Phalloidin-TRITC

别名: Rhodamine-phalloidin; 915013-10-4; starbld0003102; CHEBI:52313 Rhodamine, Phalloidin;橙红色荧光细胞骨架染料, 结合并标记 F-肌动蛋白
目录号: V51062 纯度: ≥98%
Phalloidin-TRITC 是鬼笔环肽的荧光素凝胶,可以标记肌丝蛋白。
Phalloidin-TRITC CAS号: 915013-10-4
产品类别: Fluorescent Dye
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格
500mg
1g
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产品描述
Phalloidin-TRITC 是鬼笔环肽的荧光素凝胶,可以标记肌丝蛋白。标记后可呈现红色荧光素,PE通道可用于荧光成像。
生物活性&实验参考方法
靶点
Fluorescent dye
体外研究 (In Vitro)
1.1 储存液制备
使用DMSO溶剂配制浓度为1mM的母液。
1.2 工作液配制
将储存液用预热的无血清培养基或PBS缓冲液稀释,最终使用浓度范围为200-1000nM。
注意事项:工作液浓度需根据实验需求调整,且需新鲜配制使用。

2.1 细胞前处理
对于悬浮细胞:通过离心收集细胞后,用PBS清洗两次(每次5分钟)
对于贴壁细胞:移除培养基后,用胰酶消化收集细胞,离心去除上清后同样用PBS清洗两次(每次5分钟)
2.2 染色过程
加入1mL配制好的Phalloidin-TRITC工作液,室温避光孵育5-10分钟
2.3 后处理步骤
4℃条件下以400g离心3-4分钟,弃去染色液
用PBS重复洗涤细胞两次(每次5分钟)
最后用1mL无血清培养基或PBS重悬细胞
2.4 观察检测
使用荧光显微镜对染色后的细胞进行观察分析
细胞实验
将蘑菇鹅膏菌的有毒药物Phalloidin注射到组织培养细胞的细胞质中,用肌动蛋白抗体通过免疫荧光显微镜观察细胞内肌动蛋白分布的变化。在低浓度下,鬼笔环肽将非高度聚合或高度聚合程度较低的细胞质肌动蛋白募集到聚集的肌动蛋白聚合物的稳定“岛”中,并且不会干扰预先存在的粗微丝束(应力纤维)。差异聚焦显示,这些由鬼笔环肽诱导的肌动蛋白聚合物岛在细胞质中的水平高于细胞粘附侧存在的微丝亚膜束。细胞质微管的模式不受注射鬼笔环肽的影响;然而,通常与细胞质中的肌动蛋白相关的蛋白质filamin也被招募到岛中。在较高的鬼笔环肽浓度下,观察到细胞收缩。这些结果是根据Wieland和Faulstich及其同事之前的生化研究进行讨论的[综述见Wieland,T.(1977)Naturewissenschaften 64303-309],该研究涉及鬼笔环肽与肌肉肌动蛋白的体外相互作用,这些研究记录了鬼笔环素与肌动蛋白的化学计量反应,促进肌动蛋白聚合,并稳定肌动蛋白聚合物。此外,我们发现,微量注射鬼笔环肽会以浓度依赖的方式干扰细胞运动和细胞生长。这些结果表明,肌动蛋白不同聚合状态之间平衡良好的受控可逆平衡可能是细胞运动的必要条件,也可能影响其他细胞功能,如生长[2]。
参考文献

[1]. Effects of cytochalasin and phalloidin on actin. J Cell Biol. 1987 Oct;105(4):1473-8.

[2]. Phalloidin-induced actin polymerization in the cytoplasm of cultured cells interferes with cell locomotion and growth. Proc Natl Acad Sci U S A. 1977 Dec;74(12):5613-7.

其他信息
Tetramethylrhodamine phalloidin is a tetramethylrhodium dye conjugated to the bicyclic peptide phalloidin via a thiourea linkage. It has a role as a fluorochrome. It is functionally related to a phalloidin and a tetramethylrhodamine.
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C60H70N12O13S2
分子量
1231.400411129
精确质量
1230.462
CAS号
915013-10-4
PubChem CID
44140594
外观&性状
Purple to purplish red solid powder
LogP
2.3
tPSA
406
氢键供体(HBD)数目
12
氢键受体(HBA)数目
17
可旋转键数目(RBC)
8
重原子数目
87
分子复杂度/Complexity
2780
定义原子立体中心数目
10
SMILES
N(C)(C1=CC2=[O+]C3C=C(N(C)C)C=CC=3C(C3C=CC(NC(=S)NC[C@@](O)(C)C[C@@H]4NC(=O)[C@]5(NC([C@H](C)NC(=O)C6C[C@@H](CN6C(C(CSC6NC7C(=CC=CC=7)C=6C5)NC(=O)[C@@]([H])([C@@H](O)C)NC(=O)[C@H](C)NC4=O)=O)O)=O)[H])=CC=3C([O-])=O)=C2C=C1)C
InChi Key
VXNOAAMNRGBZOQ-RUTQKCGOSA-N
InChi Code
InChI=1S/C60H70N12O13S2/c1-28-50(75)65-42-23-39-35-11-9-10-12-41(35)68-56(39)87-26-44(57(81)72-25-34(74)22-45(72)54(79)63-28)67-55(80)49(30(3)73)69-51(76)29(2)62-53(78)43(66-52(42)77)24-60(4,84)27-61-59(86)64-31-13-16-36(40(19-31)58(82)83)48-37-17-14-32(70(5)6)20-46(37)85-47-21-33(71(7)8)15-18-38(47)48/h9-21,28-30,34,42-45,49,68,73-74,84H,22-27H2,1-8H3,(H,61,86)(H,62,78)(H,63,79)(H,65,75)(H,66,77)(H,67,80)(H,69,76)(H,82,83)/b64-31+/t28-,29-,30-,34-,42-,43-,44-,45-,49+,60+/m0/s1
化学名
(3E)-6-[3,6-bis(dimethylamino)xanthen-9-ylidene]-3-[[(2R)-2-hydroxy-3-[(1S,14R,18S,20S,23S,28S,31S,34R)-18-hydroxy-34-[(1S)-1-hydroxyethyl]-23,31-dimethyl-15,21,24,26,29,32,35-heptaoxo-12-thia-10,16,22,25,27,30,33,36-octazapentacyclo[12.11.11.03,11.04,9.016,20]hexatriaconta-3(11),4,6,8-tetraen-28-yl]-2-methylpropyl]carbamothioylimino]cyclohexa-1,4-diene-1-carboxylic acid
别名
Rhodamine-phalloidin; 915013-10-4; starbld0003102; CHEBI:52313
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.8121 mL 4.0604 mL 8.1208 mL
5 mM 0.1624 mL 0.8121 mL 1.6242 mL
10 mM 0.0812 mL 0.4060 mL 0.8121 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们