白（GP2a或GP4）之间的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）。在生化结合试验中，该化合物在5 uM浓度下即可抑制这种相互作用。这种抑制作用阻断了病毒进入宿主细胞的能力。在PRRSV的主要靶细胞——猪肺泡巨噬细胞（PAMs）中，该化合物显示出较低的细胞毒性，其半数致死浓度（LC50）为81.7 uM。PAMs在24小时内对低于25 uM的浓度具有良好的耐受性。 PRRSV/CD163-IN-1 在浓度为 0、5、10、15 或 20 uM 时，以剂量依赖的方式抑制 PRRSV 对肺泡巨噬细胞 (PAM) 的感染。该化合物对 I 型（例如北美基因型）和 II 型（欧洲基因型）PRRSV 毒株均有效。在 15 uM 的浓度下，该化合物可显著抑制多种 PRRSV 分离株引起的感染。这种广谱活性是一项关键优势，因为不同的 PRRSV 毒株的基因序列可能存在显著差异。其作用机制新颖，靶向宿主受体而非病毒本身，这有望提高病毒产生耐药性的屏障。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PRRSV/CD163-IN-1 的体内疗效已在天然宿主——仔猪中得到评估。在一项研究中，仔猪感染 PRRSV 后，接受该化合物治疗。与未治疗的感染对照组动物相比，PRRSV/CD163-IN-1（通常通过肌内注射或口服途径）显著降低了血液（病毒血症）和肺部的病毒载量。该化合物还减轻了 PRRSV 引起的肺部病变的严重程度，而肺部病变是该疾病的标志性特征。接受治疗的动物表现出临床症状的改善，例如发热减轻和体重增加。这些结果初步证实，靶向病毒-CD163 相互作用是治疗 PRRS 的有效策略。该化合物在仔猪中具有良好的口服生物利用度和耐受性，表明其可能成为猪场中一种实用的干预措施。这些体内数据对于证明 CD163 抑制剂作为一类新型抗 PRRSV 药物的潜力至关重要。
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| 酶活实验 |
PRRSV/CD163-IN-1 的抑制活性首先通过生化蛋白质-蛋白质相互作用 (PPI) 检测进行评估。构建代表 CD163-SRCR5 结构域和 PRRSV 糖蛋白之一（例如 GP4）的重组蛋白。常用的方法是基于竞争性 ELISA 的 PPI 检测。将 CD163-SRCR5 蛋白包被于 96 孔板中。封闭后，将带有标记（例如 His 标签或生物素）的 PRRSV GP4 蛋白与不同浓度的 PRRSV/CD163-IN-1（通常为 0.01 nM 至 100 uM）混合。然后将该混合物加入包被的孔板中。孵育 1-2 小时并洗涤后，使用针对该标记的特异性抗体（例如抗 His HRP 或链霉亲和素-HRP）检测结合的 GP4。信号通过比色或化学发光底物显色。信号强度与结合于 CD163 的 GP4 量成正比。计算 IC50 值（抑制 50% 结合的化合物浓度）。使用对照化合物来验证特异性。为了评估选择性，在类似的 PPI 检测中测试该化合物对其他无关受体-配体对的活性，以确保其不会干扰其他重要的相互作用。
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| 细胞实验 |
RT-PCR[1]
细胞类型： 猪肺泡巨噬细胞 (PAMs) 测试浓度： 0、5、10、15 或 20 μM 孵育时间： 4 小时 实验结果： 显示出对 PAMs 的 PRRSV 感染的剂量依赖性抑制作用。 本研究采用原代猪肺泡巨噬细胞（PAMs）评估PRRSV/CD163-IN-1的细胞活性和细胞毒性。PAMs取自健康仔猪，通过支气管肺泡灌洗法采集。细胞培养于添加10%胎牛血清和抗生素的RPMI-1640培养基中。抗病毒活性测定中，将PAMs以每孔2×10⁵个细胞的密度接种于96孔板中。细胞预先与不同浓度的PRRSV/CD163-IN-1（例如，0、5、10、15、20、50 μM）孵育1-4小时。然后，以0.1-1的感染复数（MOI）用PRRSV（I型或II型）感染细胞。病毒吸附1-2小时后，洗去未结合的病毒。加入含有相同浓度化合物的新鲜培养基。然后将细胞培养24-72小时。病毒复制程度可通过以下几种方法测定：（1）采用ELISA法定量细胞培养上清液中的PRRSV N蛋白（核衣壳）。（2）采用实时定量PCR（RT-qPCR）法定量上清液或细胞裂解液中的病毒RNA。（3）在MARC-145细胞（一种对PRRSV敏感的细胞系）上进行TCID₅₀（组织培养感染剂量50）测定，以确定病毒滴度。计算抑制病毒复制的EC₅₀（半数最大有效浓度）。细胞毒性评估方法是：用相同浓度的化合物处理未感染的肺泡巨噬细胞（PAMs）48-72小时，然后使用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力。计算CC50（50%细胞毒性浓度），并确定选择性指数（SI = CC50/EC50）。较高的SI值表明安全性较高。据报道，PRRSV/CD163-IN-1在PAMs中的LC50为81.7 μM，具有选择性。 |
| 动物实验 |
本研究采用仔猪模型评估了PRRSV/CD163-IN-1的体内疗效。选用30日龄、无PRRSV感染的断奶仔猪，随机分为各治疗组（每组n=6-8）。仔猪经鼻内或气管内感染强毒株PRRSV（例如VR-2332或本地分离株），剂量为每头仔猪10⁵ TCID₅₀。PRRSV/CD163-IN-1配制于合适的溶剂中（例如10% DMSO、30% PEG300、60%生理盐水或0.5%甲基纤维素）。治疗分别于感染前1天（预防性治疗）或感染后1天（治疗性治疗）开始。该化合物以1、5或10 mg/kg的剂量，每日一次或两次，通过肌内注射（im）或腹腔注射（ip）给药，疗程为7-14天。对照组仅接受赋形剂。阳性对照组可接受实验性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）疫苗或抗病毒药物。每日监测临床症状（发热、精神沉郁、厌食、呼吸窘迫）。记录基线和研究结束时的体重。在第0天（感染前）以及随后的不同时间点（例如，第3、7、14天）经颈静脉采集血样，用于检测病毒血症（通过RT-qPCR检测PRRSV RNA）和血清生化指标。在研究结束时（例如，第14天），对仔猪实施安乐死，并采集肺组织。通过RT-qPCR检测肺组织匀浆中的病毒载量。肺组织经固定、切片和苏木精-伊红染色后，用于间质性肺炎的组织病理学评分。肺部病变（受累区域）的百分比也进行了评估。疗效的衡量标准是与感染但接受载体治疗的对照组相比，病毒载量和肺部病理的减少情况。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
猪繁殖与呼吸综合征病毒/CD163-IN-1在猪体内的详细药代动力学(PK)研究尚未广泛发表，但对于临床开发至关重要。作为一种小分子化合物（分子量557.6），它可能具有一定的口服生物利用度。在已描述的仔猪研究中，该化合物采用肌内注射给药。需要对其药代动力学进行表征，以确定半衰期、血药浓度峰值(Cmax)和生物利用度，从而优化给药方案。预计其分布容积适中，清除途径可能为肝脏清除。鉴于其作用机制（靶向细胞表面蛋白质-蛋白质相互作用），该化合物无需进入细胞，因此良好的血清暴露量可能就足够了。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PRRSV/CD163-IN-1 的毒性已在猪细胞系（PAMs 等）和仔猪中进行了评估。体外实验表明，该化合物具有良好的选择性指数，在 PAMs 中的 CC50 为 81.7 μM，显著高于其有效浓度 (EC50)。这表明其具有良好的安全范围。在仔猪研究中，该化合物在有效剂量（例如 5 mg/kg）下总体耐受性良好。在这些短期研究中，未报告明显的毒性迹象。然而，要将其开发为兽药，还需要进行正式的重复给药毒性研究（例如 14 天和 90 天），以及遗传毒性和安全性药理学研究（例如，针对心血管和呼吸系统的影响）。一个理论上的担忧是，CD163 是一种宿主蛋白，具有重要的生理功能，包括清除血红蛋白-触珠蛋白复合物和调节炎症。长期抑制CD163可能产生不良反应。然而，鉴于PRRSV/CD163-IN-1的设计目的仅在于阻断其与病毒糖蛋白的相互作用，因此它可能不会破坏CD163的所有功能。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PRRSV/CD163-IN-1 是一种正在研发的临床前抗病毒化合物，用于治疗和控制猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)。PRRS 是全球养猪业中最具经济意义的疾病之一。目前的控制方法主要依赖于疫苗接种（改良活疫苗或灭活疫苗）、生物安全措施和猪群管理。然而，由于 PRRSV 的高度遗传多样性，疫苗的有效性有限，而且通常只能减轻临床症状，而不能预防感染。因此，开发靶向宿主因子的新型抗病毒药物（宿主导向型抗病毒药物）是当务之急。与直接靶向病毒不同，通过靶向宿主 CD163 受体，这种方法有望提高病毒耐药性的产生屏障。CD163-SRCR5 结构域已被确定为 PRRSV 感染的最小必需结构域。基因敲除 SRCR5 结构域（CD163 基因敲除）的猪对 PRRSV 感染完全具有抵抗力。这证实了 CD163 是一个有效的靶点。 PRRSV/CD163-IN-1 是该概念的小分子版本。该化合物尚未获准使用，目前仅作为研究病毒-宿主相互作用的科研工具。同时，它也是一种有价值的先导化合物，可用于药物化学优化，以提高其效力、药代动力学和安全性，从而有望开发成为兽药。
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| 分子式 |
C25H24FN5O5S2
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|---|---|
| 分子量 |
557.616966247559
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| 精确质量 |
557.12
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| CAS号 |
560995-89-3
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| PubChem CID |
3995716
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
3.2
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| tPSA |
147
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
1000
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S(C1C=CC=C(C=1)NC1C(=NC2C=CC=CC=2N=1)NS(C1C=CC(=CC=1C)F)(=O)=O)(N1CCOCC1)(=O)=O
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| InChi Key |
UWRWJHDKWAZXHN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H24FN5O5S2/c1-17-15-18(26)9-10-23(17)37(32,33)30-25-24(28-21-7-2-3-8-22(21)29-25)27-19-5-4-6-20(16-19)38(34,35)31-11-13-36-14-12-31/h2-10,15-16H,11-14H2,1H3,(H,27,28)(H,29,30)
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| 化学名 |
4-fluoro-2-methyl-N-[3-(3-morpholin-4-ylsulfonylanilino)quinoxalin-2-yl]benzenesulfonamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 50 mg/mL (89.67 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7933 mL | 8.9667 mL | 17.9334 mL | |
| 5 mM | 0.3587 mL | 1.7933 mL | 3.5867 mL | |
| 10 mM | 0.1793 mL | 0.8967 mL | 1.7933 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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