规格 | 价格 | |
---|---|---|
50mg | ||
100mg | ||
250mg |
体外研究 (In Vitro) |
体外活性:NVP-AEW541 还抑制 InsR、Tek、Flt1 和 Flt3,在纯化激酶/重组激酶结构域测定中,IC50 分别为 140 nM、530 nM、600 nM 和 420 nM。 NVP-AEW541 更具选择性,并且在细胞水平上比 InsR 更有效 27 倍。 NVP-AEW541 抑制 IGF-I 介导的 MCF-7 细胞存活、软琼脂和增殖,IC50 分别为 0.162 μM、0.105 μM 和 1.64 μM。 NVP-AEW541 还降低 NWT-21 细胞中磷酸-IGF-1R 和磷酸-PKB 的水平。 NVP-AEW541 在低血清培养基以及含 10% FBS 的培养基中显示出对 TC-71 肌肉骨骼肉瘤细胞的生长抑制作用。 NVP-AEW541 抑制细胞周期进程并诱导肉瘤细胞系(TC-71、SK-N-MC、SaoS-2、RD/18 和 RH4)中特异性 G1 期停滞。 NVP-AEW541可以抑制人神经母细胞瘤细胞的生长,IC50为0.4-6.8 μM。在这些细胞系中可以检测到亚二倍体部分的增加以及 S 和 G2-M 区室的消耗。 NVP-AEW541 驱动的 IGF-1R 抑制会导致神经母细胞瘤细胞中 Akt 磷酸化的减少,但不会减少 Erk1 和 Erk2 的磷酸化。 NVP-AEW541 抑制神经胶质瘤细胞生长并破坏 HIF1α 稳定启动的自分泌循环。最近的一项研究表明,NVP-AEW541 可抑制 PC3、DU145 和 22Rv1 前列腺癌细胞的增殖和活力,而无需相关的细胞死亡。 NVP-AEW541 降低 22Rv1 和 DU415 细胞中的磷酸 Akt 水平,但不降低 PC3 细胞中的磷酸 Akt 水平,而不影响总 Akt 水平,这表明 PTEN 状态可以决定 NVP-AEW541 与必需 Akt 的有效性。 NVP-AEW541 诱导的放射增敏取决于 Akt 激活状态。 NVP-AEW541 可以增加 PC3、DU145 和 22Rv1 细胞中的 H2AX 磷酸化(DSB 的测量)。激酶测定:NVP-AEW541 溶解在 DMSO (10 mM) 中并储存在 -20 °C。用 DMSO/水 1:1 新鲜配制稀释液。酶测定中 DMSO 的终浓度<0.5%。蛋白激酶测定在 96 孔板中于室温下进行,并通过添加 20 μL 125 mM EDTA 终止。随后,将 30 μL(c-Abl、c-Src、IGF-1R)反应混合物转移至用甲醇预浸泡 5 分钟的 Immobilon-PVDF 上,用水冲洗,然后用 0.5% H3PO4 浸泡 5 分钟,并安装在真空歧管。点样所有样品后,连接真空并用 200 μL 0.5 % H3PO4 冲洗每个孔。取出膜并在摇床上用 1.0% H3PO4 洗涤 4 次,用乙醇洗涤一次。干燥后,安装在 Packard TopCount 96 孔框架中,并添加 10 μL/孔的 Microscint,对膜进行计数。 IC50 值通过对四个浓度(通常为 0.01、0.1、1 和 10 μM)的 NVP-AEW541 的抑制百分比进行线性回归分析来计算,一式两份。 1 个蛋白激酶活性单位定义为 37 °C 下每毫克蛋白质每分钟从 [γ33P]ATP 转移至底物蛋白质的 1 nmol 33P。细胞测定:将 3 × 103 至 6 × 103 个细胞/孔接种到 96 孔板中,总培养基体积为 100 μL/孔。 24小时后添加浓度逐渐增加的NVP-AEW541,一式四份。 72 小时后,通过添加 25 μL/孔戊二醛 (20%) 固定细胞并在室温下孵育 10 分钟。然后用 200 μL/孔 H2O 洗涤细胞 2 次,并添加 100 μL 亚甲基蓝 (0.05%)。室温孵育 10 分钟后,用 200 μL/孔 H2O 洗涤细胞 3 次。添加 200 μL/孔 HCl (3%),在板摇床上室温孵育 30 分钟后,在 650 nm 处测量吸光度。
|
||
---|---|---|---|
体内研究 (In Vivo) |
NVP-AEW541(50 mg/kg,口服)导致基础和 IGF-I 诱导的受体以及 PKB 和 MAPK 磷酸化的消除,在 NWT-21 肿瘤异种移植物中 T/C 值为 14%。 NVP-AEW541 (50 mg/kg) 会导致 HTLA-230 和 SK-N-BE2c 异种移植物中的肿瘤缩小,且没有全身毒性迹象。 NVP-AEW541 可以抑制基质胶涂层室和 HTLA-230 异种移植物中的肿瘤侵袭。
|
||
动物实验 |
|
||
参考文献 |
CAS号 |
1618643-96-1
|
---|---|
相关CAS号 |
475488-34-7; 475489-16-8 (cis-isomer free base);1618643-96-1 (HCl); 2320261-63-8 (cis-isomer HCl);
|
SMILES |
NC1=C2C(N([C@H]3C[C@H](CN4CCC4)C3)C=C2C5=CC=CC(OCC6=CC=CC=C6)=C5)=NC=N1.[H]Cl.[H]Cl
|
InChi Key |
XBUCKSAZHWFXGF-NINBLYJGSA-N
|
InChi Code |
InChI=1S/C27H29N5O.2ClH/c28-26-25-24(21-8-4-9-23(14-21)33-17-19-6-2-1-3-7-19)16-32(27(25)30-18-29-26)22-12-20(13-22)15-31-10-5-11-31/h1-4,6-9,14,16,18,20,22H,5,10-13,15,17H2,(H2,28,29,30)2*1H/t20-,22-
|
化学名 |
7-((1r,3r)-3-(azetidin-1-ylmethyl)cyclobutyl)-5-(3-(benzyloxy)phenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-amine dihydrochloride
|
别名 |
AEW-541 HCl AEW-541 dihydrochloride NVP-AEW541 NVP-AEW 541 NVP-AEW-541 AEW-541 AEW 541 AEW541
|
存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
溶解度 (体内) |
Note: Listed below are some common formulations that may be used to formulate products with low water solubility (e.g. < 1 mg/mL), you may test these formulations using a minute amount of products to avoid loss of samples.
Injection Formulations
Injection Formulation 1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (i.e. 100 μL DMSO stock solution → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(e.g. IP/IV/IM/SC) *Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH ₂ O to obtain a clear solution. Injection Formulation 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (i.e. 100 μL DMSO → 400 μLPEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) Injection Formulation 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (i.e. 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) Example: Take the Injection Formulation 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) as an example, if 1 mL of 2.5 mg/mL working solution is to be prepared, you can take 100 μL 25 mg/mL DMSO stock solution and add to 900 μL corn oil, mix well to obtain a clear or suspension solution (2.5 mg/mL, ready for use in animals). View More
Injection Formulation 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in saline = 10 : 90 [i.e. 100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in saline)] Oral Formulations
Oral Formulation 1: Suspend in 0.5% CMC Na (carboxymethylcellulose sodium) Oral Formulation 2: Suspend in 0.5% Carboxymethyl cellulose Example: Take the Oral Formulation 1 (Suspend in 0.5% CMC Na) as an example, if 100 mL of 2.5 mg/mL working solution is to be prepared, you can first prepare 0.5% CMC Na solution by measuring 0.5 g CMC Na and dissolve it in 100 mL ddH2O to obtain a clear solution; then add 250 mg of the product to 100 mL 0.5% CMC Na solution, to make the suspension solution (2.5 mg/mL, ready for use in animals). View More
Oral Formulation 3: Dissolved in PEG400 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
---|
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。