Wilfortrine (triptolide)

别名: 雷公藤春碱;雷公藤春碱,Wilfortrine
目录号: V54243 纯度: ≥98%
Wilfortrine 是一种具有生物活性的倍半萜生物碱。
Wilfortrine (triptolide) CAS号: 37239-48-8
产品类别: HIV
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
雷公藤碱是一种具有生物活性的倍半萜生物碱。雷公藤碱具有免疫抑制作用,还能抑制小鼠白血病细胞的生长,并具有抗HIV活性。
雷公藤碱(CAS 37239-48-8)是从传统中药雷公藤(Tripterygium wilfordii)中分离得到的二萜环氧化物。雷公藤碱又名雷公藤内酯,是雷公藤的主要生物活性和毒性成分。雷公藤内酯具有强效的免疫抑制、抗炎和抗癌活性。该化合物具有复杂的环状结构,包含一个环氧化物和一个α,β-不饱和γ-内酯环。雷公藤内酯是一种具有重要药理学价值且已知具有毒性的研究化合物。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary molecular target of triptolide is the transcription factor XPB (xeroderma pigmentosum group B-complementing protein), a subunit of the TFIIH complex involved in RNA polymerase II-mediated transcription. Triptolide covalently binds to XPB, inhibiting transcription and leading to decreased expression of many genes. This broad transcriptional inhibition underlies its diverse pharmacological effects, including immunosuppressive and anticancer activities. The compound may also affect other targets such as HSP90 and NF-κB.
体外研究 (In Vitro)
体外研究表明,雷公藤内酯醇对多种癌细胞系具有显著的抗癌活性,包括白血病、胰腺癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌细胞。该化合物的IC₅₀值在低纳摩尔范围内。雷公藤内酯醇可诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖并抑制血管生成。此外,该化合物还具有强效的免疫抑制活性,可抑制T细胞增殖和细胞因子生成。抗炎活性则通过抑制NF-κB和其他炎症通路得以证实。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明,雷公藤内酯醇在癌症、自身免疫性疾病和炎症性疾病的动物模型中均显示出疗效。该化合物在多种癌症的小鼠异种移植模型中也表现出抗肿瘤活性。在类风湿性关节炎、狼疮和器官移植模型中,该化合物也显示出免疫抑制作用。然而,雷公藤内酯醇的治疗窗较窄且毒性较大,限制了其临床应用。目前,该化合物主要用作研究工具和先导化合物,用于后续的衍生物开发。
酶活实验
体外活性测定中,通常使用标准细胞活力测定法(MTT、MTS 或刃天青法)检测多种癌细胞系。将细胞用雷公藤内酯醇进行系列稀释处理,并计算 IC₅₀ 值。机制研究中,采用蛋白质印迹法分析蛋白质表达,采用 qPCR 分析基因表达。转录抑制可通过放射性或荧光标记法检测 RNA 合成来评估。XPB 结合可通过生物化学或生物物理方法进行研究。
细胞实验
在体外细胞研究中,将各种癌细胞系(例如 HeLa、MCF-7、A549、Jurkat)培养于合适的培养基中,并用不同浓度的雷公藤内酯醇处理。分析细胞活力、凋亡、细胞周期分布和蛋白质表达。在免疫抑制研究中,刺激原代 T 细胞或 T 细胞系并用雷公藤内酯醇处理,通过胸苷掺入或 CFSE 稀释法检测细胞增殖。细胞因子生成通过 ELISA 法检测。
动物实验
雷公藤内酯醇的体内动物研究通常采用小鼠模型。在抗癌研究中,首先在免疫缺陷小鼠体内建立肿瘤异种移植模型,然后通过腹腔注射或口服途径给予雷公藤内酯醇,并监测肿瘤生长情况。在自身免疫性疾病研究中,则使用类风湿性关节炎或狼疮的小鼠模型。给予雷公藤内酯醇后,通过临床评分、组织学分析和生物标志物检测来评估疾病进展。这些模型的标准实验方案已在文献中有所描述。
药代性质 (ADME/PK)
雷公藤内酯醇的药代动力学特性已被阐明。由于首过代谢广泛和P-糖蛋白外排,该化合物口服生物利用度低,且蛋白结合率高。雷公藤内酯醇半衰期短,主要通过CYP450酶(尤其是CYP3A4)代谢。该化合物的药代动力学特性给治疗药物的开发带来了挑战。文献中已报道了其具体的药代动力学参数,例如半衰期、清除率和生物利用度。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
雷公藤内酯醇具有显著的毒性,限制了其临床应用。该化合物可引起严重的胃肠道、肝脏、肾脏和生殖毒性。其治疗窗窄是药物研发面临的主要挑战。雷公藤内酯醇是一种强效致畸剂。其毒性部分与其转录抑制机制有关。目前已开发出多种衍生物以提高治疗指数。对雷公藤提取物和纯化雷公藤内酯醇的研究提供了全面的毒理学数据。
参考文献

[1]. Simultaneous determination of four sesquiterpene alkaloids in Tripterygium wilfordii Hook. F. extracts by high-performance liquid chromatography. Phytochem Anal. Jul-Aug 2007;18(4):320-5.

其他信息
已有报道称雷公藤(Tripterygium wilfordii)和雷公藤(Tripterygium hypoglaucum)含有雷公藤素(wilffordlin),相关数据可供参考。
雷公藤内酯醇(Triptolide,又名雷公藤素)是一种具有强效药理活性和显著毒性的研究化合物。它是雷公藤的主要生物活性成分,雷公藤是一种用于治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病的传统中药。雷公藤内酯醇被用作研究转录、炎症和癌症生物学的工具。尽管雷公藤内酯醇衍生物正在研发中,但目前西方国家尚未批准任何含雷公藤内酯醇的药物。该化合物可作为药物化学优化的先导化合物,以提高治疗指数。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C41H47NO20
分子量
873.81
精确质量
873.269
CAS号
37239-48-8
PubChem CID
102004803
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
884.4±65.0 °C at 760 mmHg
熔点
237.5-238.0°C(lit.)
闪点
488.6±34.3 °C
蒸汽压
0.0±0.3 mmHg at 25°C
折射率
1.592
LogP
4.12
tPSA
286.12
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
21
可旋转键数目(RBC)
14
重原子数目
62
分子复杂度/Complexity
1840
定义原子立体中心数目
12
SMILES
CC(=O)OC[C@]12[C@@H]([C@@H]([C@@H]3[C@H]([C@]14[C@@]([C@H]([C@@H]([C@@H]2OC(=O)C)OC(=O)C5=COC=C5)OC(=O)[C@](CCC6=C(C=CC=N6)C(=O)OC[C@@]3(O4)C)(C)O)(C)O)OC(=O)C)OC(=O)C)OC(=O)C
InChi Key
JOKOHWLSQAZHFX-DQZYHKMLSA-N
InChi Code
InChI=1S/C41H47NO20/c1-19(43)54-18-40-32(58-22(4)46)28(56-20(2)44)27-30(57-21(3)45)41(40)39(8,52)31(29(33(40)59-23(5)47)60-34(48)24-12-15-53-16-24)61-36(50)37(6,51)13-11-26-25(10-9-14-42-26)35(49)55-17-38(27,7)62-41/h9-10,12,14-16,27-33,51-52H,11,13,17-18H2,1-8H3/t27-,28-,29+,30-,31+,32-,33+,37-,38+,39+,40-,41+/m1/s1
化学名
[(1S,3R,15R,18S,19R,20R,21R,22S,23R,24R,25R,26S)-20,22,23,25-tetraacetyloxy-21-(acetyloxymethyl)-15,26-dihydroxy-3,15,26-trimethyl-6,16-dioxo-2,5,17-trioxa-11-azapentacyclo[16.7.1.01,21.03,24.07,12]hexacosa-7(12),8,10-trien-19-yl] furan-3-carboxylate
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.1444 mL 5.7221 mL 11.4441 mL
5 mM 0.2289 mL 1.1444 mL 2.2888 mL
10 mM 0.1144 mL 0.5722 mL 1.1444 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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