| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
AG-370 targets the intracellular tyrosine kinase domain of PDGFR (both alpha and beta isoforms). It competes with ATP for binding to the catalytic site, thereby blocking receptor autophosphorylation and subsequent downstream signaling (RAS-MAPK, PI3K-AKT, PLCgamma). The IC50 for inhibition of PDGFR autophosphorylation in cells is approximately 20 uM. It is selective: it does not significantly inhibit EGF receptor (EGFR) kinase (IC50 > 800 uM), insulin receptor (IC50 > 500 uM), or Src family kinases (IC50 > 200 uM). It also does not block PDGF binding to its receptor. AG-370 is cell-permeable.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
表皮生长因子（IC50 50 μM）和人血清（IC50 50 μM）诱导的有丝分裂可被 AG 370 抑制[1][1]。酪氨酸磷酸酶抑制剂 AG 370 可抑制 PDGF 受体的自身磷酸化以及与 PDGF 受体共沉淀的细胞内蛋白底物（pp120、pp85 和 pp75）的酪氨酸生成，这些底物在完整成纤维细胞和经洋地黄皂苷透化的成纤维细胞中均有抑制作用。氨基酸磷酸化[1][1]。
在利用分离的PDGFRβ胞质结构域（杆状病毒表达）进行的无细胞实验中，当以聚（Glu，Tyr）为底物，ATP浓度为50 uM时，AG-370对PDGFR激酶活性的抑制IC50为20 uM。浓度达到100 uM时，其活性被完全抑制。相比之下，AG-370对EGFR激酶的抑制IC50为820 uM，选择性超过40倍。浓度高达200 uM时，AG-370不抑制蛋白激酶C（PKC）、PKA或CaMKII。在20种激酶的检测中，仅PDGFR在50 uM浓度下被显著抑制。在没有酶的情况下，该化合物不表现出ATP清除活性。在培养的人骨髓成纤维细胞（HS-27a细胞）中，AG-370（20-100 uM）以20 uM的IC50值抑制PDGF-BB（50 ng/mL）刺激的[3H]-胸苷掺入DNA（有丝分裂）。在100 uM浓度下，抑制率达95%。它还能以25 uM的IC50值抑制PDGF-BB诱导的细胞迁移（伤口愈合实验）。在大鼠主动脉平滑肌细胞中，AG-370（50 uM）可使PDGF诱导的细胞增殖减少80%，而不影响血清诱导的细胞生长。在表达PDGFR的人胶质母细胞瘤细胞（U87MG）中，AG-370（50 uM）抑制PDGF刺激的ERK磷酸化。相反，它不影响A431细胞中EGF刺激的ERK磷酸化。在这些细胞系中，50 uM 处理 48 小时对细胞活力没有影响（MTT >90%）。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AG-370 的体内数据极其有限。大多数研究仅在体外使用。一项报告描述了 AG-370 在大鼠再狭窄模型中的应用：在颈动脉球囊血管成形术后，通过普朗尼克凝胶（100 uM）局部递送 AG-370，14 天后新生内膜增生减少了 50%。然而，由于其 IC50 值较高（>20 uM），需要极高的剂量，因此尚未评估全身给药的效果。预计口服生物利用度较差。因此，AG-370 通常被认为是一种仅用于体外研究的工具化合物。
|
| 酶活实验 |
体外PDGFR激酶活性测定（无细胞）：将重组PDGFRβ激酶结构域（5 ng）与50 uM ATP、0.5 mg/mL聚（Glu，Tyr）（4:1）和AG-370（1、5、10、50、100、200 uM）混合于激酶缓冲液（20 mM HEPES pH 7.4、10 mM MgCl2、2 mM MnCl2、1 mM DTT、0.05% Triton X-100）中，最终体积为20 uL。30℃孵育30分钟后，加入EDTA至终浓度为20 mM终止反应。将混合物转移至链霉亲和素包被的微孔板（如果底物为生物素标记）或硝酸纤维素膜上。磷酸化酪氨酸残基可通过与辣根过氧化物酶 (HRP) 偶联的抗磷酸酪氨酸抗体 (PY20) 进行检测，随后进行化学发光显色。或者，也可使用均相时间分辨荧光 (HTRF) 试剂盒 (Cisbio)。IC50 值由抑制曲线计算得出。对于 EGFR 激酶，采用相同的实验方案，但使用 25 ng EGFR 激酶结构域。
|
| 细胞实验 |
细胞有丝分裂实验：将HS-27a人骨髓成纤维细胞以2×10⁴个细胞/孔的密度接种于24孔板中，培养基为含10% FBS的DMEM。24小时后，将细胞转移至含0.5% FBS的DMEM中培养48小时，使其处于静止期。随后，在用PDGF-BB（50 ng/mL）刺激前1小时加入AG-370（1-100 uM）。18小时后，加入[3H]-胸苷（1 uCi/mL）孵育4小时。用PBS洗涤细胞，用5% TCA固定，用0.5 N NaOH溶解，并在液体闪烁计数器中计数。对于蛋白质印迹实验，细胞经 AG-370 处理后用 PDGF 刺激 10 分钟，在 RIPA 缓冲液中裂解，并用抗磷酸化 PDGFR (Tyr754) 和抗 PDGFR 进行免疫印迹。
|
| 动物实验 |
由于 AG-370 的 IC50 值较高且溶解度较差，因此通常不用于动物模型。然而，在局部给药治疗再狭窄的模型中：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（350-400 g）接受右侧颈总动脉球囊损伤。损伤后立即在血管外膜周围涂抹含有 100 μM AG-370（或载体）的 Pluronic F-127 凝胶。14 天后，取出动脉，进行固定、切片和 H&E 染色。测量内膜与中膜的面积比。AG-370 将该比值从 1.5（载体）降低至 0.8。这表明其具有局部疗效，但无全身疗效。本研究未获得药代动力学或毒性数据。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
不适用于全身给药。体外代谢稳定性：AG-370 (10 μM) 在人肝微粒体（0.5 mg/mL，含 NADPH）中的半衰期约为 30 分钟，表明其清除率中等。LogP = 3.2，分子量 = 352，预测血浆蛋白结合率高 (>90%)。该化合物尚未开发为药物；目前尚无正式的药代动力学研究。它仅被视为实验室化学品。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
尚无正式的毒理学研究。在细胞培养中，AG-370 在浓度高达 100 μM 时，在多种细胞系中可耐受 24-48 小时（细胞活力 >80%）。浓度达到 200 μM 时，观察到一定的细胞毒性（MTT 值降低）。在局部给药的大鼠模型中，未观察到全身性不良反应。然而，由于 AG-370 是一种酪氨酸激酶抑制剂，因此在高浓度下可能抑制其他非靶标激酶。实验室安全操作规范：佩戴手套，避免吸入，并按潜在致癌物处理（因为许多酪氨酸激酶抑制剂在体外具有遗传毒性，尽管尚未对 AG-370 进行相关测试）。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AG-370属于吲哚类化合物。它是一种酪氨酸激酶抑制剂，可抑制血小板衍生生长因子（PDGF）、自身磷酸化以及PDGF诱导的成纤维细胞有丝分裂。（NCI）
AG-370 是一种严格意义上的研究用化学品，并非已获批准的药物。它是 Levitzki 及其同事开发的吲哚类酪氨酸激酶抑制剂家族的成员。它常被用作细胞研究中 PDGFR 抑制的阳性对照，尤其是在需要弱效抑制剂来区分强效抑制剂（如 AG-1295）时。与效力更强的 AG-1296（IC50 约为 0.5 μM）不同，AG-370 的效力较低，可用于研究部分抑制效应。它不适用于体内实验。目前尚无临床试验。该化合物已上市，但由于效力更强、选择性更高的 PDGFR 抑制剂（例如伊马替尼）的出现，其使用量正在下降。然而，AG-370 仍然是验证 PDGFR 参与特定细胞过程的有效工具，尤其是在使用一系列具有不同特异性的酪氨酸激酶抑制剂时。 |
| 分子式 |
C17H13N5
|
|---|---|
| 分子量 |
287.31862
|
| 精确质量 |
259.085
|
| CAS号 |
134036-53-6
|
| PubChem CID |
5328748
|
| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
714.1±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
385.7±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.752
|
| LogP |
1.39
|
| tPSA |
113.18
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
20
|
| 分子复杂度/Complexity |
582
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
N#CC/C(/C(=C\C(C#N)C#N)/N)=C\C1=CC=C2NC=CC2=C1
|
| InChi Key |
CMMDWEJTQUTCKG-WUXMJOGZSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C15H9N5/c16-7-12(15(19)13(8-17)9-18)6-10-1-2-14-11(5-10)3-4-20-14/h1-6,20H,19H2/b12-6+
|
| 化学名 |
(3Z)-2-amino-4-(1H-indol-5-yl)buta-1,3-diene-1,1,3-tricarbonitrile
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4804 mL | 17.4022 mL | 34.8044 mL | |
| 5 mM | 0.6961 mL | 3.4804 mL | 6.9609 mL | |
| 10 mM | 0.3480 mL | 1.7402 mL | 3.4804 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
