Acetyl-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11) amide

目录号: V36832 纯度: ≥98%
HS024 是一种选择性 MC4 受体阻断剂(拮抗剂),对 MC4、MC5、MC3 和 MC1 的 Ki 值分别为 0.29、3.29、5.45 和 18.6 nM。
Acetyl-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11) amide CAS号: 212370-59-7
产品类别: Peptides
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产品描述
HS024 是一种选择性 MC4 受体阻滞剂(拮抗剂),对 MC4、MC5、MC3 和 MC1 的 Ki 值分别为 0.29、3.29、5.45 和 18.6 nM。HS024 可增加食物摄入量。
乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11) 酰胺 (HS024) 是一种新型环状 MSH 类似物,具有 29 元环结构,其中包含 Arg5。它被发现是一种超强效且选择性的黑皮质素-4 受体 (MC4) 拮抗剂,具有极高的亲和力 (Ki = 0.29 nM),并且对 MC3 的选择性约为 20 倍。 HS024 可拮抗表达人 MC1、MC3、MC4 和 MC5 受体的细胞中 α-MSH 诱导的 cAMP 反应。体内实验表明,脑室内 (icv) 注射 HS024 可剂量依赖性地增加自由摄食大鼠的食物摄入量(1 nmol 时最大增加 4 倍),且不影响高架十字迷宫和旷场实验中的情绪或运动活性。[1] 乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11) 酰胺,也称为 HS024,是一种新型环状黑皮质素 (MSH) 类似物,具有 29 元环结构。它是黑皮质素-4 (MC4) 受体的选择性拮抗剂。该肽旨在阻断 MC4 受体,MC4 受体是能量稳态和摄食行为的关键调节因子。 HS024 用于研究 MC4 受体在食欲调节和代谢紊乱中的作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
MC1 receptor (Ki = 18.6 ± 3.3 nM) [1]
MC3 receptor (Ki = 5.45 ± 2.06 nM) [1]
MC4 receptor (Ki = 0.29 ± 0.14 nM) [1]
MC5 receptor (Ki = 3.29 ± 1.15 nM) [1]
HS024 targets the melanocortin receptors, with high selectivity for the MC4 receptor. It acts as a potent antagonist, blocking the activation of MC4 by endogenous melanocortin peptides. Its binding affinities (Ki) for the different melanocortin receptor subtypes are: MC4 (0.29 nM), MC5 (3.29 nM), MC3 (5.45 nM), and MC1 (18.6 nM). This selectivity profile, particularly the high affinity for MC4, makes it a valuable tool for studying MC4 receptor function.
体外研究 (In Vitro)
乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11)酰胺 (HS024) 在浓度高达 100 μM 时,对表达人 MC1、MC3、MC4 或 MC5 受体的 COS-1 细胞中的 cAMP 水平没有影响。然而,在 0.1 μM 时,HS024 完全阻断了 α-MSH(MC1 为 10 nM,MC3 和 MC4 为 100 nM,MC5 为 1 μM)在所有四种受体表达细胞中诱导的 cAMP 升高。[1]
体外实验表明,HS024 对 MC4 受体具有强效且选择性的拮抗作用。其对 MC4 受体的 Ki 值为 0.29 nM。它还显示出与MC5(Ki = 3.29 nM)、MC3(Ki = 5.45 nM)和MC1(Ki = 18.6 nM)的结合。这种环状MSH类似物对MC4的选择性比其他黑皮质素受体亚型高约20倍,证实了其作为选择性MC4受体拮抗剂的用途。
体内研究 (In Vivo)
在自由摄食的大鼠中,脑室内(icv)注射乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11)酰胺 (HS024) 可引起强烈的剂量依赖性摄食刺激。1 nmol 时,食物摄入量最大增加 4 倍(4 小时内累积约 6-8 g)。显著效应:1 小时时,仅 1 nmol 剂量可增加摄食量;2、3、4 小时时,所有剂量(0.1、0.33、1.0 nmol)均可增加摄食量。增加量与禁食 24 小时的大鼠相当。[1] 在高架十字迷宫测试中(脑室内注射 20 分钟后,0.02 和 0.1 nmol),与生理盐水组相比,迷宫探索行为无差异:开放臂进入百分比和开放臂停留时间百分比均未发生改变。 [1]
在开放场测试(十字迷宫测试后立即进行)中,HS024 对水平活动(穿越的单元格)或垂直活动(站立)均无影响。粪便颗粒数仅在十字迷宫测试中 0.02 nmol 时增加,而在开放场测试中未见增加。[1]
体内实验表明,HS024 可增加食物摄入量。这种效应是 MC4 受体阻断的直接结果,因为 MC4 受体是重要的厌食(抑制食欲)通路。HS024 通过拮抗该受体,消除了对摄食的抑制信号,从而导致食物消耗增加。这种体内活性证实了 MC4 受体在中枢调节食欲和能量平衡中的作用。
酶活实验
竞争性结合:将瞬时表达人MC1、MC3、MC4或MC5受体的COS-1细胞洗涤后,分装至96孔板中,离心并去除缓冲液。将细胞与恒定浓度的125I-NDP-MSH和不同浓度的未标记HS024在37°C下孵育2小时。用冰冷的缓冲液洗涤后,用0.1 N NaOH消化细胞并计数放射性。使用质量作用定律通过计算机建模分析数据。125I-NDP-MSH的Kd值来自先前的研究。所有实验均进行两次重复,并重复三次。计算Ki值。[1]
cAMP测定:收集转染的COS-1细胞(表达MC1、3、4、5),并在含有0.5 mM异丁基甲基黄嘌呤的无血清培养基中,于37°C下与α-MSH或HS024孵育30分钟。用高氯酸(终浓度 0.4 M)提取 cAMP,中和后,采用蛋白质结合法,使用 3H-cAMP 和牛肾上腺结合蛋白进行定量(4°C,150 分钟)。通过 GF/B 滤膜过滤收集,冲洗后进行闪烁计数。浓度高达 100 μM 的 HS024 对基础 cAMP 水平无影响;0.1 μM 的 HS024 完全阻断了 α-MSH 诱导的四种受体上的 cAMP 水平。[1]
进行 HS024 的体外受体结合试验,以确定其对黑皮质素受体(MC1、MC3、MC4、MC5)的亲和力。标准方案包括使用过表达相应人黑皮质素受体的细胞膜制备物进行竞争性结合实验。使用放射性标记的高亲和力黑皮质素配体,例如 [125I]-NDP-α-MSH,作为示踪剂。将不同浓度的HS024与受体膜孵育,并测量示踪剂的置换情况。根据竞争曲线计算每种受体亚型的Ki值。
细胞实验
HS024 的体外细胞实验采用表达黑皮质素受体的细胞系进行,例如转染了 MC4R 的 HEK293 细胞。将细胞接种后,用不同浓度的 HS024 孵育,随后用已知激动剂(如 α-MSH)刺激。通过定量分析激动剂刺激的 cAMP 生成(黑皮质素受体激活的下游效应)的抑制情况来评估其功能性拮抗作用。根据剂量反应曲线确定该功能性抑制的 IC50 值,从而证实 HS024 的拮抗活性。
动物实验
雄性Wistar大鼠(330-380 g)用水合氯醛(350 mg/kg,腹腔注射)麻醉。立体定位植入一根11 mm、23号套管至侧脑室(坐标:前囟后方0.7 mm,侧方1.4 mm,颅骨下方3.2 mm)。用螺钉和丙烯酸树脂固定,并用针芯封闭。恢复7天。将HS024溶于生理盐水中,通过连接50 μl注射器和聚乙烯管的31号注射器(针尖超出导管尖端1.5 mm)进行给药。使用泵以10 μl/min的流速输注。针头留置15秒。每隔三天在12:00-16:00之间随机注射一次。[1]
喂食:停止喂食;将HS024(0.1、0.33、1.0 nmol,5 μl)脑室内注射到大鼠体内,然后放回笼中。在干净的塑料盘中放置7个预先称重的颗粒(约20 g)。分别在1、2、3、4小时通过称量剩余颗粒和洒落的食物来测量食物摄入量。[1]
高架十字迷宫和旷场实验:在测试前20分钟脑室内注射HS024(0.02、0.1 nmol)或载体。十字迷宫:两个开放臂(50×10 cm)和两个封闭臂(尺寸相同,壁高40 cm),中央区域10×10 cm,高65 cm。将大鼠置于新环境中5分钟,然后将其置于面向开放臂的中央区域;记录4分钟内进入开放臂/封闭臂的次数、在开放臂上的停留时间以及穿越线条的次数。然后进行开放场地实验:木制场地(100x100厘米,墙高40厘米),被划分为16个方格;记录4分钟内动物访问的方格数(四肢均需访问)和站立次数。[1]
HS024的体内动物研究通常包括给啮齿动物注射该肽,通常通过脑室内(ICV)注射以靶向中枢神经系统。给药后,在特定时间内监测食物摄入量。通过比较处理组动物和载体对照组动物的食物消耗量来评估HS024的促食作用。这些研究一致表明,HS024可增加食物摄入量,证明阻断MC4受体是刺激摄食的有效方法。
药代性质 (ADME/PK)
标准参考文献中未详细列出HS024的具体药代动力学数据。作为一种环状肽,其稳定性预计优于线性肽,但仍可能受到蛋白水解酶的降解。中枢给药后的效果表明其可能在大脑局部发挥作用。其生物利用度和半衰期是其体内应用的重要参数,可能需要采用不同的制剂策略来提高其稳定性和递送效率。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
脑室内注射高剂量(0.3 和 1.0 nmol)的乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH (3-11)酰胺 (HS024) 可诱发副作用:0.3 nmol 组 9 只大鼠中有 1 只出现眼球突出和桶滚(沿身体长轴旋转),1.0 nmol 组 10 只大鼠中有 1 只出现上述副作用。未观察到致死性。[1]
HS024(0.33 和 1.0 nmol)可增加溢食行为,但溢食量百分比/4 小时累积食物摄入量 (%Disperitation/CFI) 未受到显著影响。[1]
由于 HS024 是一种研究工具,因此通常不报告其全面的毒理学数据。其毒理学特征预计与其对食欲调节的药理作用相关。高剂量可能导致过度进食及相关代谢紊乱,例如肥胖。作为一种选择性拮抗剂,其对其他黑皮质素受体的脱靶效应需要考虑,但其对MC4的选择性表明其具有研究该特定受体的良好特性。
参考文献

[1]. Discovery of a novel superpotent and selective melanocortin-4 receptor antagonist (HS024): evaluation in vitro and in vivo. Endocrinology. 1998;139(12):5006-5014.

其他信息
乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH(3-11)酰胺(HS024)具有29元环状结构,Cys残基之间通过二硫键连接。一级结构:环状[AcCys3, Nle4, Arg5, D-Nal7, Cys-NH211]α-MSH-(3-11)。其对MC4的亲和力(Ki=0.29 nM)比HS014(3.16 nM)高11倍。29元环中Arg5和Nle4的组合赋予了其超强的MC4选择性。 HS024 是 MC1、MC3、MC4 和 MC5 受体的拮抗剂(与 MC1/MC5 受体的激动剂 SHU9119 和 HS014 不同)。HS024 对 MC4 受体的阻断作用能高效诱导摄食。在有效剂量下,HS024 不影响焦虑或运动活性。[1] HS024,又名乙酰基-(Cys3,Nle4,Arg5,D-2-Nal7,Cys11)-α-MSH(3-11)酰胺,是一种选择性环状黑皮质素-4 (MC4) 受体拮抗剂。它对 MC4 受体具有高亲和力,Ki 值为 0.29 nM,并且对 MC1、MC3 和 MC5 受体具有选择性。体内实验表明,HS024 可增加食物摄入量,证实了 MC4 受体阻断在刺激食欲中的作用。它是研究摄食、能量稳态和代谢紊乱中枢调控的宝贵研究工具。它并非获批药物。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子量
1268.51504
精确质量
1265.569
CAS号
212370-59-7
相关CAS号
HS024 TFA
PubChem CID
25081552
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
密度
1.5±0.1 g/cm3
折射率
1.717
LogP
-1.57
tPSA
550.86
氢键供体(HBD)数目
16
氢键受体(HBA)数目
15
可旋转键数目(RBC)
19
重原子数目
89
分子复杂度/Complexity
2470
定义原子立体中心数目
8
SMILES
CCCC[C@H](NC([C@@H](NC(C)=O)CS)=O)C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(NCC(N[C@H](C(N)=O)CS)=O)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12)=O)CCCNC(N)=N)=O)CC3=CC4=CC=CC=C4C=C3)=O)CC5=CN=CN5)=O)CCCNC(N)=N)=O
InChi Key
PUOCNCOPVAOMDE-LQXMKOPKSA-N
InChi Code
InChI=1S/C58H79N19O10S2/c1-3-4-14-40-51(82)72-41(16-9-20-65-57(60)61)53(84)77-45(25-37-27-64-31-69-37)55(86)75-43(23-33-18-19-34-11-5-6-12-35(34)22-33)54(85)73-42(17-10-21-66-58(62)63)52(83)76-44(24-36-26-67-39-15-8-7-13-38(36)39)50(81)68-28-48(79)71-46(49(59)80)29-88-89-30-47(56(87)74-40)70-32(2)78/h5-8,11-13,15,18-19,22,26-27,31,40-47,67H,3-4,9-10,14,16-17,20-21,23-25,28-30H2,1-2H3,(H2,59,80)(H,64,69)(H,68,81)(H,70,78)(H,71,79)(H,72,82)(H,73,85)(H,74,87)(H,75,86)(H,76,83)(H,77,84)(H4,60,61,65)(H4,62,63,66)/t40-,41-,42-,43+,44-,45-,46-,47-/m0/s1
化学名
(4R,10S,13S,16R,19S,22S,25S,28R)-28-acetamido-25-butyl-13,22-bis[3-(diaminomethylideneamino)propyl]-19-(1H-imidazol-5-ylmethyl)-10-(1H-indol-3-ylmethyl)-16-(naphthalen-2-ylmethyl)-6,9,12,15,18,21,24,27-octaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17,20,23,26-octazacyclononacosane-4-carboxamide
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.7883 mL 3.9416 mL 7.8832 mL
5 mM 0.1577 mL 0.7883 mL 1.5766 mL
10 mM 0.0788 mL 0.3942 mL 0.7883 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们